大鼠热休克蛋白70elisa检测试剂盒实验试剂准和操作步骤

大鼠热休克蛋白70(HSP-70)elisa检测试剂盒试剂准备：
试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡后方可使用。
1. 标准品复溶：试剂盒提供6管标准品，每管已标定浓度，并且冻干。实验前在每个标准品管中加入0.5mL样本稀释液，盖好后静置10分钟以上，然后反复颠倒/搓动助其溶解，使其恢复为每个标准品管身标注的浓度。
2. 20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。

大鼠热休克蛋白70(HSP-70)elisa检测试剂盒操作步骤：
1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃;                      2. 设置标准品孔、样本孔和空白孔，空白孔什么都不加；标准品孔各加不同浓度的标准品50μL； 3. 待测样本孔先加待测样本10μL，再加样本稀释液40μL；                                                    4. 随后标准品孔和样本孔中（空白孔不加）加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。                                         5. 弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。                                                                                     6. 所有孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。                                                     7. 所有孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。