免疫组化安排样本的处理办法

安排处理
恰当的安排处理是做好免疫组化染色的先决条件，也是决议染色胜败的内部因素，在安排细胞材料预备的过程中，不只要求坚持安排细胞形状完整，更要坚持安排细胞的抗原性不受损或充满，避免安排自溶。如果呈现自溶坏死的安排，抗原现已丢掉，即运用很活络的检测抗体和高明的技能，也很难检出所需的抗原，反而往往由于安排的坏死或制片时的刀痕挤压，在上述区域易呈现假阳性成果。
1) 安排及时选材和固定
安排标本及时的选材和固定是做好免疫组化染色的要害*步，是有用避免安排自溶坏死，抗原丢掉的开始，离体安排应赶快的进行选材，2h内，选材时所用的刀应锋利，要一刀下去切开安排，不行重复切拉安排，形成安排的挤压，安排块巨细要适中，一般在2.5cm×2.5cm×0.2cm，牢记选材时安排块宁可面积大，千万不能厚的准则，(也就是说安排块的面积能够大到3cm×5cm，但安排块的厚度千万不能超越0.2cm，不然将晦气于安排的均匀固定)。固定液快速渗透到安排内部使安排蛋白能在一定时刻内敏捷凝结。然后无缺的保存抗原和安排细胞形状。
对于固定液的选择，准则上讲，应根据抗原的耐受性来选择相应的固定液，但除非是专项科研项目，在病理惯例作业很难做到这一点，由于病理的确诊和辨别确诊都是在惯例HE病理确诊的基础上决议是否进行免疫组化的染色，而HE染色的惯例安排处理是采用10%的中性缓冲福尔马林或4%缓冲多聚甲醛4倍于安排体积进行安排固定，使用其渗透性强，对安排的作用均匀进行固定，但安排固定时刻在l2h内，一般固定时刻不应超越24小时。随着固定时刻的延伸对安排抗原的检出强度将逐步下降。
2) 安排脱水、通明、浸蜡
安排经固定后进行脱水、通明、浸蜡和包埋。把握的准则是脱水通明要充分但不能过，浸蜡时刻要够，温度不能高，不然形成安排的硬脆使安排切片困难，即使能切片，由于安排的硬脆，也使切片不能无缺平整，染色过程中极易脱片，对免疫组化染色抗原的定位及布景都晦气，所以*脱水和二甲苯通明的时刻不宜过长，正常巨细的安排*脱水lh×3次，二甲苯通明lh×2次即可，浸蜡及包埋白腊温度不要超越65℃。
免疫组化试验代测之免疫组化的样本处理切片染色注意事项
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