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使用方法：

1.  常用筛选浓度

注意：用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型，培养基，生长条件和细胞代谢率而变化，推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线（kill curve），即剂量反应性曲线，来确定最佳筛选浓度。

一般而言，哺乳动物细胞50-500μg/mL；细菌/植物细胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 杀灭曲线的建立

注意：为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株，需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度，可通过建立杀灭曲线（剂量反应曲线）来实现，至少选择5个浓度。

1）  第一天：未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上，37℃，CO2培养过夜；注：对于需要更高密度来检测活力的细胞，可增加接种量。

2）  根据细胞类型，设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例，可设定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml，然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。

3）  第二天：替换旧的培养基，换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。

4）  接下来每3-4天更换新的含药物培养基。

5）  按照固定的周期（如每2天）进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数（通常是7-10天）内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。

3.   稳定转染细胞的筛选

1）     转染48h后，用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞（直接传代或者稀释后传代）。

注意：细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密，其效率会降低。为了得到较好的筛选效果，最好将细胞稀释至丰度不超过25%

2） 每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。

3）  筛选7天后观察并评估细胞克隆（集落）的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间，这取决于宿主细胞类型，转染，以及筛选效果。

4） 挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板，继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。

5） 之后更换正常培养基培养即可。

公司产品具有质量可靠、效果稳定、灵敏度高、操作简单、易保存等特点，咨询并订购！

产品名称：齐-欧氏固定液价格

货号：BJ-01R3718

规格：500ml

分类：固定液

储存条件：室温,避光,12个月

用途：主要由铬酸、硫酸铜等组成，多用于植物组织的固定。

注意事项：

注意事项：

1、尽注意无菌操作，避免污染。

2、避免反复冻融。

3、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

标准溶液的配制：

1.直接配制法    对于纯净的物质(称做基准物质)可准确进行称量，用蒸馏水溶解后，转移到一定容积的容量瓶中稀释至标线，溶液的准确浓度可以直接计算出来。溶质的纯度、性质等对浓度有较大影响，为此，对用来直接配制标准溶液用的基准物质必须具备以下条件：

(1)物质的纯度要高，含量不得低于99.9％，杂质的含量应当少到可以忽略的程度。

(2)物质的分子组成应与其化学式*符合，包括结水合物中的结品水含量也必须与其化学式相符合。如硼砂Na2B4O7·10H2O等。

(3)性质稳定，贮蔵时应不发生变化，不易吸收空气中的水分、二氧化碳等气体而改变其成分，不易风化潮解和被空气氧化，烘干时不易分解等。此外最好使用分子量较大的基准物质以减小称量误差。

2.间接配制法    凡不符合基准物质条件的物质，可先配制成近似所需浓度的溶液，再用基准物质溶液或能与其发生定量反应的标准溶液进行滴定，求其准确浓度，这种通过滴定来确定准确浓度的操作叫做“标定"。间接法配制近似浓度溶液时不需用分析天平称量和容量瓶配制，可用台秤、量筒等器皿。将称好的物质转移到干净的试剂瓶中，先加少量蒸馏水将其溶解，继续用量筒加蒸馏水至需要量即可。由于大多数试剂不符合基准物的条件，故间接法配制标准溶液是经常的。如固体NaOH因易吸收空气中的水分而潮解和吸收CO2使表面变质；浓盐酸因易挥发而无法准确称量；不易得到分析纯级的试剂等，这些物质的标准溶液须用间接法来配制，经标定后再做标准溶液使用。

标准溶液的标定：

1.用基准物质标定法

(1)多次称量法    用减重法精密称取几份(如2～3份)基准物质，分别倒入编号的干净锥形瓶(或烧杯)内，各加少量蒸馏水溶解，再加指示剂后分别用待标定溶液滴定至等当点，各自记录所消耗待标定溶液的体积，结合基准物质的重量分别算出溶液的准确浓度，最后取平均值做为标准溶液的浓度。

(2)移液管法    精密称取一份基准物质，在干净的小烧杯内加少量蒸馏水溶解，顺玻棒全部转移到已校正好的容量瓶中，多次冲洗烧杯洗液并入容量瓶中，最后配成一定体积的溶液，混匀。每次滴定用配套的移液管吸取并转移至锥形瓶中，加指示剂后用待标定溶液滴定至等当点，每次做好记录，根据所消耗待标定溶液的体积，结合基准物质的重量，分别算出溶液的准确浓度取平均值做为标准溶液的浓度。

2.比较法标定    如果待标定溶液能与某标准溶液进行反应，可吸量一定体积的某标准溶液，用待标定溶液滴定，或吸量一定体积的待标定溶液，用某标准溶液滴定。根据两溶液所消耗的毫升数及某标准溶液的浓度，按N1V1＝N2V2式可以计算出待标定溶液的准确浓度。这种用标准落液来测定待标定溶液准确浓度的过程称为“比较法"标定。如果某标准溶液的浓度由于某些原因不够准确时，就会直接影响待标定溶液浓度的准确性，显然比较法不如用基准物质直接标定的方法精确，但比较法简便易行。

标定完毕，盖紧标准溶液试剂瓶塞，瓶签上注明标准溶液名称、准确浓度和日期等。

Xylohypha bantania木丝霉染料法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周PGAM1/PGAM2  磷酸变位1抗体 规格: 0.1ml

小鼠线粒体DNA LAMP试剂盒 种源性检测/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 1-2周NETO1  脑脂蛋白受体蛋白1抗体 规格: 0.2ml

Wildebeest-associated Malignant Catarrhal Fever Virus (WA-MCF)牛羚关联恶性卡他热病毒探针法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周GTSE1/G2 and S phase expressed 1  G2期/S期应答相关蛋白1抗体 规格: 0.2ml

Ralstonia solanacearum青枯雷尔氏PCR试剂盒 植物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周RBP4  醇结合蛋白4抗体 规格: 0.1ml

Herba dianthi瞿麦PCR鉴定试剂盒 中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-4周Goat Anti-Bovine IgG/AP  碱性磷酸（AP）标记的羊抗牛IgG 规格: 0.1ml

Human Rhinovirus 9 人鼻病毒9 LAMP试剂盒 动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周KCTD11  钾通道四聚体结构域蛋白11抗体 规格: 0.2ml

Equine Herpesvirus 3 (EHV-3)马疱疹病毒3型探针法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周CCDC127  卷曲螺旋结构域蛋白127抗体 规格: 0.2ml

Cacumen platycladi侧柏叶探针法PCR鉴定试剂盒 中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-4周Phospho-p95/NBS1 (Ser343)  磷酸化DNA修复蛋白NBS1抗体 规格: 0.1ml

Serpulina spp.小蛇属通用LAMP试剂盒 动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周Hamartin/TSC1  结节性硬化症蛋白1抗体 规格: 0.1ml

Cytoplasmic Polyhedrosis Virus(CPV)质型多角体病毒探针法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周IGSF1  抑制素结合蛋白抗体 规格: 0.2ml

齐-欧氏固定液价格黄豆黄素 订购|咨询 规格： 20mg 人CDK活化激装配因子MAT1(MNAT1)ELISA试剂盒人96T78-5000 pg/mL大鼠纤溶抗纤溶复合物(PAP)ELISA试剂盒，英文名：PAP ELISA Kit

4,7-二羟基-1,10-菲啰啉(>98.0%(HPLC)) 质量规格：>98.0%(HPLC) 4,7-Dihydroxy-1,10-phenanthroline 酒假丝酵母 Candida kefyr金色产色链霉 Streptomyces aureochromogenes

辛;纯品型;标准品;有证书 订购|咨询 规格： 0.1g ELISA Kit for Human T-cell surface glycoprotein CD8 alpha chain小鼠P物质受体(SP-R)ELISA试剂盒，英文名：SP-R ELISA Kit

土荆皮、土槿皮  英文名称：Pseudolaric acid, Pseudolaric acid   保存：-20℃   规格：HPLC≥98% 20mg/支 微管蛋白β tubulin抗体 Tubulin β

九里香（千里香）  英文名称：Murraya paniculata (Trinidad)   保存：-20℃   规格：1.5g 螺旋环螺旋蛋白2抗体  

无水柠檬 订购|咨询 规格： HPLC≥98%;100mg 早期B淋巴细胞因子1抗体 ADM2 ELISA Kit 肾上腺髓质素2(ADM2)ELISA试剂盒

多潘立 订购|咨询 规格： 100mg ELISA Kit for Human Nucleolar and spindle-associated protein 1大鼠状旁腺相关蛋白(PTHrP)ELISA试剂盒，英文名：PTHrP ELISA Kit

核黄 英文名称：Riboflavin sodium phosphate   保存：-20℃   规格：100mg G蛋白信号调节因子14抗体

银杏C 规格： HPLC≥98%;20mg 订购|咨询 人次核糖基转移1(HPRT1)ELISA试剂盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠胱天11(P11)ELISA试剂盒，英文名：P11 ELISA Kit

地龙(参毛环蚓)  英文名称：Earthworm (cf. Mao Huanyin)   保存：-20℃   规格：1g 前列腺肿瘤高表达蛋白1抗体

牡荆素葡萄糖苷  英文名称：Vitexin glucoside   保存：-20℃   规格：HPLC≥98% 20mg/支 唾液结合性免疫球蛋白样凝集素1抗体

哌  英文名称：Pipemidic Acid   保存：-20℃   规格：50mg G蛋白信号转导调节因子5抗体

胺;纯品型;标准品;有证书 订购|咨询 规格： 0.25g 人成髓细胞素(Myeloblastin)ELISA试剂盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠酰转移(ChAT)ELISA试剂盒，英文名：ChAT ELISA Kit