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人类T细胞杂交瘤细胞;AC5说明书

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产品参考价:¥1 举报
产品型号:
牌: ATCC
厂商性质: 经销商
地: 上海市
更新时间: 2018-04-17 15:27:09
浏览次数: 12
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产品简介

适用领域 科研 产地 进口
加工定制 品牌
人类T细胞杂交瘤细胞;AC5说明书细胞一般2-3天更换一次培养基,这取决于细胞生长的速度。许多细胞培养实验室通常在周一,周三,周五更换培养基。了解更多公司产品请!

详细介绍

人类T细胞杂交瘤细胞;AC5说明书现货直销,免费快递送货上门。公司供应各种细胞株,细胞系,种类齐全,现货,质量保证,公司所有产品仅供科研使用,不得用于医学诊断。使用前仔细阅读本说明书。

细胞名称​  人类T细胞杂交瘤细胞;AC5说明书

形态特性 淋巴母细胞样

生长特性 悬浮生长

特征特性 该细胞属保藏,其特征特性尚未公开。

培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS

传代方法 1:

3传代,3-4天传1次  

传代情况 C8

冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS 

支原体检测 阴性 

同工酶

染色体

使用权限 未定

人类T细胞杂交瘤细胞;AC5说明书冻保存方法一:冷冻管置于4℃300分钟→(-20℃30分钟*)→-80℃16~18小时(或隔夜)→液氮槽长期储存。
冷冻保存方法二:冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期储存。-20℃不可超过1小时,以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,也可跳过此步骤直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
迄今为止,公司收录背景资料清晰,细胞活力状态良好的细胞株1420株,其中绝大部分是近年来从美国ATCC和NIH分批引进的细胞种子,少部分来自全国各地细胞研究所,细胞来源可靠,背景资料清晰,代数年轻,活力好。冻保存方法一:冷冻管置于4℃300分钟→(-20℃30分钟*)→-80℃16~18小时(或隔夜)→液氮槽长期储存。
人类T细胞杂交瘤细胞;AC5说明书复苏操作要点:
1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。
2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内完全解冻,使细胞能尽快通过zui易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。
4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。
5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。
6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。

人类T细胞杂交瘤细胞;AC5说明书操作步骤:
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中,将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片,待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室温孵育爬片20min,使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶,室温孵育15min(一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢),PBS冲洗3次,每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min,PBS冲洗3次,每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育:按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗,滴加在爬片上,于4°C湿盒中孵育一夜,PBS冲洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:选与一抗对应的二抗,按比例稀释后滴加在爬片上,37°C湿盒中孵育30min,PBS冲洗3次,每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干,爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液,显微镜下观察,当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染:用Harris苏木素复染30s~1min,水洗后用1%的盐酸酒精分化,再用蒸馏水(或PBS)水洗返蓝。
10. 封片:将中性树胶滴在爬片一侧,再用盖玻片盖上,先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧,以免产生气泡,封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。

光甘草定CAS 59870-68-7规格:20mg订购|咨询

落新妇苷CAS 29838-67-3规格:20mg订购|咨询

高三尖杉酯碱CAS 26833-87-4规格:20mg订购|咨询

异鼠李素-3-O-半乳糖苷CAS 6743-92-6规格:10mg订购|咨询

3-O-啡酰奎宁酸(97%)CAS 327-97-9规格:10mg订购|咨询

茄醇CAS 13190-97-1规格:20mg订购|咨询

阿马碱CAS 483-04-5规格:20mg订购|咨询

苑子对照药材CAS 规格:1g订购|咨询

荷叶碱CAS 475-83-2规格:20mg订购|咨询

湖贝碱甲CAS 98243-57-3规格:20mg订购|咨询

大黄素CAS 518-82-1规格:20mg订购|咨询

乙酸龙脑酯CAS 20347-65-3规格:20mg订购|咨询

补骨脂乙素CAS 20784-50-3规格:20mg订购|咨询

葛根对照药材CAS 规格:1g订购|咨询

人类T细胞杂交瘤细胞;AC5说明书LCE1A  晚期包膜蛋白1抗体规格: 0.2ml

TLR5  Toll样受体5抗体规格: 0.1ml

OPGL/RANKL/ODF  骨保护蛋白配体抗体(破骨细胞分化因子)规格: 0.1ml

phospho-GSK3 Alpha/Beta(Tyr279+Tyr216)  磷酸化葡萄糖合成激酶3α/β抗体规格: 0.1ml

SIRT3  线粒体乙酰化酶3抗体规格: 0.2ml

Goat Anti-Mouse IgG/Cy3  Cy3标记的羊抗小鼠IgG规格: 0.1ml

Neprilysin 2  脑啡肽酶2抗体规格: 0.2ml

ZNRF2  锌指/环指蛋白2抗体规格: 0.2ml

PSAP  鞘脂激活蛋白原抗体规格: 0.1ml

TLR1  Toll样受体1抗体规格: 0.1ml

 

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