ELISA试剂盒手艺操作方法

ELISA试剂盒手工操作有浸泡式和流水冲刷式两种，浸泡式进程如下：
A、吸干或甩干孔内反响液；
B、用洗刷液过洗一遍（将洗刷液注满板孔后，即甩去）；
C、浸泡，行将洗刷液注满板孔，放置1-2分钟，间歇摇晃，浸泡时刻不可随意缩短；
D、吸干孔内液体，吸干应*，可用水泵或真空泵抽吸，也可甩去液体后在清洗毛巾或吸水纸上拍干；
E、重复操作c和d，洗刷3-4次（或按阐明规则）。
ELISA试剂盒操作技能的影响：
1）应确保清洁，整个操作过程中确保酶标板不接触次氯酸，以上的办法可以使“花板”降至zui低极限，然后进步检测的特异性，并得到更。
2）合理安排检丈量，ELISA试剂盒避免反响板过多形成洗板等待时刻长。
3）加酶试剂后用吸水纸在酶标板外表轻拭吸干。
4）用洗板机洗板时，确保洗液注满各孔，洗板针疏通，洗完板后在吸水纸（挑选洁净、无或少尘的吸水资料）上轻轻拍干，避免针口有纤维蛋白或异物，这些异物在洗板的过程中易发生拖带现象而导致“花板”的呈现。
5）严峻溶血：以HRP为符号的ELISA试剂盒测定中，残留在孔内的血红蛋白具有过氧化物酶样活性，催化底物显色形成假阳性。
削减ELISA试剂盒差错的办法
1.做试验时少说话，避免唾液掉进酶标条中。
2.参加一抗二抗需求放入37°。
3.如果一起做多个板子，多个板子别罗一起；尽量少用排枪。
4.加样时，由低浓度向高浓度加，这样削减跳孔的几率。
5.勤换枪头。
一、移液器的运用，加样（抗体）等需求定量的试剂时不运用排枪，经历证明排枪很不，极易跳孔，不要图廉价买等级低的tips 由于ELISA不但会扩大被检测的意图蛋白，也会扩大非特异结合的杂质蛋白。
二、倍比稀释样品时，稀释倍数要小于10。
三、一切的装跟ELISA测定试剂盒相关试剂的容器，玻璃制品的要干烤过或许运用一次性的树脂容器。