当前位置:上海抚生实业有限公司>>ATCC细胞>>小鼠源细胞>> 杂交瘤细胞;F3*
产地 | 进口 | 加工定制 | 否 |
---|---|---|---|
适用领域 | 科研 |
细胞名称 杂交瘤细胞;F3*
形态特性 淋巴母细胞样
生长特性 半贴壁生长
特征特性 该细胞属保藏,其特征特性尚未公开。
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
传代方法 1:3传代,3-4天传1次
传代情况 C5
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR
同工酶
染色体
使用权限 未定
杂交瘤细胞;F3*操作流程:
1.1 主要试剂与仪器:倒置相差显微镜(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存:
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液(37℃预热,8~10倍体积)离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内,在37℃、5%co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek-293细胞48h换液1次,细胞长至60%~70%融合时,用0.25%胰酶消化1~2min,将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散,为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次,获得细胞悬液,然后加入倍量的培养基,温和混匀,吸管分装混合液,传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞,待细胞变圆、脱壁并浮起,加入少量培养基离心,再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液,用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数,按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液=(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞,以0.25%胰酶消化成单细胞悬液,计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中,每两小时随机取出3瓶细胞,吸除培养基及未贴壁细胞,加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞,取其平均值,按照公式:贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100%,计算贴壁率。
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液,以1×104/孔接种于24孔板,每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔,计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d,绘制细胞生长曲线
杂交瘤细胞;F3*注意事项:
1. 接收到细胞,肉眼观察细胞培养基颜色,显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收到时的培养瓶拍一张照片,显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张)。
2.用75%的酒精消毒(建议配置75%的酒精的水是灭菌过的)。
3.严格无菌操作,打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管*吸出(严禁直接倾倒),放入另一无菌容器中(建议换新的培养基培养细胞)。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆,轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落,加入终止液终止。
6.1000rpm,5min离心,重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶,37℃,5%CO2培养。
杂交瘤细胞;F3*美国菌种保藏中心, 又称美国模式菌种收集中心(ATCC),是位于马里兰洲洛克菲勒的一家私营的,非赢利性组织。目前它可以提供各种动植物细胞、标准品、菌株达两万多种。ATCC成立于1925年,是世界上大的生物资源中心,由美国14家生化、医学类行业协会组成的理事会负责管理,是一家性、非盈利生物标准品资源中心。ATCC向发布其获取、鉴定、保存及开发的生物标准品,推动科学研究的验证、应用及进步 ATCC可以提供以下类别生物标准品:细胞株(3000多种);菌株(15000多种);动植物病毒株(2500多种)以及重组物质等。
小鼠胱天蛋白酶9(P9)ELISA试剂盒 ,英文名: P9 ELISA Kit
人磷酯酶Cγ链(PLCγ1)ELISA检测试剂盒HumanPhospholipaseCγ1,PLCγ1ELISAKit 96T/48T
大鼠糖蛋白130(gp130)免疫试剂盒 Rat glucoprotein 130,gp130 ELISA KIT
英文名称RatAquaporin0ELISAKit大鼠水通道蛋白0(AQP0)规格:96T/48T
化妆品乙酰舒泛(acesulfameK)含量高效液相色谱法定量检测试剂盒20次
ELISAKitVIP人血管活性肠肽规格:48T/96T
人碳酸酐酶(CA)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
猪S100B蛋白(S-100B)免疫试剂盒 Pig Soluble protein-100B,S-100B ELISA Kit
病毒H7亚型(AIV-H7)核酸检测试剂盒(-PCR法) 48T
HumanParathyroidHormoneRelatedProtein,PTHrPELISA试剂盒人甲状旁腺激素相关蛋白(PTHrP)ELISA试剂盒规格:96T/48T
ELISAKitpERK猪磷酸化细胞外信号调节激酶规格:48T/96T
HumanechinococcusaibodyIgGELISAKit人包虫抗体IgGELISA试剂盒规格:96T/48T
人脂肪分化相关蛋白(ADRP)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Human neuophil elastase (NE) ELISA Kit 人中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)ELISA试剂盒
HumanADisiegrinAndMetalloprotease8,ADAM8ELISAKit 人解整合素样金属蛋白酶8(ADAM8)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
Humanhypoxia-induciblefactor1α,HIF-1αELISA试剂盒人低氧诱导因子1α(HIF-1α)ELISA试剂盒规格:96T/48T
组织基质金属蛋白酶125I同位素标记检测试剂盒20次
HumanLinkerforactivationofTcell,LAISAKit人T细胞活化连接蛋白(LAT)ELISA试剂盒规格:96T/48T
Eca-109(人食管癌细胞) 5×106cells/瓶×2
CM-H106人内脏脂肪细胞*培养基100mL
CD80 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD80 / B7-1 人细胞裂解液 (阳性对照)
MGC803-GFP细胞,绿色荧光蛋白标记人胃癌细胞 人成骨肉瘤细胞,Saos-2细胞 293来源病毒包装细胞;ΦA-GP
人骨肉瘤细胞;U-2 OS [U2OS;U2-OS;U-2OS]
C2 Others Human 人 C2 / Compleme Compone 2 人细胞裂解液 (阳性对照)
人成纤维细胞HMF
REG3B Others Mouse 小鼠 REG3B / Pap1 人细胞裂解液 (阳性对照)
非洲绿猴肾细胞系/HCV-NS4B;Vero-HCV-NS4B
NCI-H520细胞,人肺鳞癌细胞 小鼠间质细胞瘤细胞,MLTC-1细胞 CM-R023大鼠淋巴管内皮细胞*培养基100mL
QGY-7701(人肝癌细胞) 5×106cells/瓶×2
Promocell C-28040 Pericyte Growth Medium, 周细胞生长培养基 500ml
杂交瘤细胞;F3*Eca-109(人食管癌细胞) 5×106cells/瓶×2
CM-H106人内脏脂肪细胞*培养基100mL
CD80 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD80 / B7-1 人细胞裂解液 (阳性对照)
MGC803-GFP细胞,绿色荧光蛋白标记人胃癌细胞 人成骨肉瘤细胞,Saos-2细胞 293来源病毒包装细胞;ΦA-GP
人骨肉瘤细胞;U-2 OS [U2OS;U2-OS;U-2OS]
C2 Others Human 人 C2 / Compleme Compone 2 人细胞裂解液 (阳性对照)
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