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  豚鼠血清一氧化氮(NO)ELISA试剂盒详细说明

豚鼠血清一氧化氮(NO)ELISA试剂盒详细说明

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产品报价:
2600元
公司名称:
上海劲马实验设备有限公司
所在地区:
上海市
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更新时间:
2016-01-10 04:30
厂商性质:
代理商
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豚鼠血清一氧化氮(NO)ELISA试剂盒详细说明有96T/48T包装规格,价格实惠,质量稳定,欢迎新老客户来电来涵。

豚鼠血清一氧化氮(NO)ELISA试 详细信息

豚鼠血清一氧化氮(NO)ELISA试剂盒详细介绍

豚鼠血清一氧化氮(NO)ELISA试剂盒检测方法:酶联免疫法/酶免法(ELISA)

产品用途:科研ELISA检测试剂盒.本公司可提供实验代测服务.

检测原理: 采用双抗体夹心ABC-ELISA法

产品种属齐全有:人,小鼠,大鼠,豚鼠,猪,犬,兔,牛,羊,猴,兔,马等动物种属。

待检样本:体液,血清,血浆,细胞培养上清液,尿液,组织匀浆,心房水标本等等。

保存条件:2-8℃

联系方式:021-60449724,13296089724

联 系 人:王经理

服务承诺:工作时间内免费的技术咨询和指导,为客户提供来样检测服务,最大限度实验结果的有效性。

 

【注意事项】

1. 从-20℃取出的试剂盒,最好在4℃解冻过夜。盒内每一瓶解冻的溶液在开启瓶盖之前都要轻轻摇匀,避免解冻时出现的分层,否则会出现浓度不均一的现象。

2. 开启试剂盒之前要室温平衡至少30分钟。

3. 配制各种试剂时,切记混匀!

4. 用户在初次使用试剂盒时,应将各种试剂管离心数分钟,以便试剂集中到管底。

5. 建议所有猪IL-1β标准品、样本都做双份检测。

6. 要严格避免操作过程中酶标板干燥。干燥会使酶标板上生物成份迅速失活!

7. 为免交叉污染,要避免重复使用手中的吸头和试管。

【洗板方法】

手工洗板方法:吸去(不可触及板壁)或甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下用力拍几次;将推荐的PBS或TBS洗涤缓冲液至少0.35ml注入孔内,浸泡1-2分钟。根据需要,重复此过程数次。

自动洗板:如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实验过程中。

【样品的准备和保存】

样品如果不立即分析,应分装后冷冻保存,且避免反复冻融。

血清——用干净试管收集血液,室温凝固2小时或4℃过夜,离心1000×g 10分钟,收集血清。立即分析或分装后-20℃冷冻保存。

细胞培养、组织匀浆、体液——离心去除沉淀,立即分析或分装后-20℃冷冻保存。

【样品稀释的一般原则】

用户须查阅文献了解标本内待测因子的含量,决定适当的稀释倍数,以使稀释后样品中待测因子的浓度处于ELISA试剂盒的最佳检测范围。样品的稀释应有详细记录。

【试剂的准备和保存】

A. 猪IL-1β标准品的稀释和使用:在使用前2小时内准备。将冻干品管内加入1ml样品稀释液,彻底溶解后做倍比稀释。

稀释后的猪IL-1β标准品在2小时内使用。

B.生物素标记猪IL-1β抗体工作液:在使用前2小时内准备。

1. 根据每孔需要0.1ml计算总的用量(实际配制时应多配制0.1-0.2ml)。

2. 按10ul生物素标记猪IL-1β抗体加猪IL-1β抗体稀释液990ul的比例配制工作液。轻轻混匀。

C.亲和素-过氧化物酶复合物(ABC)工作液的准备:在使用前1小时内准备。

1. 根据每孔需要0.1ml计算总的用量(实配时应多配制0.1-0.2ml)。

2. 按10ul亲和素-过氧化物酶复合物(ABC)加ABC稀释液990ul的比例配制工作液。轻轻混匀。

D. TMB显色工作液的准备:在使用之前30分钟,按TMB显色液A 9份加 TMB显色液B 1份的比例配制TMB显色工作液。

【操作程序】

1. 确定本次检测所需的已包被猪IL-1β抗体的酶标板孔数目。

2. 将倍比稀释的猪IL-1β标准品各0.1ml依次加入一排7孔中,1孔只加样品稀释液的作为对照。处理后的标本按100ul每孔加入。

3. 酶标板加上盖,37℃反应90分钟。

4. 反应后用自动洗板机吸去酶标板内的液体;或甩去酶标板内液体,再对着吸水纸拍几下。洗涤2次。

5. 将准备好的生物素猪IL-1β抗体工作液按每孔0.1ml依次加入。37℃反应60分钟。

6. 0.01M TBS或0.01M PBS洗涤3次,每次浸泡1分钟左右。

7. 将准备好的ABC工作液按每孔0.1ml依次加入。37℃反应30分钟。

8. 0.01M TBS或0.01M PBS洗涤5次,每次浸泡1-2分钟左右。

9. 按每孔0.1ml依次加入TMB显色工作液,37℃避光反应,反应过程中,要经常的观察,当肉眼可见猪IL-1β标准品的前3-4孔有明显的梯度蓝色,后3-4孔差别不明显时,即可加入TMB终止液0.1ml/孔。(显色反应最长不要超过30分钟)。

10. 用酶标仪在450nm测定O.D.值。

11. 根据样品的吸光值在坐标上找出对应的浓度。用户也可以使用各种应用软件来计算。应记住由于样品稀释了N倍,其实际浓度应该×N。

【操作程序总结】:

准备试剂,样品和猪IL-1β标准品

加入准备好的样品和猪IL-1β标准品,37℃反应90分钟

洗板2次,加入生物素化猪IL-1β抗体工作液,37℃反应60分钟

洗板3次,加入ABC工作液,37℃反应30分钟

洗板5次,加入TMB显色液,37℃反应

加入TMB终止液

30分钟之内读OD值

计算标本待测因子含量

【检测范围】:1000pg/ml→15.6pg/ml。

【敏感性】: <5pg/ml

【特异性】: 系统和其它细胞因子无交叉反应。

【保存】: -20℃ [短期内(如两周)可4℃]

【有效期】: 12个月(-20℃)。

【用途】: 用于体外定量分析液体标本(通用型)。

豚鼠血清一氧化氮(NO)ELISA试剂盒上海恒远生物现货供应,购买立减500元,提供代测服务,产品范围: 人,小大鼠,猪,兔,其它动物细胞因子;细胞凋亡,活性多肽,自身抗体 ,血栓与止血, 骨代谢,肝纤维化,肿瘤,激素内分泌,自身抗体科研ELISA检测试剂盒等。


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