BCGF人B细胞生长因子ELISA试剂盒实验原理 返回列表页

公司“质量是企业是生命之源”，选购优势如下：
1*抗体——、灵敏、特异
2操作——吸附均匀、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的优化方案——回收利用率高、可靠性强
4适用于体液、组织匀浆，细胞培养上清液、尿液等各种类型的样本。
5可检测指标齐全：生长因子、炎症因子、脂肪因子、基质金属蛋白酶等等

ELISA方法被广泛应用于各种抗原和抗体测定。 但ELISA测定中影响因素较多，而且其操作中有一定的技术要求，在检测过程中除正常反应外，有时常见到一些错误的结果。
引起ELISA测定错误结果的原因主要有：
①标本因素；
②试剂因素；
③操作因素。在实验过程中请严格按照使用说明操作，必能得出准确的实验结果，可提供免费技术咨询服务！

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样本实验前准备：
ELISA试剂盒液体样本：包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。
（1）血清
室温血液自然凝固10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
（2）血浆：
应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
（3）尿液：
用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。
（4）细胞培养上清：
检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。
（5）培养细胞
检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
（6）组织标本
切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。
操作流程：
（1）待测样品孔中每孔加入待测样品100μl，每种样品设3个平行孔；设两个阴性对照孔，每孔加未处理组的细胞裂解液100μl；另设一个空白对照孔，加入纯细胞裂解液100μl。 
（2）酶标板置4℃，包被过夜。
（3）洗板：吸干孔内反应液，用洗涤液过洗一遍（将洗涤液注满板孔后，即甩去），之后将洗涤液注满板孔，浸泡1-2分钟，间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
（4）阴性对照孔每孔加入PBS 50μl，样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。 
（5）酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。 
（6）洗板，同（4）。 
（7）每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。 
（8）酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。 
（9）洗板，同（4）。 
（10）每孔加TMB显色液 100μl，轻轻混匀10s，置37℃暗处反应15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。 
（12）分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，最终测得的OD值为两者之差（W1-W2），以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
（13）数据处理：在得出标本（S）和阴性对照（N）的 OD值后，计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准
Candida albicansCMCC 98001 白色念珠菌Candida albicansCMCC 98001模式菌株:未知0.5~1.0×10³cfu/颗 1颗/支 纯度：96%

Acetobacr│sp. 醋杆菌属Acetobacr│sp.斜面培养物安全等级:1模式菌株:no产醋。CM0001生长条件:28℃存储条件:真空冷冻干燥法；定期移植法 纯度：98%

Morchella sp. 羊肚菌属（斜面）Morchella sp.斜面培养物/冻干物安全等级:1模式菌株:no研究；。食用。综合PDA：马铃薯煮汁1000mL，磷二氢钾 3g，镁 1.5g，葡萄糖 20g，维生素B1 10mg，琼脂 20g，pH自然。马铃薯煮液：200g马铃薯，去皮，切块，放入蒸馏中煮沸30min，取滤液定容至1000mL,备用。121℃，15min。传代方法①冻干管：75%酒精擦拭管壁，后用砂轮在冻干管壁划两圈，掰断，用200μL无菌或培养基:充分溶解，平板涂布，活化培养。 ②斜面：试管口用75%酒精擦拭后，火焰灼烧，后用无菌接种铲切块，挑取接入平板或斜面，培养。生长条件:25℃，好氧。生长特性8天长满斜面，菌丝灰白色、稀疏。存储条件:2-8℃冷藏 纯度：98%

Clostridium│swellfunianum sp. nov. 井坊梭菌Clostridium│swellfunianum sp. nov.分离基物:窖泥冻干物安全等级:1产、乙醇、己、氢气、二氧化碳；降解乳。CM0999生长条件:37℃存储条件:其他 纯度：Standard for GC,≥99.5%(GC)

Streptococcus pyogenes 酿脓链球菌Streptococcus pyogenes分离基物:患有流行性咽炎的儿童咽部冻干安全等级:1模式菌株:no质控菌株。1、哥伦比亚血平板（成品） 2、脑心浸提液琼脂（BHI）：心提取物 5.0g，脑提取物 12.5g，月示胨10.0g，葡萄糖 2.0g，NaCl 5.0g，Na2HPO4 2.5g，琼脂15.0g，蒸馏1.0L，pH7.4。生长条件:37℃，5%CO2 纯度：98%

Lactobacillus leichmannii 莱氏曼氏乳杆菌Lactobacillus leichmannii冻干安全等级:1模式菌株:no用于维生素B12钴胺素，钴胺素测定法，食品检测，制药和个人护理MRS培养基:：酪胨 10.0g，牛肉 8.0g，酵母 4.0 g，葡萄糖 20.0 g，镁 0.2 g，钠 5.0 g，柠檬三铵 2.0 g，磷氢二钾 2.0 g，锰 0.05 g，吐温80 1.0 g，蒸馏 1000mL。pH6.2±0.2。121℃，15min。生长条件:37℃，微好氧或厌氧 纯度：98%

Streptomyces avidinii 亲和素链霉菌Streptomyces avidinii分离基物:土壤冻干安全等级:1模式菌株:；产生抗生素MSD-235ISP-2培养基:：酵母提取物 4.0 g,麦芽提取物 10.0 g,葡萄糖 4.0 g,琼脂 15.0 g,蒸馏 1.0 L,pH7.3。121℃，15分钟灭菌。生长条件:28℃，好氧 纯度：≥99%

Mortierella sp. 被孢霉属（斜面）Mortierella sp.斜面培养物安全等级:1模式菌株:no:食用。综合PDA琼脂：马铃薯提取液 1.0L，葡萄糖 20.0g，KH2PO4 3.0g，MgSO4.7H2O 1.5g，维生素B1 微量，琼脂 15.0g，pH6.0。[注] 马铃薯提取液：取去皮马铃薯200g，切成块，加1.0L煮沸30min，滤去马铃薯块，将滤液补足至1.0L。传代方法①冻干管：75%酒精擦拭管壁，后用砂轮在冻干管壁划两圈，掰断，用200μL无菌或培养基:充分溶解，平板涂布，活化培养。 ②斜面：试管口用75%酒精擦拭后，火焰灼烧，后用无菌接种铲切块，挑取接入平板或斜面，培养。生长条件:25℃，好氧生长特性8天长满斜面，菌丝洁白、浓密、整齐。存储条件:2-8℃冷藏，冻干管10年以上，斜面1-3个月。 纯度：≥99%
BCGF人B细胞生长因子ELISA试剂盒实验原理Schaedler琼脂人卵巢表层上皮肠血管内皮Aromatase  芳香化酶（抗原）

M17肉汤人卵巢成纤维肠隐窝上皮SP-C peptide  肺表面活性蛋白C抗原

M17琼脂人羊膜间充质基质胃粘膜上皮Mast Cell Chymase  肥大类糜蛋白酶1

改良番茄汁琼脂培养基基础人绒毛膜间充质基质肝窦内皮Ceruloplasmin peptide  铜蓝蛋白抗原

改良麦康凯肉汤基础（CT-MAC）人骨髓间充质干肾实质CKLF1  趋化素样蛋白

改良MC培养基人脂肪间充质干肾系膜ART(Artemin)(抗原)  

TTC营养琼脂人肝脏间充质干膀胱上皮AATK peptide  凋亡关联酪氨激酶抗原

LB肉汤人脐带间充质干膀胱平滑肌AQP-2 (aquaporin Protein-2)  水通道蛋白-2（抗原）