《木薯叶片中黄酮醇的测定 高效液相色谱法》等两项国标征求意见

　　【仪表网 仪表标准】根据国家标准化管理委员会国家标准制修订计划，由中国标准化研究院提出并归口，由中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所等单位负责起草的国家标准《农产品中生氰糖苷测定-液相色谱串联质谱法》(计划号：20213494-T-424)、《木薯叶片中黄酮醇的测定 高效液相色谱法》(计划号：20213496-T-424)已形成征求意见稿，按照《国家标准管理办法》的有关规定，现向社会各界公开征求意见。
 

　　《农产品中生氰糖苷测定-液相色谱串联质谱法》
 

　　生氰糖苷亦称氰苷、氰醇苷，是由氰醇衍生物的羟基和 D-葡萄糖缩合形成的糖苷，主要包含亚麻苦苷、苦杏仁苷、百脉根苷、蜀黍苷、紫杉氰苷、β-龙胆二糖丙酮氰醇、β-龙胆二糖甲乙酮氰醇、黑野樱苷等。已知 2600 多种植物含有生氰糖苷，其中 26 种为重要的经济作物，木薯、苦杏仁、亚麻籽等作物的可食部位氰苷含量较高。含有生氰糖苷的植物被动物采食、咀嚼后，植物组织结构遭到破坏，在适宜的条件下生氰糖苷与其共存的水解酶作用产生氢氰酸和醛类化合物，造成呕吐、头晕、头痛、腹泻等中毒现象甚至死亡。据文献报道，生氰糖苷的急性中毒症状包括心律紊乱、肌肉麻痹和呼吸窘迫。生氰糖苷引起的慢性氰化物中毒现象也比较常见，如痉挛性截瘫、热带神经病变和甲状腺肿。作为含氰化物农产品质量安全的关键指标之一，生氰糖苷的测定方法需要尽快确立。
 

　　本文件按照GB/T 1.1—2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。本标准规定了农产品中生氰糖苷的测定方法的原理、试剂和材料、仪器和设备、试样制备、分析步骤、结果计算及精密度等内容。
 

　　方法原理：
 

　　试样中生氰糖苷，经80%甲醇水溶液提取，固相萃取柱净化，液相色谱-串联质谱测定，外标法定量。
 

　　仪器和设备：
 

　　1.液相色谱-串联质谱仪：配电喷雾离子源。2.分析天平：感量0.1mg 和0.01mg。3.分析研磨机。4.涡旋震荡器。5.离心机：带有 15 mL 转子，转速 ≥ 5000 r/min。6.真空过柱装置。7.超声波清洗器：功率 ≥ 500 W。8.氮吹仪
 

　　试样制备：
 

　　新鲜样品用水洗净表面附着的杂物，用吸水纸水分擦干，取可食部，切碎，放入研磨杯中，加入液氮冷冻后用研磨机粉碎至颗粒均匀；固体干样品取可食部，粉碎后过0.20 mm筛。样品制备后连续完成8.1 -～8.2的全部过程。
 

　　本标准适用于木薯、亚麻籽、苦杏仁、竹笋、高粱等含氰化物农产品中8种生氰糖苷类化合物含量的测定。
 

　　《木薯叶片中黄酮醇的测定 高效液相色谱法》
 

　　木薯叶中含有丰富的黄酮类化合物，该物质是自然界药用植物中主要的抗氧化活性成分之一，同时具有抗过敏、抗炎症和抗癌性能等。木薯叶中黄酮类化合物以黄酮醇类物质为主，黄酮醇类是指含有 2 一苯基一 3 一羟基(或含氧取代)苯骈γ 一吡喃酮(2 一苯基-3 一羟基一色原酮)类化合物，是各类黄酮化合物中数量最多、分布最广泛的一类，已发现约有1700多种，常以不同的苷类稳定存在。大量的研究证明，黄酮醇类化合物具有消除氧自由基、调节血脂、抗肿瘤、抗病毒等生理活性。
 

　　目前，已有的国内关于黄酮类物质的检测标准，产品主要涉及有枸杞、茶叶、葡萄酒、大豆、柑橘、荞麦及其制品等。黄酮类化合物的测定有很多种方法，对于黄酮类化合物的相互分离以及单一成分的定量分析，常采用高效液相色谱法，而对于总黄酮的测定，常采用分光光度比色法。发布的现行有效的标准主要有《粮油检验 大豆异黄酮含量测定 高效液相色谱法》(GB/T26625-2011)、《保健食品中大豆异黄酮的测定方法 高效液相色谱法》(GB/T23788-2009)、《蜂胶中总黄酮含量的测定方法 分光光度比色法》(GB/T20574-2006)、《饲料添加剂 4、7-二羟基异黄酮》(GB/T25174-2010)以及进出口检验标准《出口食品中总黄酮的测定》(SNT4592-2016)等。关于木薯叶片中总黄酮和黄酮醇化合物的检测方法国内外标准尚是空白。
 

　　本文件按照GB/T 1.1—2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。本标准参考GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法；GB/T 32467 化学分析方法验证确认和内部质量控制术语及定义等文件编制而成。本标准规定了高效液相色谱法测定木薯叶片中黄酮醇的测定方法的原理、试剂与材料、仪器与设备、试样制备、分析步骤、结果计算与表示、精密度的要求。
 

　　方法原理：
 

　　试样中黄酮醇经50%乙醇溶液超声波辅助提取，提取液经离心，上清液混合后过滤，用高效液相色谱仪测定，外标法定量。
 

　　仪器和设备：
 

　　1.高效液相色谱仪：配配紫外检测器或二极管阵列检测器。2.分析天平：感量0.1mg 和0.01g。3.超声波清洗器：功率≥500W。4.离心机：带15mL 转子或适配器，转速≥5000r/min。5.植物组织研磨仪：带0.2mm 的筛。6.烘箱：温度可调。
 

　　本标准适用于木薯新鲜叶片和木薯叶粉中4种黄酮醇类化合物含量的测定。