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备试剂与收集血样:
1. 收集标本:血清、血浆(EDTA 、柠檬酸盐、肝素抗凝)、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测, 2-8 ℃ 保存48 小时;更长时间须冷冻( -20 ℃或 -70 ℃ )保存,避免反复冻融。
2. 标准品液配制:使用前加入0.5ml 蒸馏水 混匀,配成 120 0ng/ml 的溶液 。 设标准 管 8 管,管加标本稀释液 900ul ,第二至第八管加入标本稀释液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的标准品溶液 100ul 混匀后用加样器吸出 500ul ,移至第二管 。如此反复作对倍稀释,从第七 管 中吸出 500ul 弃去。第八 管 为空白对照。
3. 10× 标本稀释液用蒸馏水作 1: 1 0 倍稀释( 示例: 1ml浓稀释液 +9ml 蒸馏水)。
4. 洗涤液:用重蒸水 1:20 稀释(示例:1ml 浓缩洗涤液加入 19ml 的重蒸水)
产品名称 | 大鼠骨粘连蛋白(ON)elisa进口试剂盒 |
英文名称 | Rat osteonectin (ON) ELISA Kit |
货号 | BJ-G9645 |
规格:96T/48T
特点:灵敏性高、特异性强、重复性好
用途:科研实验等领域科学研究,不得用于临床诊断
运输:快递(根据客户要求,选择具体的运输方式)
试剂盒种属:羊、鸡、鸭、鱼、人、大鼠、小鼠、豚鼠、仓鼠、裸鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛等动植物。
待检样本:体液、血清、血浆、细胞培养上清液、尿液、组织匀浆、心房水标本等等
检测程序:
1. 加样:每孔各加入标准品或待测样品 100ul ,将反应板充分混匀后置 37 ℃ 120 分钟。
2. 洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤 4-6 次,向滤纸上印干。
3. 每孔中加入抗体工作液10 0ul 。将反应板充分混匀后置 37 ℃ 6 0 分钟。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶标抗体工作液100ul 。将反应板置 37 ℃ 3 0 分钟。
样本实验前准备:
ELISA进口试剂盒液体样本:包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。
(1)血清
室温血液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(2)血浆:
应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(3)尿液:
用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。
(4)细胞培养上清:
检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。
(5)培养细胞
检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(6)组织标本
切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
实验步骤:
石蜡包埋组织切片 3~4μm 厚度
1.烤片: 将待做切片置于切片架上,于 60℃恒温烤箱中至少烤 1 hr;
2.脱蜡: 切片放入盛有二甲苯的容器中脱蜡 3 次(即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ),每次10 min;
3.水化: 切片经下行酒精水化,无水乙醇 5min,95%乙醇 2 次(每次 2min),85%乙醇 2 min;75%乙醇 2min,自来水冲洗,ddH2O 洗 2×2min;
4.抗原修复: 根据抗体说明书推荐方法进行抗原修复,常采用高压、微波(温度达到 98~100℃)或酶消化修复法,室温自然冷却,自来水冲洗,ddH2O 洗 2×2min,TBS 洗涤(2×2min)(具体修复方法见附 1)* 注:有些抗原勿需修复,直接进入第 5 步封闭。
5.封闭: 滴加试剂 B,37℃湿盒孵育 30 min;
6.加一抗:滴加用试剂 C(即用型一抗),37℃湿盒孵育 2 hr 或 4℃过夜;
7.洗涤: TBS-T 洗涤(3×5 min);
8.封闭: 滴加试剂 B,37℃湿盒孵育 10 min;
9.加二抗: 滴加用抗体稀释液稀释的生物素化二抗(试剂 D),37℃湿盒中孵育30 min;
10.洗涤: TBS-T 洗涤(3×5 min);
11.封闭: 滴加试剂 Tween 20,37℃湿盒孵育封闭 20 min;
12.加 HRP-SA: 滴加用试剂 C 稀释的试剂 E(1:50~200,终浓度 5~20 nM),37℃湿盒中孵育 30 min;
13.洗涤: TBS-T 洗涤(3×5 min),TBS 洗涤(2×5 min);
14.显色:应用 DAB 溶液(试剂 F)显色;
15.复染:自来水充分冲洗,复染,脱水,透明;
16.封片: 待组织标本干后,用试剂缓冲甘油封固剂封片;
17.观察成像: 显微镜下观察成像。
人粒细胞趋化蛋白2(GCP-2)酶联免疫吸附测定试剂盒 别称:CXCL6, GCP2, SCYB6, CKA-3 Human GCP-2(Granulocyte Chemotactic Protein 2) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测Human 血清,血浆或其他生物体液中天然及部分重组GCP-2浓度
人C肽(C-P)酶联免疫吸附测定试剂盒 别称:Connecting Peptide Human C-P(C-Peptide) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测Human 血清,血浆或其他生物体液中天然及部分重组C-P浓度
人褪黑素(MT)酶联免疫吸附测定试剂盒 别称:N-Acetyl-5-Methoxytryptamine Human MT(Melatonin) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测人血清、血浆或其他相关生物液体中天然及部分重组MT浓度。
二乙酰一肟(>98%,BR) Diacetyl monoxime 质量规格:>98%,BR 霍乱弧菌(Vibriocholerae)鉴定16SrDNAPCR扩增检测试剂盒20
马来酸二乙酯(>98%,BR) Diethyl maleate 质量规格:>98%,BR 肌动蛋白聚合作用(polymerization)检测试剂盒20
二氢细胞松弛素(>98%,BR) Dihydrocytochalasin B 质量规格:>98%,BR 鸡1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βDglucosidase)ELISA检测试剂盒Chicken1,3-βDglucosidaseELISAKit 96T/48T
二异辛胺(>98%,BR) Diisooctylamine 质量规格:>98%,BR 鸡17-酮类(17-KS)ELISA检测试剂盒Chicken17-ketosteroids,17-KSELISAKit 96T/48T
马来酸二甲酯(>98%,BR) Dimethyl maleate 质量规格:>98%,BR 鸡5核苷酸酶(5-)ELISA检测试剂盒Chicken5-Nucleotidase,5-ELISAKit 96T/48T
丁二酸二甲酯(>99%,BR) Dimethyl succinate 质量规格:>99%,BR 鸡B因子(BF)ELISA检测试剂盒ChickenfactorB,BFELISAKit 96T/48T
二甲基甲酮钠盐(>97%,BR) Dimethylglyoxime salt 质量规格:>97%,BR 鸡C反应蛋白(CRP)ELISA检测试剂盒ChickenC-ReactiveProtein,CRPELISAKit 96T/48T
直接蓝71(≥50%,BR) Direct blue 71 质量规格:≥50%,BR 鸡L苯氨酸解氨酶(PAL)ELISA检测试剂盒ChickenL-Phenylalanineammonla-lyase,PALELISAKit 96T/48T
天狼猩红 Direct red 80 质量规格:BS 鸡N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)ELISA检测试剂盒ChickenN-acetyl-β-D-glucosaminidase,NAGELISAKit 96T/48T
DL-苯甘氨酸(>98%,BC) DL-alpha-Phenylglycine 质量规格:>98%,BC 鸡α干扰素(IFN-α)ELISA检测试剂盒ChickenIerferonα,IFN-αELISAKit 96T/48T
火炬松(loblollypine)培养基500毫升溶液/片剂 第威德合金 Devarda's alloy 质量规格:工业级
霍乱弧菌(Vibriocholerae)鉴定16SrDNAPCR扩增检测试剂盒20 二乙酰一肟(>98%,BR) Diacetyl monoxime 质量规格:>98%,BR
肌动蛋白聚合作用(polymerization)检测试剂盒20 马来酸二乙酯(>98%,BR) Diethyl maleate 质量规格:>98%,BR
鸡1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βDglucosidase)ELISA检测试剂盒Chicken1,3-βDglucosidase 96T/48T 二氢细胞松弛素(>98%,BR) Dihydrocytochalasin B 质量规格:>98%,BR
鸡17-酮类(17-KS)ELISA检测试剂盒Chicken17-ketosteroids,17-KS 96T/48T 二异辛胺(>98%,BR) Diisooctylamine 质量规格:>98%,BR
鸡5核苷酸酶(5-)ELISA检测试剂盒Chicken5-Nucleotidase,5- 96T/48T 马来酸二甲酯(>98%,BR) Dimethyl maleate 质量规格:>98%,BR
鸡B因子(BF)ELISA检测试剂盒ChickenfactorB,BF 96T/48T 丁二酸二甲酯(>99%,BR) Dimethyl succinate 质量规格:>99%,BR
鸡C反应蛋白(CRP)ELISA检测试剂盒ChickenC-ReactiveProtein,CRP 96T/48T 二甲基甲酮钠盐(>97%,BR) Dimethylglyoxime salt 质量规格:>97%,BR
鸡L苯氨酸解氨酶(PAL)ELISA检测试剂盒ChickenL-Phenylalanineammonla-lyase,PAL 96T/48T 直接蓝71(≥50%,BR) Direct blue 71 质量规格:≥50%,BR
鸡N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)ELISA检测试剂盒ChickenN-acetyl-β-D-glucosaminidase,NAG 96T/48T 天狼猩红 Direct red 80 质量规格:BS
大鼠骨粘连蛋白(ON)elisa进口试剂盒植物活性内质网分离试剂盒10 BOC-L-异亮氨酸 Boc-Ile-OH 质量规格:>98.5%,BR
Humanα2macroglobulin,α2MGELISAKit人α2巨球蛋白(α2-MG)ELISA试剂盒规格:96T/48T BOC-L-脯氨酸 Boc-Pro-OH 质量规格:>98.5%,BR
小鼠角蛋白9(K9)ELISA试剂盒 ,英文名: K9 ELISA Kit BOC-L-色氨酸 Boc-Trp-OH 质量规格:>98.5%,BR
人β萘酚(β-naphthol)ELISA检测试剂盒HumanBeta-naphtholELISAKit 96T/48T BOC-L-天冬氨酸 Boc-Asp-OH 质量规格:>98.5%,BR
大鼠血管紧张素Ⅱ(ANG-Ⅱ)试剂盒 Rat angiotension Ⅱ,ANG-Ⅱ ELISA Kit BOC-L-谷氨酸 Boc-L-Glutamic acid 质量规格:>98.5%,BR
英文名称RatacetylcholinereceptoraibodyELISAKit大鼠乙酰胆碱受体抗体(AChRab)规格:96T/48T BOC-L-亮氨酸 Boc-Leu-OH 质量规格:>98.5%,BR
谷氨酰胺脱羧酶 N-叔丁氧羰基-L-甲硫氨酸 BOC-L-Mine 质量规格:>98%,BR
ELISAKitACH人乙酰胆碱规格:48T/96T BOC-L-丝氨酸 N-(tert-Butoxycarbonyl)-L-serine 质量规格:>99%,BR
小鼠角蛋白18(K18)ELISA试剂盒 ,英文名: K18 ELISA Kit BOC-L-缬氨酸 Boc-Val-OH 质量规格:>99%,BR
人β葡糖苷酶(β-glucosidase)ELISA检测试剂盒Humanβ-glucosidaseELISAKit 96T/48T BOC-L-天冬酰胺 Boc-Asn-OH 质量规格:≥98.5%,BR
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