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进口elisa试剂盒试验中须掌握试剂盒的操作技巧

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进口elisa试剂盒试验中须掌握试剂盒的操作技巧
1、保存:ELISA试剂盒中各试剂请按说明书提示合理存放。
在储存及温育过程中避免将试剂暴露在强
光中。所有试剂瓶盖须旋紧以防止蒸发和微生物的污染,否则可能会出现错误的结果。
2、酶标板:刚开启的酶标板孔中可能会有少许水样物质,此为正常现象,不会对实验结果造成任何影响。暂时不用的板条应拆卸后放入备用铝箔袋,按推荐温度存放!
3、加样:加样或加试剂时,个孔与zui后一个孔的加样时间间隔如果太大,将会导致不同的“预温育”时间,从而明显地影响到测量值的准确性及重复性。每次的加样时间控制在10分钟内。推荐设置复孔。
4、温育:为防止样品蒸发,实验时必须给酶标板覆膜;洗板后应尽快进行下步操作,避免酶标板处于干燥状态;严格遵守给定的温育时间和温度。
5、洗涤:洗涤过程中反应孔中残留的洗涤液应在吸水纸上拍干,勿将滤纸直接放入反孔中吸水。在读数前要注意清除底部残留的液体和手指印,以免影响酶标仪读数。
6、试剂配制:运输过程会使液体沾到管壁或瓶盖,因此使用*0转/分离心1min,以使附着管壁或瓶盖的液体沉积到管底。取用前,请用移液器小心吹打4-5次使溶液混匀。标准品、生物素化抗体工作液、酶结合物工作液请根据所需用量配制,并使用相应的稀释液配制,不能混淆。请配制标准品及工作液,尽量不要微量配制以避免由于不准确稀释而造成浓度误差;请勿重复使用已稀释过的标准品、生物素化抗体工作液、酶结合物工作液。若需要分次使用标准品应按照每一次用量分装,将其放在-20~-80°C贮存。避免反复冻融。
7、显色时间的控制:加入底物后请定时观察反应孔的颜色变化(比如每隔
5分钟),如梯度已很明显,请提前加入终止液终止反应,避免颜色过深影响酶标仪读数。
8、底物:底物请避光保存,在储存和温育时避免强光直接照射。
9、混匀:充分轻微混匀对反应结果尤为重要,使用微量振荡器(使用zui低频率),如无微量振荡器,可在反应前手工轻轻敲击酶标板框混匀。
10、安全:试验中请穿着实验服并带乳胶手套做好防护工作。特别是检测血液或者其他体液样品时,请按国家生物试验室安全防护条例执行。
11、不同批号的试剂盒组份不能混用(洗涤液和反应终止液除外)
12、试验中所用的EP管和吸头均为一次性使用,严禁混用,否则将影响试验结果!

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