ESF人红细胞刺激因子ELISA试剂盒实验原理 返回列表页

ELISA方法被广泛应用于各种抗原和抗体测定。 但ELISA测定中影响因素较多，而且其操作中有一定的技术要求，在检测过程中除正常反应外，有时常见到一些错误的结果。
引起ELISA测定错误结果的原因主要有：
①标本因素；
②试剂因素；
③操作因素。在实验过程中请严格按照使用说明操作，必能得出准确的实验结果，可提供免费技术咨询服务！

公司“质量是企业是生命之源”，选购优势如下：
1*抗体——、灵敏、特异
2操作——吸附均匀、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的优化方案——回收利用率高、可靠性强
4适用于体液、组织匀浆，细胞培养上清液、尿液等各种类型的样本。
5可检测指标齐全：生长因子、炎症因子、脂肪因子、基质金属蛋白酶等等
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样本实验前准备：
ELISA试剂盒液体样本：包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。
（1）血清
室温血液自然凝固10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
（2）血浆：
应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
（3）尿液：
用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。
（4）细胞培养上清：
检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。
（5）培养细胞
检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
（6）组织标本
切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。
Aspergillus│usamii var. 宇佐美曲霉变种Aspergillus│usamii var.冻干物安全等级:1模式菌株:noCM0015生长条件:28-30℃存储条件:真空冷冻干燥法 纯度：98%

Lactobacillus│buchneri 布氏乳杆菌Lactobacillus│buchneri分离基物:青贮饲料冻干物安全等级:1模式菌株:no制作青贮饲料。CM0006生长条件:37℃存储条件:真空冷冻干燥法 纯度：98%

Lactobacillus│sp. 乳杆菌属Lactobacillus│sp.分离基物:马奶冻干物安全等级:1模式菌株:noCM0006生长条件:37℃存储条件:真空冷冻干燥法 纯度：98%

Streptococcus│sp. 链球菌属Streptococcus│sp.分离基物:稀奶油冻干物安全等级:1模式菌株:noCM0005生长条件:37℃存储条件:真空冷冻干燥法 纯度：98%

Lactococcus│garvieae 格氏乳球菌Lactococcus│garvieae分离基物:成熟奶冻干物安全等级:1模式菌株:no发酵奶CM0005生长条件:37℃存储条件:真空冷冻干燥法 纯度：97%

Lactococcus│lactis subsp. cremoris 乳乳球菌乳脂亚种Lactococcus│lactis subsp. cremoris分离基物:开菲尔粒冻干物安全等级:1模式菌株:no开菲尔发酵剂CM0005生长条件:37℃存储条件:真空冷冻干燥法 纯度：97%

Candida│guilliermondii 季也蒙假丝酵母Candida│guilliermondii冻干物安全等级:1模式菌株:no用于白酒酿造研究。CM0077生长条件:28℃存储条件:真空冷冻干燥法 纯度：97%

Hansenula│anomala var. anomala 异常汉逊酵母异常变种Hansenula│anomala var. anomala冻干物安全等级:1模式菌株:no用于清香型白酒的酿造研究。CM0077生长条件:28℃存储条件:真空冷冻干燥法 纯度：≥99.99% metals basis
ESF人红细胞刺激因子ELISA试剂盒实验原理酵母葡萄糖霉素琼脂（YDC）人心脏成纤维肺微血管内皮Annexin Ⅲ peptide  膜粘连蛋白A3抗体

CVT琼脂培养基人心脏成纤维-心室肺血管平滑肌TIMP-2(Tissue Inhibitor of Metalloproteinase-2)  金属蛋白酶组织抑制因子-2(抗原)

麦康凯肌阿东羧苄青霉素琼脂基础（MIAC）人心脏成纤维-心房II型肺泡上皮TIMP-3(Tissue Inhibitor of Metalloproteinase-3)  金属蛋白酶组织抑制因子(抗原)

肠球菌琼脂（胆汁七叶苷叠氮钠琼脂）人角膜上皮气管上皮Proinsulin  胰岛素原

肠球菌肉汤人角膜气道平滑肌ADM R, Adrenomedullin receptor  肾上腺髓质素受体（抗原）

溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培养基人视网膜内皮肺成纤维PAI-1  纤溶酶原激活物抑制因子

胆汁七叶苷琼脂(BEA)人视网膜色素上皮支气管上皮CK7  角蛋白7

滤膜肠球菌琼脂人晶状体上皮支气管成纤维VTG(vilogenin)  青鳉鱼卵黄蛋白
操作流程：
（1）待测样品孔中每孔加入待测样品100μl，每种样品设3个平行孔；设两个阴性对照孔，每孔加未处理组的细胞裂解液100μl；另设一个空白对照孔，加入纯细胞裂解液100μl。 
（2）酶标板置4℃，包被过夜。
（3）洗板：吸干孔内反应液，用洗涤液过洗一遍（将洗涤液注满板孔后，即甩去），之后将洗涤液注满板孔，浸泡1-2分钟，间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
（4）阴性对照孔每孔加入PBS 50μl，样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。 
（5）酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。 
（6）洗板，同（4）。 
（7）每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。 
（8）酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。 
（9）洗板，同（4）。 
（10）每孔加TMB显色液 100μl，轻轻混匀10s，置37℃暗处反应15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。 
（12）分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，最终测得的OD值为两者之差（W1-W2），以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
（13）数据处理：在得出标本（S）和阴性对照（N）的 OD值后，计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准