杂交瘤细胞株；3M4* 返回列表页

细胞名称 杂交瘤细胞株；3M4*

形态特性  淋巴母细胞样 　
生长特性  　悬浮生长
特征特性   该细胞属保藏，其特征特性尚未公开。
培养条件  MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS　
传代方法   1:3传代，3-4天传1次
传代情况  C5
冻存条件  基础培养基+5%DMSO+20%FBS　
支原体检测  　阴性
STR   
同工酶

染色体

使用权限 未定
杂交瘤细胞株；3M4*操作流程：
1.1 主要试剂与仪器：倒置相差显微镜（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存：
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液（37℃预热，8～10倍体积）离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内，在37℃、5％co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek－293细胞48h换液1次，细胞长至60%～70%融合时，用0.25%胰酶消化1～2min，将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散，为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次，获得细胞悬液，然后加入倍量的培养基，温和混匀，吸管分装混合液，传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞，待细胞变圆、脱壁并浮起，加入少量培养基离心，再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液，用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数，按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液＝(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞，以0.25％胰酶消化成单细胞悬液，计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中，每两小时随机取出3瓶细胞，吸除培养基及未贴壁细胞，加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞，取其平均值，按照公式：贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100％，计算贴壁率。
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液，以1×104/孔接种于24孔板，每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔，计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d，绘制细胞生长曲线
杂交瘤细胞株；3M4*注意事项：
1. 接收到细胞，肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张）。
2.用75%的酒精消毒（建议配置75%的酒精的水是灭菌过的）。
3.严格无菌操作，打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管*吸出（严禁直接倾倒），放入另一无菌容器中（建议换新的培养基培养细胞）。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆，轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落，加入终止液终止。
6.1000rpm，5min离心，重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶，37℃，5%CO2培养。
杂交瘤细胞株；3M4*美国菌种保藏中心， 又称美国模式菌种收集中心(ATCC)，是位于马里兰洲洛克菲勒的一家私营的，非赢利性组织。目前它可以提供各种动植物细胞、标准品、菌株达两万多种。ATCC成立于1925年，是世界上大的生物资源中心，由美国14家生化、医学类行业协会组成的理事会负责管理，是一家性、非盈利生物标准品资源中心。ATCC向发布其获取、鉴定、保存及开发的生物标准品，推动科学研究的验证、应用及进步 ATCC可以提供以下类别生物标准品：细胞株（3000多种）；菌株（15000多种）；动植物病毒株（2500多种）以及重组物质等。
V-PMedium,Modified

月桂基盐胰蛋白胨肉汤(LST) Lauryl Sulfate Tryptose Broth 用于大肠菌群,大肠杆菌的测定(GB2008、SN标准)

卵黄高盐琼脂基础 Egg-Yolk Salt Agar Base 250 用于生物制品金黄色葡萄球菌选择性分离

牛心汤培养基250g/瓶用于链球菌增菌incubationmedia牛心汤培养基250g/瓶用于链球菌增菌

Trypticase-Soy-PolymyxinBrothBase
硫乙醇酸盐流体培养基管  7.5ml*20支/盒  主要用于药品的厌氧培养，可立玻璃试管，可加样

沙氏葡萄糖液体培养基管  10ml*20支/包  药品中霉菌和酵母菌的培养

沙门氏志贺氏增菌液管  9ml*20支/包  用于沙门氏、志贺氏菌的分离培养

胰酪大豆胨液体培养基管  7.5ml*20支/盒  用于需氧菌和真菌的培养，可立玻璃试管，可加样
血琼脂培养基基础24060250g加入脱纤维羊血或兔血，制成血琼脂培养基，用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB4789..

脱氧胆酸盐柠檬酸盐琼脂 (Hynes) (CM0227) Oxoid incubation media 脱氧胆酸盐柠檬酸盐琼脂 (Hynes) (CM0227) Oxoid

乳链球菌 产杀蚜素，毒杀蚜虫、红蜘蛛及某些鳞翅目幼虫。 支/瓶

22iquidMedium

琼脂培养基B 250g 一种通用的营养培养基，用于各种微生物的培养。
大鼠纹状体神经元RN-s

CD14 Others Rat 大鼠 CD14 人细胞裂解液 (阳性对照)

大鼠骨髓基质细胞*培养基 100mL

BV-2小鼠小胶质细胞 Microglial cells of BV-2 mice 1640+20%FBS

EREG Protein Human 重组人 Epiregulin / EREG 蛋白 (Fc 标签)

VE(人血管内皮细胞) 5×106cells/瓶×2 胰岛β细胞Many types of cells包装：5 × 105次方(1ml)
大鼠纹状体神经元RN-s

CD14 Others Rat 大鼠 CD14 人细胞裂解液 (阳性对照)

大鼠骨髓基质细胞*培养基 100mL

BV-2小鼠小胶质细胞 Microglial cells of BV-2 mice 1640+20%FBS

EREG Protein Human 重组人 Epiregulin / EREG 蛋白 (Fc 标签)

VE(人血管内皮细胞) 5×106cells/瓶×2 胰岛β细胞Many types of cells包装：5 × 105次方(1ml)
杂交瘤细胞株；3M4*TPM4 Others Human 人 TPM4 / opomyosin 4 人细胞裂解液 (阳性对照)

肾实质细胞Many types of cells包装：5 ×105次方(1ml)

小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-B1

Z-HL16C细胞，人胚肺成纤维细胞突变癌细胞 非洲绿猴肾细胞,COS-6细胞 CL-0074DLD-1(人结肠腺癌细胞)5×106cells/瓶×2

SW620(人结肠癌细胞) 5×106cells/瓶×2

HPAEC-c 人肺动脉内皮细胞(HPAEC) 500,000cells 颅盖造骨细胞Many types of cells包装：5 × 105次方(1ml)
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