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高加索链霉菌保存

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所  在  地上海市

更新时间:2020-12-03 11:26:23浏览次数:182次

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高加索链霉菌保存低温保存法,将生长稳定期的细胞悬浮在10%甘油或其他低冰点液体中,密封于安瓿管内,然后控制冷却速度,使安瓿管温度逐步下降至 -35℃时,即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多数微生物如病毒、噬菌体、多种细菌、放线菌、酵母和原虫、特别是一些用冷冻干燥法有困难的微生物,都可用此法长期保存。

规格参数:
资源名称  高加索链霉菌保存
种属: Streptomyces│ciscaucasicus

分离基物: 土壤

提供形式: 冻干物

安全等级: 1

模式菌株: no

培养基: 0012

生长条件: 28℃

存储条件: 液氮超低温冻结法;真空冷冻干燥法


仪器设备与器具:
1 恒温培养箱:36±1℃。
2 1000ml三角烧瓶、1ml、10ml移液管。
3 接种针。
4 显微镜。
5 超净工作台。
6 玻片、酒精灯、洗耳球、试管架。
7 天平:感量0.01g。
8 灭菌釜。
9 培养皿(直径为90mm)、试管,经121℃、30分钟灭菌。
10试管夹、酒精灯、秒表、载玻片
培养方法:
培养基 乳酸菌培养基 Ⅱ:Lacto-casein peptone (乳酪蛋白胨) 10g Beef extract 10g Yeast extract (酵母膏) 5g Glucose (葡萄糖) 5g Tween (吐温) 80 1g K2HPO4 2g Na-acetate (醋酸钠) 5g Diamine citrate (柠檬酸二胺) 2g MgSO4.7H2O 0.2g MnSO4.H2O 0.05g Distilled water (蒸馏水) 1000m pH 6.5-6.8。121℃,15min。
传代方法 ①冻干管:75%酒精擦拭管壁,后用砂轮在冻干管壁划两圈,掰断,用200μL无菌水或培养基充分溶解,平板涂布,活化培养。 ②斜面:试管口用75%酒精擦拭后,火焰灼烧,后用无菌接种铲切块,挑取接入平板或斜面,培养。
生长条件 30℃,好氧
存储条件 2-8℃冷藏
低温存法:
①简单保存法,产品仅用于科研将琼脂斜面孢子培养物、菌丝悬浮液以及由麸皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培养物置于4℃冰箱保存,保存时间不超过1~2个月,若将谷物原料制备的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蜡,以隔绝外界空气和水汽,保持时间可达3~4个月;②液氮超低温保存法,将生长稳定期的细胞悬浮在10%甘油或其他低冰点液体中,密封于安瓿管内,然后控制冷却速度,使安瓿管温度逐步下降至 -35℃时,即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多数微生物如病毒、噬菌体、多种细菌、放线菌、酵母和原虫、特别是一些用冷冻干燥法有困难的微生物,都可用此法长期保存。
基本概念:
(1)菌群:由多种细菌混合组成的相对稳定的细菌群体,具有某些共同性状。如大肠菌群包括大肠杆菌、产气肠细菌及他们之间的过渡类型。
(2) 菌属:菌种的上一级分类,通常性状相近、亲缘关系密切的若干菌种组成一个菌属,如芽孢杆菌属、葡萄球菌属、乳杆菌属等。
(3)是细菌基本的分类单位,通常指表型特征相似、亲缘关系接近的一类细菌群体,与同属内其他种有着明显差异;当涉及到细菌保存时,菌种是指细菌的种子(用来长期保存)资源。
(4) 菌型:同一菌种的不同细菌,在某些方面存在较小差异的为同一菌型,通常一个菌种内的细菌可以分为多种不同的菌型。
(5) 菌株:由一个独立分离的单细胞系培养而成的纯遗传型群体及其一切后代,一种微生物的每一个不同来源的纯培养物均可称为该菌种的一个菌株。
人强啡肽(Dyn)拟青霉拉丁属名: Paecilomyces sp.

人脑啡肽(ENK)球孢白僵菌用途: 防治桃小食心虫

人神经肽Y(NP-Y)布氏虫草注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用

人乙酰胆碱(ACH)Sphingopyxis contaminans 拉丁属名: Sphingopyxis contaminans

人脑钠素/脑钠尿肽(BNP)产酸克雷伯氏菌拉丁属名: Klebsiella oxytoca

人细胞角蛋白20(CK20)灰黄青霉注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用

人N端前脑钠素(NT-proBNP)猴头注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用

人细胞角蛋白13(CK-13) Bacillus myloliquefaciens subsp. plantarum 注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用

人细胞角蛋白17(CK17)青霉属拉丁属名: Penicillium sp.

人B细胞淋巴瘤因子3(Bcl3)Pestalotiopsis neglecta注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用

人P27蛋白(P27)红色红曲霉拉丁属名: Monascus ruber

人粘蛋白/粘液素5B(MUC5B)短杆状马赛菌拉丁属名: Massilia brevitalea

人Dickkopf 1(DKK1)土星孢青霉拉丁属名: Eupenicillium  saturniforme

人肿瘤标志物(CA724)柱形矛束霉拉丁属名: Cephalotrichum columnare

人转移因子(TF) 费雷生刺枝霉拉丁属名: Chaetostylum fresenii

人结肠癌抗原(CCA)平脐儒孢菌用途: 教学科研
litxiumCHLORIDE,8MSOLUTION8M 录化锂溶液生物技术级透明无色液体RTsigma

100-40-34-基-1-环己烯(+4℃)4-Vinyl-1-cyclohexene

RNASEINHIBITOR,RECOMBINANTRNase抑制剂,重组生物技术级透明无色液体 -20 degrees Csigma

对基酚盐酸盐 p-Aminophenol hydrochloride 51-78-5 25G 通用试剂

4-硝基基棕榈酸酯 4-Nitrophenyl palmitate 1492-30-4 1G 通用试剂
高加索链霉菌保存STETBUFFERSTET 缓冲液0500MLRT

343338-28-3(S)-(-)-叔丁基亚磺酰胺(S)-(-)-2-metxyl-2-propanesulfinamide

溴甲酚绿-甲基红指示剂溶液,英文名或英文缩写:metxyl Red mixed indicator solution,级别:BR,98,规格:25克

2-炳基本安 2-Propylcnilinq 181-39-

4-基丁酸,英文名或英文缩写:GABA,级别:BR,99%,规格:25克

二乙酸荧光素,英文名或英文缩写:FDA,级别:BR,98%,规格:100克

2521-86-0D-环戊基甘酸D-Cyclopentylglycine

ChloramineTtrihydrate录亚明T100毫克超纯,99%

单炳同-D-葡萄糖 1,2-O-Isopropylidqnq-D-glucofurcnosq 18249-40-1

言醋摸西沙星 Moxifloxccin xy7nochloridq 18686-86-8
微生物培养方法:
1、平板划线分离法:把混杂在一起的微生物或同一微生物群体中的不同细胞用接种环圈在平板培养基表面,通过分区划线稀释而得到较多独立分布的单个细胞,经培养后生长繁殖成单菌落。
2、稀释涂布平板法将菌液进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养,在稀释度足够高的菌液里,聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞,从而能在培养基表面形成单个菌落。
上述两种方法虽然都可以实现观察菌落特征的目的,但平板划线分离法不能对菌落计数,而稀释涂布平板法培养过程复杂,对平板的要求比较高,产品仅用于科研可参照以下步骤:
a、制备平板培养基将蔗糖琼脂培养基加热溶化并冷却至65℃,向蔗糖琼脂培养基中加入克林霉素溶液3~5ml并混合均匀,然后取20ml混合均匀的培养基溶液倒入培养皿,轻轻摇动培养皿,使培养基溶液均匀分布在培养皿底部,待培养基溶液凝固后即得平板培养基。
b、制备活性污泥混合液称取活性污泥土样15g,放入盛100ml无菌水并带有玻璃珠的三角烧瓶中,振摇15~20min混合均匀,用一支1ml无菌吸管从中吸取1ml土壤悬液加入盛有9ml无菌水的大试管中充分混匀,制成活性污泥混合液。
c、培养基涂布从活性污泥混合液中吸取0.2ml,滴在平板培养基表面的中央位置,用无菌玻璃涂棒将活性污泥混合液沿同心圆方向轻轻地向外扩展,使之分布均匀。

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