染色体结构显示与检测

1）染色体显带 
显Q带法 
1. 漂洗：取经过干热预处理或已老化的染色体标本，置于pH6.0缓冲液中浸5~10分钟。 
2. 染色：浸入pH6.0的GM或QD染液中5~10分钟。 
3. 漂洗：浸入新鲜pH6.0缓冲液中漂洗两次，每次5分钟。 
4. 观察：向标本染色体面滴1~2滴新鲜缓冲液，覆以盖片（避免出气泡），置荧光显微镜下观察。 

显G带法 
*-Giemsa混合显带法 
1．预处理：取中期染色体标本，置60℃～60℃温箱中20～30分钟，或在37℃温箱隔夜，然后浸入0.025M磷酸缓冲液中，pH6.8，56℃温浴10分钟。 
2．消化和染色：用现配制的*-Giemsa混合液消化和染色10～30分钟，混合液按如下比例配制： 
0.025 M 磷酸缓冲液pH6.8 73.0 ml 
甲醇 27.0 ml 
Giemsa干粉 50.0 mg 
0.25%* 0.3～0.4 ml 
3．封片：染色后用自来水冲洗，入蒸馏水漂洗数次、晾干、二甲苯透明2~3分钟，封入中性树脂中。 

Giemsa显带法 
1．预处理：将标本置入60~80℃温箱或烤箱中20~30分钟，亦可在37℃温箱过夜。 
2．*消化：用0.85%的NaCl配制0.25%*溶液消化3~5分钟。 
3．染色：取出标本片，先直立于吸水纸上除去多余*液后，随即置入Giemsa染液中，染10分钟。 
4．封片：自来水洗，蒸馏水漂洗，晾干，二甲苯透明2~3分钟，封入中性树胶中。 

2）姐妹染色单体分化染色 
BUdR掺入和制片程序 
1．BUdR培养液制备：先制备好含BUdR的培养液（zui终浓度为3~10微克/毫升）。 
2．BUdR掺入：如用传代细胞，在末次传代后，改换用含BUdR的培养液培养。如为人末梢血细胞，一开始就用含BUdR培养液培养（培养瓶放在特制黑色木盒、黑布中或黑纸包裹）37℃温箱内培养。 
3．中止掺入与制片：待细胞经历两个细胞周期（人周围血细胞培养48或72小时）