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货号 | FS-X9591 |
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操作步骤:
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液,用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
②加入少量Trypsin-EDTA solution,略盖过细胞即可,室温放置 0.5~2min, 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除细胞消化液。加入含血清的 *细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足,则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落, 直接用细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000~2000g 离心 1min,沉淀细胞,尽量去除细胞消化液后,加入含血清的*培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。
产品属性:
产品名称 | 英文名称 | 产品规格 | 产品货号 |
CFSE Cell Proliferation and Tracking Kit | 1000T | FS-X9591 |
产品介绍:
CFSE细胞增殖与示踪检测试剂盒是基于一种新型荧光探针CFDA SE的用于细胞增殖检测和细胞荧光示踪的检测试剂盒。CFDA SE目前被广泛用于替代MTT法或[3H]-thymidine掺入等其它细胞增殖检测方法。 基于CFDA SE荧光标记的细胞增殖检测和[3H]-thymidine掺入、BrdU标记获得的检测结果*一致,但同时可以提供更多的细胞增殖信息。使用CFDA SE检测可以提供整个细胞群中有多少比例的细胞分裂了1次、2次或更多次数,同时如果和其它荧光探针联用,可以获取不同分裂次数细胞的其它相关信息。 CFDA SE 的全称为Carboxyfluorescein diacetate, succinimidyl ester,分子式为C29H19NO11,分子量为557.47。CFDA SE可以通透细胞膜,进入细胞后可以被细胞内的酯酶(esterase)催化分解成CFSE,CFSE可以偶发性地(spontaneously)并不可逆地和细胞内蛋白的Lysine残基或其它氨基发生结合反应,并标记这些蛋白。在加入荧光探针CFDA SE后大约24小时,即可充分标记细胞。被CFDA SE标记的非分裂细胞的荧光非常稳定,稳定标记的时间可达数个月。CFSE标记细胞的荧光非常均一,比以前使用的其它细胞示踪荧光探针例如PKH26的荧光更加均一,并且分裂后的子代细胞的荧光分配也更均匀。 由于CFDA SE标记细胞的荧光非常均匀和稳定,每分裂一次子代细胞的荧光会减弱一半,这样通过流式细胞仪检测就可以检测出没有分裂的细胞,分裂一次的细胞(1/2的荧光强度),分离两次的细胞(1/4的荧光强度),分裂三次的细胞(1/8的荧光强度)以及类似的其它分裂次数的细胞。 CFDA SE标记细胞后通常用流式细胞仪进行细胞增殖检测。常用于淋巴细胞的增殖检测,也可以用于成纤维细胞、NK细胞等其它细胞的增殖检测,甚至还可以用于细菌增殖的检测。 |
注意事项:
1、本试剂盒仅供科学研究使用,不可用于诊断或治疗。
2、螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖和管内壁上的液体离心至管底,避免开盖时试剂损失。
3、禁止与其他品牌的试剂混用,否则会影响使用效果。
4、样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。
5、最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿,可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并*清除残留清洁剂。
6、避免皮肤或粘膜与试剂接触。
7、需长时间保存可-20℃避光保存。避免反复冻融,否则将会增加空白吸收,从而影响检测结果。最好小剂量分装,用避光袋或是黑纸、锡箔纸包住避光。
8、用培养基或 PBS 来配制待检测药物。如果待测药物有还原性,则测定不含细胞,仅含有 MTS 的待测药物溶液在 490 nm处的空白吸光度。如果该吸光度很小,则可以直接加入 MTS ,如果吸光度相对较大,则需要除去培养基,并用新鲜培养基洗涤细胞两次,然后加入新的 100 μl 培养基和 10 μl MTS 进行检测。
9、细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。
10、加 MTS 溶液后孵育时间的长短根据细胞的类型和细胞的密度等实验情况而定,对于大多数情况孵育 1 小时即可,白细胞需要培养较长时间。
11、如果不是使用 96 孔板检测,MTS 溶液的用量相应等比例增加即可。
血管内皮生长因子165(VEGF165)检测试剂盒 forVascularEndothelialGrowthFactor165(VEGF165)
突触融合蛋白17(STX17)检测试剂盒 forSyntaxin17(STX17)
蛋白激meiBγ(PKBγ)检测试剂盒 forProteinKinaseBGamma(PKBg)
肾损伤分子1(Kim1)检测试剂盒 forKidneyInjuryMolecule1(Kim1)
基质金属蛋白mei13(MMP13)检测试剂盒 forMatrixMetalloproteinase13(MMP13)
肌糖δ(SGCδ)检测试剂盒 forSarcoglycanDelta(SGCd)
亮氨suan丰富α2-糖蛋白1(LRG1)检测试剂盒 forLeucineRichAlpha-2-Glycoprotein1(LRG1)
叉头框蛋白O1(FOXO1)检测试剂盒 forForkheadBoxProteinO1(FOXO1)
TATA框结合蛋白关联因子2(TAF2)检测试剂盒 forTATABoxBindingProteinAssociatedFactor2(TAF2)
转化生长因子α(TGFα)检测试剂盒 forTransformingGrowthFactorAlpha(TGFa)
肝配蛋白A4(EFNA4)检测试剂盒 forEphrinA4(EFNA4)
转化生长因子β2(TGFβ2)检测试剂盒 forTransformingGrowthFactorBeta2(TGFb2)
胰岛su样生长因子结合蛋白4(IGFBP4)检测试剂盒 forInsulinLikeGrowthFactorBindingProtein4(IGFBP4)
羧肽meiA3(CPA3)检测试剂盒 forCarboxypeptidaseA3,MastCell(CPA3)
硒磷suan合成mei1(SEPHS1)检测试剂盒 forSelenophosphateSynthetase1(SEPHS1)
C反应蛋白(CRP)检测试剂盒 forCReactiveProtein(CRP)
溶质载体家族30成员7(SLC30A7)检测试剂盒 forSoluteCarrierFamily30Member7(SLC30A7)
CFDA,SE细胞增殖与示踪检测试剂盒噻康zuo相关物质A标准品 规格:25mg 英文名称:Tioconazole Related Compound A
乙酰半胱氨suan标准品 规格:200mg 英文名称:Acetylcysteine
jia芬那suanjia芬那suan标准品 规格:200mg 英文名称:Mefenamic Acid
来fumi特相关物质C标准品 规格:10mg 英文名称:
糖精钠标准品 规格:100mg 英文名称:Saccharin Sodium
土霉su标准品 规格:200mg 英文名称:Oxytetracycline
沙利铂相关物质A标准品 规格:100mg 英文名称:
盐suan阿的平标准品 规格:200mg 英文名称:Quinacrine Hydrochloride
槲皮su标准品 规格:500mg 英文名称:Quercetin
盐suan普鲁卡因an标准品 规格:200mg 英文名称:Procainamide Hydrochloride
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