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Anti-TCOF1抗体,特雷彻·柯林斯综合征抗体
规格:100ul,200ul,1mg
宿主:兔,鼠,羊
Ig类型:IgG
克隆类型:单克隆/多克隆
标记物:无标记物.
需要标记抗体,可咨询客服订购。相关标记抗体:HRP标记抗体,Biotin标记抗体,Gold标记抗体,RBITC标记抗体,AP标记抗体,FITC标记抗体,Cy3标记抗体,Cy5标记抗体,Cy5.5标记抗体,Cy7标记抗体,PE标记抗体,PE-Cy3标记抗体,PE-Cy5标记抗体,PE-Cy5.5标记抗体,PE-Cy7标记抗体,APC标记抗体,Alexa Fluor 350标记抗体,Alexa Fluor 488标记抗体,Alexa Fluor 555标记抗体,Alexa Fluor 647标记抗体
浓度 :1mg/ml
纯化方式:抗原特异性亲和纯化
缓冲液成分:0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA, 0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
应用: WB;IHC-P、IHC-F; ICC; IP;IF;ELISA。如果抗体需用于流式细胞术,请参见流式抗体。具体适用的实验和针对的物种请来电或99咨询。公司提供Elisa实验配对抗体抗原,需要请电询或99咨询。
产品稀释比例:ELISA=1:1000,Western blotting=1:500,IF=1:100-50,IHC-P=1:100-500,IHC-F=1:100-500,Immunohistocry=1:100-500
Optimal working dilutions must be determined by end user.
保质期:1年
储存温度:-20℃(避免反复冻融)
Anti-TCOF1抗体,特雷彻·柯林斯综合征抗体
蛋白质样品获得:细菌诱导表达后,可通过电泳上样缓冲液直接裂解细胞,真核细胞加匀浆缓冲液,机械或超声波室温匀浆0.5-1min。然后4℃,13,000g离心15min。取上清液作为样品。(二)电泳:制备电泳凝胶,进行SDS-PAGE。
1、电泳结束后将胶条割至合适大小,用转膜缓冲液平衡,5min×3次。
2、膜处理:预先裁好与胶条同样大小的滤纸和NC膜,浸入转膜缓冲液中10min。
3、转膜:转膜装置从下至上依次按阳极碳板、24层滤纸、NC膜、凝胶、24层滤纸、阴极碳板的顺序放好,滤纸、凝胶、NC膜精确对齐,每一步去除气泡,上压 500g重物,将碳板上多余的液体吸干。接通电源,恒流1mA/cm2,转移1.5hr。转移结束后,断开电源将膜取出,割取待测膜条做免疫印迹。将有蛋白标准的条带染色,放入膜染色液中50s后,在50%甲醇中多次脱色,至背景清晰,然后用双蒸水洗,风干夹于两层滤纸中保存,留与显色结果作对比。
免疫反应:
1、用0.01M PBS洗膜,5min ×3次。
2、加入包被液,平稳摇动,室温2hr。
3、弃包被液,用0.01M PBS洗膜,5min×3次。
4、加入一抗(按合适稀释比例用0.01M PBS稀释,液体必须覆盖膜的全部),4℃ 放置12hr以上。阴性对照,以1%BSA取代一抗,其余步骤与实验组相同。
5、弃一抗和1%BSA,用0.01M PBS分别洗膜,5min×4次。
6、加入辣根过氧化物酶偶联的二抗(按合适稀释比例用0.01M PBS稀释),平稳摇动,室温2hr。
7、弃二抗,用0.01M PBS洗膜,5min×4次。
8、加入显色液,避光显色至出现条带时放入双蒸水中终止反应。
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