上海谷研实业有限公司
初级会员 | 第9年

18321818584

elisa检测试剂盒
ATCC细胞
标准品
生化试剂
PCR试剂盒
菌种
培养基
感觉态细胞
PCR检测试剂盒
细胞培养与转染
质粒
荧光定量PCR试剂盒
试剂盒
进口elisa试剂盒
LAMP试剂盒
科研抗体
科研菌种
生化检测试剂盒
科研细胞

TSZelisa试剂盒实验中保温方法说明

时间:2017/2/23阅读:263
分享:

TSZelisa试剂盒中一般有两次抗原抗体反应,即加标本和加酶结合物后。抗原抗体反应的完成需要有一定的温度和时间,这一保温过程称为温育,有人称之为孵育,在ELISA试剂盒中似不恰当。
ELISA属固相免疫测定,抗原、抗体的结合只在固相表面上发生。以抗体包被的夹心法为例,加入板孔中的标本,其中的抗原并不是都有均等的和固相抗结 合的机会,只有贴近孔壁的一层溶液中的抗原直接与抗体接触。这是一个逐步平衡的过程,因此需经扩散才能达到反应的终点。在其后加入的酶标记抗体与固相抗 原的结合也同样如此。这就是为什么ELISA反应总是需要一定时间的温育。
温育常采用的温度有43℃、37℃、室温和4℃等。37℃是实验室中常用的保温温度,也是大多数抗原抗体结合的合适温度。在建立ELISA方法作反应 动力学研究时,实验表明,两次抗原抗体反应一般在37℃经1~2小时,产物的生成可达。为加速反应,可提高反应的温度,有些试验在43℃进行,但不宜 采用更高的温度。抗原抗体反应4℃更为*,在放射免疫测定中多使反应在冰箱中过夜,以形成多的沉淀。但因所需时间太长,在ELISA试剂盒中一般不予 采用。
保温的方式除有的ELISA仪器附有特制的电热块外,一般均采用水浴,可将TSZelisa试剂盒置于水浴箱中,ELISA板底应贴着水面,使温度迅速平 衡。为避免蒸发,板上应加盖,也可用塑料贴封纸或保鲜膜覆盖板孔,此时可让反应板漂浮在水面上。若用保温箱,ELISA试剂盒应放在湿盒内,湿盒要选用传 热性良好的材料如金属等,在盒底垫湿的纱布,后将ELISA板放在湿纱布上。湿盒应先放在保温箱中预温至规定的温度,特别是在气温较低的时候更应如此。 无论是水浴还是湿盒温育,反应板均不宜叠放,以保证各板的温度都能迅速平衡。室温温育的反应,操作时的室温应严格限制在规定的范围内,标准室温温度是指 20~25℃,但具体操作时可根据说明书的要求控制温育。室温温育时,TSZelisa试剂盒只要平置于操作台上即可。应注意温育的温度和时间应按规定力求准 确。为保证这一点,一个人操作时,一次不宜多于两块板同时测定。

会员登录

×

请输入账号

请输入密码

=

请输验证码

收藏该商铺

X
该信息已收藏!
标签:
保存成功

(空格分隔,最多3个,单个标签最多10个字符)

常用:

提示

X
您的留言已提交成功!我们将在第一时间回复您~
在线留言