当前位置:上海谷研实业有限公司>>技术文章>>如何提高ELISA试剂盒价格阳性值
近日有客户ELISA试剂盒价格间接法中,如何提高阳性值,在抗原浓度不变的情况下?他用自己的抗原包被的板子,用自己的酶标二抗和显色液做,阳性值很低,为OD 0.5。但是试剂盒中的酶标二抗和显色液做,阳性值却很高OD 1.4,这样看来我的抗原应该没问题,好像问题出在酶标二抗上,请劲马技术帮忙分析。根据客户留言在网上问题解答如下:
先要确定两种酶标二抗使用的是不是同一批包被的板,因为虽然是相同的抗原,可能两次包被不一样。
如果是同一批板,出现这种情况只能说明你的酶标二抗失活了,买新的二抗,按说明书上的稀释倍数稀释;阴性对照有颜色很可能是没封闭好。阳性值是由你的抗原抗体间亲和力决定的,增加抗原抗体用量,或提高二抗浓度,但灵敏度可能会降低,你可以重新摸下工作浓度;
阴性值降低,你可以采用BSA封闭2小时看看,好像没听说有人用FCS封闭的,你可以尝试采用其他的封闭液,据我了解,用BSA封闭不是很好,可以试试脱脂奶粉;再就是TMB本身时间长了就会略显色,你可以调整显色时间。
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