单克隆抗体( mAbs )已经成为生物制药工业中生长速度快的部分,具有先进的分子工程和抗体人源化技术,使得为多种医学疾病如癌症、自身免疫性疾病、心血管疾病和传染病产生治疗性抗体成为可能。
这些候选物初使用杂交瘤技术或抗原免疫后的初级B细胞筛选产生。在抗体发现过程中,初级筛选对于鉴定具有结合特异性、种间交叉反应性、选择性和亲和性等基本特性的细胞系具有重要意义。
接下来评估满足这些特性的克隆的其它重要特性,这些特性可以包括IgG同种分型、抗体定量和细胞计数/健康,它们对于选择铅分子是必需的,如图1所示。
小鼠抗体是使用酶联免疫吸附测定( ELISA )从细胞上清液中定量的,这是一种常规技术,尽管如此,它是持久的并且仅测量一个终点,并且经常需要样品稀释和多次洗涤步骤。
除此之外,在获得足够的洞察用于抗体的下游克隆之前,必须进行其它测试,例如分离的IgG同种分型和细胞数量/健康。可以使用Intellicyt鼠标IgG类型和滴度试剂盒简化这一传统工作流程。
这是一种高通量多路分析,具有宽的动态范围,避免了样品稀释和洗涤步骤。它提供了一个简单的工作流程,能够同时测量五个不同的端点:
高含量的数据使得单克隆和多克隆孔之间能够快速区分。它告诉研究者产生了多少IgG,用于定量稳定克隆和下游功能测定。
它鉴定了同种型,有助于为PCR介导的基因克隆设计正确的引物。后,在进行RNA分离之前,它监测细胞的增殖和健康。
小鼠IgG类型和效价测定是Intellicyt综合抗体发现平台的一个组成部分。另一种解决方案是iQue Screener PLUS平台,它可以加快数据采集速度,并使384孔板的分析微型化。经过20分钟的数据采集,ForeCyt软件提供了强大的数据挖掘工具,可以进行大规模杂交瘤/ B细胞筛选研究。
ForeCyt软件上的Panorama功能提供了动态多板数据分析,包括具有用户定义标准的图谱,用于检测和识别包含所需IgG同种型抗体浓度和细胞健康的样品,这在分析大型多板筛选活动时非常重要。总之,小鼠IgG类型和滴度测定能够简化和加速抗体发现的工作流程,这意味着获得可操作结果的时间更短。
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