13524666654
当前位置：上海抚生实业有限公司>>细胞生物学试剂>>细胞组织染色>> 甲基绿染色液
| 货号 | FS-X9767 |
|---|
培养操作步骤：
1．公司仅用于科研用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布；
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）；
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时；
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片*浸在培养液中；
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
中文名称：甲基绿染色液
英文名称：Methyl Green Staining Solution
产品规格：100ml
货号：FS-X9767
产品介绍:
本染色液是一种组织或细胞染色时常用的可以把细胞核染成绿色的染色液。甲基绿可以和细胞核中的DNA结合，从而产生细胞核染色。本染色液可以和免疫荧光染色或免疫组化染色配合使用。一方面可以在本甲基绿染色液染色后进行免疫荧光染色或其它染料的染色，另一方面也可以在免疫组化染色后再进行甲基绿复染。一个包装的本染色液至少可以染色200个样品。 注意事项： 1. 需自备4%多聚、70%乙醇和95%乙醇。如果需要脱水、透明和封片处理，还需自备二甲苯，中性树胶或其它封片剂。如果样品是石蜡切片，需自备90%乙醇，无水乙醇以及二甲苯。 2. 第一次使用本试剂盒时建议先取1-2个样品做预实验。 储存条件：室温，有效期一年。 |
实验报告：
一、分离与培养： 1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，最后将组织剪成1mm3左右大小； 2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置； 3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织*被消化； 4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养； 5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养； | 二、免疫荧光鉴定： 1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min； 2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min； 4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜； 5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h； 6、用PBS冲洗3次，每次10min，最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。 |
天冬酰胺內肽(LGMN)英文名：LGMN 软骨衍生形态发生蛋白1抗体包装5g
天冬酰胺合成(ASNS)英文名：ASNS β-酪蛋白抗体包装100g
天冬转2(AST2)英文名：AST2 21号染色体开放阅读框63抗体包装25g
天冬转(AST)英文名：AST 4号染色体开放阅读框52抗体包装1g
套膜蛋白(iNV)英文名：iNV 4号染色体开放阅读框40抗体包装5g
糖原磷化M(PYGM)英文名：PYGM Cullin3抗体包装1g
糖原磷化L(PYGL)英文名：PYGL 分裂周期同源蛋白40抗体包装5g
糖原磷化B(PYGB)英文名：PYGB 卷曲螺旋结构域蛋白106抗体包装100g
糖原合激3α(GSK3α)英文名：GSK3α 染色质修饰蛋白1A抗体包装25g
糖皮质激受体β(GRβ)英文名：GRβ 叶绿体伴侣蛋白抗体（苹果）包装100g
糖皮质激受体α(GRα)英文名：GRα 分裂周期蛋白20B抗体包装25g
糖抗原125(CA125)英文名：CA125 周期调控蛋白D1抗体包装100ml
碳酐Ⅸ(CA9)英文名：CA9 周期蛋白B1结合蛋白1抗体包装25ml
碳酐Ⅱ(CA2)英文名：CA2 周期调控因子14A抗体包装500ml
碳酐Ⅰ(CA1)英文名：CA1 第七号染色体开放阅读框12抗体包装1g
胶红酵母Rhodotorula│mucilaginosa 质量规格：效价测定组蛋白H2b试剂盒泽泻A-24-醋酯;Alisol A
白鳞蘑菇Agaricus│bernardii Quél. 质量规格：>750ug /mg,USP,培养级组试剂盒棕榈酯;Methyl hexadec
深海海旋菌Thalassospira│profundimaris 质量规格：含量测定足标记蛋白/足盂蛋白试剂盒左旋千金藤啶碱;L-Stepholidi
甲基绿染色液肿囊腐霉 4-氟-2-色P4501A2
立枯丝核 4,5-二氨基-1-(2-)吡唑硫盐色P4502E1
大肠埃希 氟化锌四水合物色P450c21A;21-羟化
无色壳囊孢 基阿维盐外基质金属蛋白诱导因子
角磷灰鹅膏 4-乙酰基丁基乙酯外基质磷糖蛋白
匍匐曲霉 乙酰酮钇水合物外信号调节激
隆纹黑蛋巢 5-氧代-己甲酯外信号调节激
枯草芽孢杆 四苯基四苯基磷纤维连接蛋白
长枝木霉 3-溴异烟因子信号转导抑制因子1
腹膜苍黄球 3-溴-4-基吡啶因子信号转导抑制因子3
球孢白僵 结晶紫内酯周期D1
多杀性巴氏杆* 3,5-二异烟周期E1
鲍氏不动杆 比马前列周期抑制蛋白p27;Kip1
酿酒酵母 2-溴-5-基吡啶细丝蛋白A
类干酪乳杆 丁环己酯下游转录因子Gli1蛋白
操作规程
1、在96孔板加入细胞100μL/孔，通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞，细胞毒性实验每孔加入100微升5000～10000个细胞（具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小，细胞增殖速度的快慢等决定）。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.
2、.加入适当浓度的0～10μL 受试化合物。
3、将96孔板在37℃，含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。
4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小时，使MTT 还原为甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板摇床摇匀。
7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度（如无570nm 滤光片，可以使用560-600nm 的滤光片）。
8、结果分析
a、细胞的存活率：将各测试孔的OD 值减去本底OD 值（*培养基加MTT，无细胞）或空白药物孔OD 值（*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT，无细胞），各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示，T 为加药细胞的OD 值，C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =（加药细胞OD/对照细胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)
请输入账号
请输入密码
请输验证码
以上信息由企业自行提供，信息内容的真实性、准确性和合法性由相关企业负责，仪表网对此不承担任何保证责任。
温馨提示：为规避购买风险，建议您在购买产品前务必确认供应商资质及产品质量。
仪表网