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液相色谱思考题与练习题
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    2017年07月25日
关键词
液相色谱
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资料简介

 思考题与练习题 

1.

液相色谱是如何实现、快速、灵敏的?

解:

    气相色谱理论和技术上的成就为液相色谱的发展创造条件,从它的、高速和高灵敏度得到启发,采用5-10μm微粒固定相以提高柱效,采用高压泵加快液体流动相的流速;设计高灵敏度、死体积小的紫外、荧光等检测器,提高检测灵敏度,克服经典液相色谱的缺点,从而达到、快速、灵敏。

2.

简述液相色谱中引起色谱峰扩展的主要因素,如何减少谱带扩张,提高柱效?

解:

    液相色谱中引起色谱峰扩展的主要因素为涡流扩散、流动相传质、停留流动相传质及柱外效应。
    在液相色谱中要减少谱带扩张,提高柱效,要减少填料颗粒直径,减小填料孔穴深度,提高装填的均匀性,采用低黏度溶剂作流动相,流速尽可能低,同时要尽可能采用死体积较小的进样器、检测器、接头和传输管线等。

3.

色谱柱A柱长为15cm,载体粒度为5μm。另一B柱长为30cm,载体粒度为10μm。两柱的柱效相等吗?

解:

    ∵l=L/dp
    ∴lA=15/0.0005=30000
    lB= 30/0.0010=30000
A柱的折合柱长为30000,B柱的折合柱长也为30000,表明组分在两根柱内从柱入口到出口都经过30000个载体颗粒,两柱的柱效相等。

4.

流动相为什么要脱气?常用的脱气方法有拿几种?

解:

流动相中溶解气体存在以下几个方面的害处 

(1)

气泡进入检测器,引起光吸收或电信号的变化,基线突然跳动,干扰检测;

(2)

溶解在溶剂中的气体进入色谱柱时,可能与流动相或固定相发生化学反应;

(3) 

溶解气体还会引起某些样品的氧化降解,对分离和分析结果带来误差。因此,使用前必须进行脱气处理。 

常用的脱气法有以下几种: 

(1)

加热脱气法;

(2)

抽吸脱气法

(3)

吹氦脱气法;

(4) 

超声波振荡脱气法。

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