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B.cereus的生物学特性与微生物学检验!

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详细介绍

                 B.cereus生物学特性与微生物学检验



B.cereus生物学特性与微生物学检验


B.cereus)属于芽胞杆菌属,在营养琼脂上能形成芽胞,因其菌落表面粗糙似白蜡状,故得名。


一、生物学特性

⒈形态结构*为革兰阳性、两端较钝圆的大杆菌,大小为(1.0~1.2)um×(3.0~5.0) um,多呈链状排列。生长6h后即可形成芽胞,芽胞呈卵圆形,位于菌体中心,不大于菌体。引起食物中毒的菌株多为周毛菌,不形成荚膜。

⒉培养特性为需氧或兼性厌氧,营养要求不高,在普通营养琼脂平板上生长良好,形成较大、灰白色、不透明、表面粗糙似毛玻璃状或融蜡状菌落,在*上可出现β溶血。在肉汤培养基中呈均匀混浊生长,液面有菌膜形成。

⒊生化反应能分解葡萄糖、麦芽糖、蔗糖、水杨昔、果糖,不分解木糖、鼠李糖、*,能液化明胶,缓慢液化牛乳,VP试验阳性,多数菌株能利用枸橼酸盐。触酶阳性,DNA酶阳性,*酶阳性。在卵黄琼脂平板上生长迅速,培养3h后虽未见菌落,但能看到由于*酶分解*而形成的白色混浊环,称为乳光反应或卵黄反应。


二、临床意义

B.cereus广泛分布于水、土壤及尘埃中,可在淀粉制品、乳及乳制品、肉、鱼、蔬菜、酱油、布丁、炒米饭、各种甜点等食品中大量生长繁殖,引起人类食物中毒。此菌在米饭中极易生长繁殖,我国由此引起的食物中毒报道较多。

本菌引起的食物中毒以夏、秋季多见,*主要的致病物质是肠毒素,引起的食物中毒有两种类型:一类为腹泻型,由不耐热肠毒素(LT)引起,进食后6~15 h发病,临床表现为腹痛、腹泻和里急后重,偶有呕吐或发热,通常在24 h恢复正常;另一类为呕吐型,由耐热肠毒素(ST)引起,于进餐后1~6h发病,患者主要临床表现为呕吐,仅部分有腹泻,病程一般不超过24h。外伤后*引起的全眼球炎是一种进展非常迅速的严重病症,治疗不及时易造成失明。*还可引起败血症、脑膜炎和心内膜炎等。


三、微生物学检验

(一)检验程序

B.cereus检验程序见图22-2。

图22-2*检验程序

(二)标本采集

采集可疑食物、患者粪便、呕吐物、血液等进行检验。暴露于空气中的食品在一定程度上都可受到本菌污染,除进行*的分离培养外,必须作活菌计数,每克或每毫升食物中细菌数大于lO5 CFU方有诊断价值。

(三)标本直接检查

采集的标本用无菌生理盐水制成细菌悬液,直接涂片、革兰染色镜检,可见革兰阳性大杆菌、两端钝圆、呈链状排列,无荚膜。

(四)活菌计数

将可疑食物样本用生理盐水稀释成10-3~10-1g/mL。

⒈涂布法取各稀释液0.1 mL一分别均匀涂布接种于卵黄琼脂平板上,置35℃孵育12h,*能产生乳光反应,易于识别。

⒉倾注平板法取各稀释液0.1 mL分别注入无菌的空平皿内,再将融化冷至45℃左右的适量的营养琼脂倾入该平皿中并立即混匀,凝固后置35℃培养,24~48 h后观察结果,计算出每毫升样本中所含活菌数。每个稀释度做两个平皿。

(五)分离培养

将可疑食物置无菌研钵中,加适量生理盐水研磨,分别接种于营养琼脂平板和*上。若为呕吐物,则可直接分离接种,于35℃培养18~24 h后,观察细菌生长情况,如发现似蜡样菌落可进一步分离纯培养,然后进行生化鉴定和药敏试验。

(六)鉴定

B.cereus的主要特征:革兰阳性大杆菌,芽胞位于菌体*,不大于菌体,常呈链状排列。菌落呈毛玻璃样或融蜡状。能分解葡萄糖、麦芽糖、蔗糖、果糖、水杨苷,能液化明胶,缓慢液化牛乳,VP试验阳性,*酶阳性。确定为*后可继续进行血清学分型、噬菌体分型及肠毒素检测。

临床常见革兰阳性需氧芽胞杆菌的主要特征见表22-1。动力阳性可排除炭疽芽胞杆菌蕈状芽胞杆菌;溶血、不分解*,可排除巨大芽胞杆菌;*试验阴性和*酶试验阳性,可排除苏云金芽胞杆菌;*酶阳性排除枯草芽胞杆菌和巨大芽胞杆菌。


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