BRET ( 生物发光共振能量转移 ) 是一种测量蛋白 - 蛋白或蛋白 - 配体相互作用的技术,涉及生物发光供体和荧光受体的相互作用。当供体和受体彼此相距小于 10 nm时,供体激发受体,然后受体发射荧光。通过用供体标记一种目的蛋白,用受体标记该目的蛋白的结合配体,可以使用酶标仪来检测供体和受体发射的光,从而测量蛋白质相互作用。
Promega 的 NanoBRET™ 技术通过使用更亮的发光供体 ( NanoLuc 荧光素酶 )、优化的能量受体 (HaloTag®-NCT) 以及供体和受体波长之间更宽的分离,改进了早期的BRET,包括 BRET1 和 BRET2 ( 见图一 ) 不足。这些改进提供了更强的信号,更好的灵敏度和更低的背景,使得在活细胞内检测蛋白质相互作用成为可能。
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