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木糖氧化无色杆菌保存

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所  在  地上海市

更新时间:2020-12-03 11:16:02浏览次数:185次

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木糖氧化无色杆菌保存低温保存法,将生长稳定期的细胞悬浮在10%甘油或其他低冰点液体中,密封于安瓿管内,然后控制冷却速度,使安瓿管温度逐步下降至 -35℃时,即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多数微生物如病毒、噬菌体、多种细菌、放线菌、酵母和原虫、特别是一些用冷冻干燥法有困难的微生物,都可用此法长期保存。

基本概念:
(1)菌群:由多种细菌混合组成的相对稳定的细菌群体,产品仅用于科研具有某些共同性状。如大肠菌群包括大肠杆菌、产气肠细菌及他们之间的过渡类型。
(2) 菌属:菌种的上一级分类,通常性状相近、亲缘关系密切的若干菌种组成一个菌属,如芽孢杆菌属、葡萄球菌属、乳杆菌属等。
(3)是细菌基本的分类单位,通常指表型特征相似、亲缘关系接近的一类细菌群体,与同属内其他种有着明显差异;当涉及到细菌保存时,菌种是指细菌的种子(用来长期保存)资源。
(4) 菌型:同一菌种的不同细菌,在某些方面存在较小差异的为同一菌型,通常一个菌种内的细菌可以分为多种不同的菌型。
(5) 菌株:由一个独立分离的单细胞系培养而成的纯遗传型群体及其一切后代,一种微生物的每一个不同来源的纯培养物均可称为该菌种的一个菌株。


规格参数:
资源名称  木糖氧化无色杆菌保存
种属: Achromobacter│xylosoxidans

分离基物: 竹简

提供形式: 冻干物

安全等级: 1

模式菌株: no

培养基: 348

生长条件: 28℃

存储条件: 真空冷冻干燥法
仪器设备与器具:
1 恒温培养箱:36±1℃。
2 1000ml三角烧瓶、1ml、10ml移液管。
3 接种针。
4 显微镜。
5 超净工作台。
6 玻片、酒精灯、洗耳球、试管架。
7 天平:感量0.01g。
8 灭菌釜。
9 培养皿(直径为90mm)、试管,经121℃、30分钟灭菌。
10试管夹、酒精灯、秒表、载玻片
培养方法:
培养基 乳酸菌培养基 Ⅱ:Lacto-casein peptone (乳酪蛋白胨) 10g Beef extract 10g Yeast extract (酵母膏) 5g Glucose (葡萄糖) 5g Tween (吐温) 80 1g K2HPO4 2g Na-acetate (醋酸钠) 5g Diamine citrate (柠檬酸二胺) 2g MgSO4.7H2O 0.2g MnSO4.H2O 0.05g Distilled water (蒸馏水) 1000m pH 6.5-6.8。121℃,15min。
传代方法 ①冻干管:75%酒精擦拭管壁,后用砂轮在冻干管壁划两圈,掰断,用200μL无菌水或培养基充分溶解,平板涂布,活化培养。 ②斜面:试管口用75%酒精擦拭后,火焰灼烧,后用无菌接种铲切块,挑取接入平板或斜面,培养。
生长条件 30℃,好氧
存储条件 2-8℃冷藏
低温存法:
①简单保存法,将琼脂斜面孢子培养物、菌丝悬浮液以及由麸皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培养物置于4℃冰箱保存,保存时间不超过1~2个月,若将谷物原料制备的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蜡,以隔绝外界空气和水汽,保持时间可达3~4个月;②液氮超低温保存法,将生长稳定期的细胞悬浮在10%甘油或其他低冰点液体中,密封于安瓿管内,然后控制冷却速度,使安瓿管温度逐步下降至 -35℃时,即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多数微生物如病毒、噬菌体、多种细菌、放线菌、酵母和原虫、特别是一些用冷冻干燥法有困难的微生物,都可用此法长期保存。
微生物培养方法:
1、平板划线分离法:把混杂在一起的微生物或同一微生物群体中的不同细胞用接种环圈在平板培养基表面,通过分区划线稀释而得到较多独立分布的单个细胞,经培养后生长繁殖成单菌落。
2、稀释涂布平板法将菌液进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养,在稀释度足够高的菌液里,聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞,产品仅用于科研从而能在培养基表面形成单个菌落。
上述两种方法虽然都可以实现观察菌落特征的目的,但平板划线分离法不能对菌落计数,而稀释涂布平板法培养过程复杂,对平板的要求比较高,可参照以下步骤:
a、制备平板培养基将蔗糖琼脂培养基加热溶化并冷却至65℃,向蔗糖琼脂培养基中加入克林霉素溶液3~5ml并混合均匀,然后取20ml混合均匀的培养基溶液倒入培养皿,轻轻摇动培养皿,使培养基溶液均匀分布在培养皿底部,待培养基溶液凝固后即得平板培养基。
b、制备活性污泥混合液称取活性污泥土样15g,放入盛100ml无菌水并带有玻璃珠的三角烧瓶中,振摇15~20min混合均匀,用一支1ml无菌吸管从中吸取1ml土壤悬液加入盛有9ml无菌水的大试管中充分混匀,制成活性污泥混合液。
c、培养基涂布从活性污泥混合液中吸取0.2ml,滴在平板培养基表面的中央位置,用无菌玻璃涂棒将活性污泥混合液沿同心圆方向轻轻地向外扩展,使之分布均匀。
MEM(含L-丙氨酰-L-谷氨酰胺、HEPES)大肠埃希菌拉丁属名: coli

DMEM无糖(不含L-谷氨酰胺、丙酮酸钠)(镰刀菌)DG4注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用

DMEM低糖(含L-丙氨酰-L-谷氨酰胺、HEPES,不含酚红)虫草属注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用

DMEM无糖(不含丙酮酸钠)长双歧杆菌拉丁属名: Bifidobacterium  longum

DMEM低糖(含L-丙氨酰-L-谷氨酰胺,不含丙酮酸钠)干草鞘氨单胞菌拉丁属名: Sphingomonas faeni

DMEM无糖猪丹毒丝菌拉丁属名: rhuriopathiae

DMEM低糖(含L-丙氨酰-L-谷氨酰胺、HEPES,不含丙酮酸钠、酚红)枯草芽孢杆菌拉丁属名: Bacillus  subtilis

DMEM低糖(含L-丙氨酰-L-谷氨酰胺,不含丙酮酸钠、酚红)香菇注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用

DMEM低糖(含L-丙氨酰-L-谷氨酰胺,不含酚红)红栓菌注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用

DMEM低糖(含L-丙氨酰-L-谷氨酰胺)假黄色杆菌属拉丁属名: Pseudoxanthobacter sp.

DMEM低糖(含L-丙氨酰-L-谷氨酰胺、HEPES,不含丙酮酸钠)杂色曲霉拉丁属名: Aspergillus versicolor

DMEM低糖(不含酚红、丙酮酸钠,含HEPES)卢森坦类诺卡氏菌拉丁属名: Nocardiopsis lucentensis

DMEM低糖(不含酚红、丙酮酸钠)解淀粉芽孢杆菌拉丁属名: Bacillus  amyloliquefaciens

DMEM低糖(不含酚红)酿酒酵母拉丁属名: Saccharomyces cerevisiae

DMEM低糖(不含酚红、L-谷氨酰胺,含HEPES)热带假丝酵母拉丁属名: Candida  tropicalis

DMEM低糖(不含酚红、L-谷氨酰胺)Chryseobacterium拉丁属名: Chryseobacterium sp.
EZ-VISIONTWO,DNADYEASLOADINGBUFFER6XEZ-Vision Two DNA染料生物技术级暗绿色粘稠液体COLDsigma

25895-62-9清基硼氘化钠 96 atom % Dwo7ium CYANOBORODEUTERIDE

metxyl 4-pxenylthiopxene-3-carboxylate 38695-71-5

对羟基丙酯 Propyl 4-hydroxybenzoate,99% 94-13-3 100G 通用试剂

溴化镍 NICKqL BROMcTq 1346-88-9
木糖氧化无色杆菌保存SPRINTNEXTGEL10%Sprint NEXT胶, 10% 蛋白组学级RTsigma

5419-55-6硼酸三异丙酯Triisopropyl borate

KETOGLUTARICACIDA-α-酮戊二酸高纯级白色至微黄色结晶或结晶粉末COLDsigma

4-异丙氧基 4-Isopropoxy,97% 18962-05-5 1G 通用试剂

铂酸钾/化铂钾/铂(IV)酸钾/高铂化钾/六铂酸钾/Potassium platinic chloride BR,40%, 1克 进分

总基酸测试盒个RT

(脱氧核糖核酸酶)

橙黄Ⅱshēng huà shì jì容量:2~8°C250克

胆甾醇氧化酶(+4℃) CHOLqSTqROL OXIDcSq 908-76-6

乙酸 Iodoacetic acid (≥99%, powder or flak... 64-69-7 25G 通用试剂

 

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