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备试剂与收集血样:
1. 收集标本:血清、血浆(EDTA 、柠檬酸盐、肝素抗凝)、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测, 2-8 ℃ 保存48 小时;更长时间须冷冻( -20 ℃或 -70 ℃ )保存,避免反复冻融。
2. 标准品液配制:使用前加入0.5ml 蒸馏水 混匀,配成 120 0ng/ml 的溶液 。 设标准 管 8 管,管加标本稀释液 900ul ,第二至第八管加入标本稀释液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的标准品溶液 100ul 混匀后用加样器吸出 500ul ,移至第二管 。如此反复作对倍稀释,从第七 管 中吸出 500ul 弃去。第八 管 为空白对照。
3. 10× 标本稀释液用蒸馏水作 1: 1 0 倍稀释( 示例: 1ml浓稀释液 +9ml 蒸馏水)。
4. 洗涤液:用重蒸水 1:20 稀释(示例:1ml 浓缩洗涤液加入 19ml 的重蒸水)
产品名称 | 人尿微量白蛋白(ALB)elisa进口试剂盒 |
英文名称 | Albumin urinary (ALB) ELISA Kit |
货号 | BJ-G10637 |
规格:96T/48T
特点:灵敏性高、特异性强、重复性好
用途:科研实验等领域科学研究,不得用于临床诊断
运输:快递(根据客户要求,选择具体的运输方式)
试剂盒种属:羊、鸡、鸭、鱼、人、大鼠、小鼠、豚鼠、仓鼠、裸鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛等动植物。
待检样本:体液、血清、血浆、细胞培养上清液、尿液、组织匀浆、心房水标本等等
检测程序:
1. 加样:每孔各加入标准品或待测样品 100ul ,将反应板充分混匀后置 37 ℃ 120 分钟。
2. 洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤 4-6 次,向滤纸上印干。
3. 每孔中加入抗体工作液10 0ul 。将反应板充分混匀后置 37 ℃ 6 0 分钟。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶标抗体工作液100ul 。将反应板置 37 ℃ 3 0 分钟。
样本实验前准备:
ELISA进口试剂盒液体样本:包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。
(1)血清
室温血液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(2)血浆:
应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(3)尿液:
用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。
(4)细胞培养上清:
检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。
(5)培养细胞
检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(6)组织标本
切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
实验步骤:
石蜡包埋组织切片 3~4μm 厚度
1.烤片: 将待做切片置于切片架上,于 60℃恒温烤箱中至少烤 1 hr;
2.脱蜡: 切片放入盛有二甲苯的容器中脱蜡 3 次(即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ),每次10 min;
3.水化: 切片经下行酒精水化,无水乙醇 5min,95%乙醇 2 次(每次 2min),85%乙醇 2 min;75%乙醇 2min,自来水冲洗,ddH2O 洗 2×2min;
4.抗原修复: 根据抗体说明书推荐方法进行抗原修复,常采用高压、微波(温度达到 98~100℃)或酶消化修复法,室温自然冷却,自来水冲洗,ddH2O 洗 2×2min,TBS 洗涤(2×2min)(具体修复方法见附 1)* 注:有些抗原勿需修复,直接进入第 5 步封闭。
5.封闭: 滴加试剂 B,37℃湿盒孵育 30 min;
6.加一抗:滴加用试剂 C(即用型一抗),37℃湿盒孵育 2 hr 或 4℃过夜;
7.洗涤: TBS-T 洗涤(3×5 min);
8.封闭: 滴加试剂 B,37℃湿盒孵育 10 min;
9.加二抗: 滴加用抗体稀释液稀释的生物素化二抗(试剂 D),37℃湿盒中孵育30 min;
10.洗涤: TBS-T 洗涤(3×5 min);
11.封闭: 滴加试剂 Tween 20,37℃湿盒孵育封闭 20 min;
12.加 HRP-SA: 滴加用试剂 C 稀释的试剂 E(1:50~200,终浓度 5~20 nM),37℃湿盒中孵育 30 min;
13.洗涤: TBS-T 洗涤(3×5 min),TBS 洗涤(2×5 min);
14.显色:应用 DAB 溶液(试剂 F)显色;
15.复染:自来水充分冲洗,复染,脱水,透明;
16.封片: 待组织标本干后,用试剂缓冲甘油封固剂封片;
17.观察成像: 显微镜下观察成像。
SF767细胞,人脑瘤细胞 阴沟肠杆菌 人主动脉内皮细胞总RNAHAEC NA甲硫咪唑硫代-β-D-葡萄糖苷酸质量规格:美国进口Methimazole Thio-β-D-glucuronide
RKO-E6(人结肠癌转基因细胞) 5×106cells/瓶×2美洛西林质量规格:美国进口Mezlocillin
GBC-SD(人胆囊癌细胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0312293ET(人胚肾细胞(SV40T和EBNA1基因修饰细胞))5×106cells/瓶×2 盘羊皮肤细胞;ASHS3二去甲基米非司酮质量规格:美国进口Didemethyl Mifepristone
小鼠肾集合管细胞(SV40转化);M-122-羟基米非司酮质量规格:美国进口22-Hydroxy Mifepristone
16. 细胞系统甲基4-羟基-2-甲基-2H-1,2-苯并噻嗪-3-羧酸盐 1,1-二氧化物质量规格:美国进口Methyl 4-Hydroxy-2-methyl-2H-1,2-benzothiazine-3-carboxylate 1,1-Dioxide
Promocell C-22062 Smooth Muscle Cell GrowthMedium 2,, 平滑肌细胞生长培养基2型(即用型) 500ml2,4-滴,英文名或英文缩写:2,4-D,级别:高,99%,规格:25克
人肺动脉内皮细胞RNAHPASMC miRNA5 μg贝那普利相关物质A Bqnczqpril Rqlctqd CoMpound c;(3R)-3-[[(1R)-1-(qthoxyccrbonyl)-3-phqnylpropyl]cMino]-2,3,4,5-tqtrcxy7no-2-oxo-1H-1-bqnzczqpinq-1-ccqtic ccid, Monoxy7nochloridq 12447-89-2
MTDH Others Human 人 MTDH / lyric / metadherin 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 水溶性壳聚糖,英文名或英文缩写:Chitosan,级别:高 ,98%,规格:25毫克
猪细胞;ST1-甲基-1H-咪唑,英文名或英文缩写:1-metxylimidazole,级别:BR,99%,规格:1公斤
U251细胞,胶质瘤细胞 鼠成纤维细胞系,NIH/3T3细胞 人肺巨细胞癌低转移细胞株;PG-LH7N-Acetyl-D-Glucosamine 10mg/100mg原装 INALCO1758-0070
CSF2 Others Human 人 GM-CSF / CSF2 人细胞裂解液 (阳性对照) IMIDAZOLE咪唑蛋白组学级50G288-32-4RT
SV40T转化人脐静脉内皮细胞;PUMC-HUVEC-T1 Bis(tributyltin) oxidq 26-32-9
大鼠中脑缝神经细胞(脑脊)(RNr)(1×106)2-Chlorotritylchlorideresin2-录三本甲基录树脂100克BR
CM-H040人结肠粘膜上皮细胞*培养基100mL3-溴轻臭盐,英文名或英文缩写:3-Bromopropylamine xy7nobromide,级别:色固,规格:5克
正常小鼠Leydig细胞;TM3 小鼠子宫颈上皮细胞*培养基 100mLPEG6000 200g Sigma分装
人尿微量白蛋白(ALB)elisa进口试剂盒Walker氏癌肉瘤256瘤株;W256石墨粉(>99%,BR)Graphite powder质量规格:>99%,BR
PG-BE1细胞,人肺巨细胞癌(PG)的高转移亚系 叙利亚仓鼠肾细胞,BHK-21细胞 CL-0034BHK-21(仓鼠肾细胞)5×106cells/瓶×2己二醇(>98%,BR)Hexylene glycol质量规格:>98%,BR
STO(小鼠胚成纤维细胞) 5×106cells/瓶×2六甲基1酰三胺(>98%,BR)HMPA, hexamethylphosphoramide质量规格:>98%,BR
HDLEC-c 人类皮肤管内皮细胞(HDLEC)来自少年者 500,000cells 骨细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)还原茚三酮二水合物(>98%,BR)Hydrindantin hydrate质量规格:>98%,BR
豚鼠皮肤细胞;GP-S3中粘度羟丙基纤维素Hydroxypropyl cellulose质量规格:4000~6500 mpa.s,BR
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