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样本收集与前处理:
红细胞:需按照试剂盒中说明书上红细胞的测定方法进行提取后测定。
动物组织样本:可用生理盐水按重量体积比制备成组织匀浆液,离心取上清测定。
培养细胞、细菌、植物组织:常用PBS作为匀浆介质破碎后离心取上清测定。
使用本试剂盒中的ATP检测裂解液裂解获得的细胞或组织样品,不仅可以用于ATP检测,还可用于检测蛋白浓度、进行SDS-PAGE或一些常规的较易溶解蛋白的Western检测。
本试剂盒的使用方便快捷,通常10-20个样品可以在30-60分钟内测定完毕。
本ATP检测试剂盒的检测灵敏度低于S0027,但高于S0026B;本试剂盒对于一些特殊样品的兼容性低于S0026B。
ATP(adenosine 5'-triphosphate)水平。细胞和组织样品一步裂解即可完成样品制备,检测灵敏度高达1nmol/L,化学发光可以持续稳定达30分钟,并且获得的样品还可以同时进行Western检测。
ATP,作为重要的能量分子在细胞的各种生理、病理过程中起着重要作用。ATP水平的改变,会影响细胞的功能。通常细胞在凋亡、坏死或处于一些毒性状态下,ATP水平会下降,而高葡萄糖刺激等对于一些细胞可以上调细胞内ATP水平。通常ATP水平的下降表明线粒体的功能受损或下降,在细胞凋亡时ATP水平的下降通常和线粒体的膜电位下降同时发生。
样品制备非常简单。本试剂盒提供了可以用于细胞和组织裂解的ATP检测裂解液,简单裂解后即可用于ATP检测。无需进行高氯酸或(TCA)抽提,或样品裂解后的煮沸等繁琐操作。
本试剂盒进行了特殊的优化设计,使检测ATP时的化学发光非常稳定。对于ATP标准曲线的检测结果显示,在开始反应后10分钟内化学发光无明显下降,开始反应后30分钟内化学发光的下降不超过10%。
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