当前位置:上海抚生实业有限公司>>ELISA试剂盒实验原理>>人ELISA试剂盒实验原理>> 48T/96TMN人变肾上腺素ELISA试剂盒实验原理
公司“质量是企业是生命之源”,选购优势如下:
1*抗体——、灵敏、特异
2操作——吸附均匀、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的优化方案——回收利用率高、可靠性强
4适用于体液、组织匀浆,细胞培养上清液、尿液等各种类型的样本。
5可检测指标齐全:生长因子、炎症因子、脂肪因子、基质金属蛋白酶等等
产品名称 | MN人变肾上腺素ELISA试剂盒实验原理 |
英文名称 | Human metanephrine, MN Elisa Kit |
货号 | FS-H63588 |
ELISA方法被广泛应用于各种抗原和抗体测定。 但ELISA测定中影响因素较多,而且其操作中有一定的技术要求,在检测过程中除正常反应外,有时常见到一些错误的结果。
引起ELISA测定错误结果的原因主要有:
①标本因素;
②试剂因素;
③操作因素。在实验过程中请严格按照使用说明操作,必能得出准确的实验结果,可提供免费技术咨询服务!
样本实验前准备:
ELISA试剂盒液体样本:包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。
(1)血清
室温血液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(2)血浆:
应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(3)尿液:
用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。
(4)细胞培养上清:
检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。
(5)培养细胞
检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(6)组织标本
切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
操作流程:
(1)待测样品孔中每孔加入待测样品100μl,每种样品设3个平行孔;设两个阴性对照孔,每孔加未处理组的细胞裂解液100μl;另设一个空白对照孔,加入纯细胞裂解液100μl。
(2)酶标板置4℃,包被过夜。
(3)洗板:吸干孔内反应液,用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去),之后将洗涤液注满板孔,浸泡1-2分钟,间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
(4)阴性对照孔每孔加入PBS 50μl,样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。
(5)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。
(8)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB显色液 100μl,轻轻混匀10s,置37℃暗处反应15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。
(12)分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最终测得的OD值为两者之差(W1-W2),以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
(13)数据处理:在得出标本(S)和阴性对照(N)的 OD值后,计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准
Bacillus│weihensphanensis 魏登施泰芽孢杆菌Bacillus│weihensphanensis分离基物:土壤样品斜面培养物安全等级:1模式菌株:no33生长条件:20℃存储条件:-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法;矿物油法 纯度:>98.0%(GC)
Bacillus│endophyticus 内生芽孢杆菌Bacillus│endophyticus分离基物:土壤样品斜面培养物安全等级:1模式菌株:no33生长条件:20℃存储条件:-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法;矿物油法 纯度:>98.0%(GC)
Escherichia│hermannii 赫氏埃希菌Escherichia│hermannii分离基物:矿石斜面培养物安全等级:1模式菌株:no以磷三钙、磷矿石作为磷源生长2生长条件:30℃存储条件:-80℃冰箱冻结法;定期移植法 纯度:98%
Achromobacr│piechaudii 种皮氏无色杆菌Achromobacr│piechaudii分离基物:石油污染土斜面培养物安全等级:1模式菌株:no以菲、蒽、芴作为碳源生长2生长条件:30℃存储条件:-80℃冰箱冻结法;定期移植法 纯度:98%
Citrobacr│sp. 柠檬杆菌Citrobacr│sp.分离基物:矿石斜面培养物安全等级:1模式菌株:no以磷三钙、磷矿石作为磷源生长2生长条件:30℃存储条件:-80℃冰箱冻结法;定期移植法 纯度:98%
Aerococcus│sp. 气球菌Aerococcus│sp.分离基物:土壤斜面培养物安全等级:1模式菌株:no33生长条件:30℃存储条件:-80℃冰箱冻结法;定期移植法 纯度:98%
Frauria│sp. 弗拉特氏菌Frauria│sp.分离基物:土壤斜面培养物安全等级:1模式菌株:no能够耐受2mM的重金属Ni2+33生长条件:30℃存储条件:-80℃冰箱冻结法;定期移植法 纯度:98%
Staphylococcus│equorum 马葡萄球菌(马胃葡萄球菌)Staphylococcus│equorum分离基物:样斜面培养物安全等级:1模式菌株:no在无机盐培养基:中以5mg/l的土霉素为碳源培养,3天内土霉素降解率大于40%33生长条件:30℃存储条件:-80℃冰箱冻结法;定期移植法 纯度:98%
MN人变肾上腺素ELISA试剂盒实验原理Phospho-HSP27 (Ser15) 磷化热休克蛋白27抗体紫檀香2--5-(基)苯甲基胺Human ELA3B (Elastase 3B) ELISA Kit
HSP60 热休克蛋白-60抗体绞股蓝2--5-(基)苯甲基胺Human MUSK (Muscle Skeletal Receptor Tyrosine Kinase) ELISA Kit
HSP47 热休克蛋白-47抗体凤尾草2--4-苯酚Human GSTα5 (Glutathione S Transferase Alpha 5) ELISA Kit
HSP70 热休克蛋白-70抗体铁筷子2--4-苯酚Human OPN (Osteopontin) ELISA Kit
HSP75/TRAP1 热休克蛋白-75抗体吉祥草2--4-苯酚Human MPIF-1/CCL23 (Myeloid Progenitor Inhibitory Factor 1) ELISA Kit
HSP90 Alpha 热休克蛋白90α抗体地瓜藤2,4-二苯硫酚Human SOX9 (Sex Determining Region Y Box Protein 9) ELISA Kit
HSP90 Alpha 热休克蛋白90α抗体白英2,4-二苯硫酚Human GREM1 (Gremlin 1) ELISA Kit
Phospho-HSP90 alpha (Thr5/7) 磷化热休克蛋白90α抗体苦菜子2-(全辛基)乙基烯酯Human ON (Osteonectin) ELISA Kit
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