当前位置:上海谷研实业有限公司>>进口elisa试剂盒>>大鼠elisa试剂盒>> 48T/96T大鼠二肽基肽酶Ⅳ(DPPⅣ)elisa试剂盒
具有如下优点:
一、高效、灵敏、特异的抗体;
二、稳定的重复性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相载体;
四、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型;
五、性价比非常好,节省实验经费。
产品名称:大鼠二肽基肽酶Ⅳ(DPPⅣ)elisa试剂盒
英文名称:Rat DPPⅣ ELISA Kit
规格:48T/96T
保存: 2-8℃(频繁使用时);-20℃(长时间不用时)。
有效期: 6 个月(4℃);12 个月(-20℃)。
用途: 用于体外定量分析人血清、血浆、细胞培养上清、细胞裂解液
选择ELISA试剂盒应从灵敏度、特异性、精密度、稳定性、简便性、安全性及经济性全面评价。
操作流程如下:
(1)仅用于科研待测样品孔中每孔加入待测样品100μl,每种样品设3个平行孔;设两个阴性对照孔,每孔加未处理组的细胞裂解液100μl;另设一个空白对照孔,加入纯细胞裂解液100μl。
(2)酶标板置4℃,包被过夜。
(3)洗板:吸干孔内反应液,用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去),之后将洗涤液注满板孔,浸泡1-2分钟,间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
(4)阴性对照孔每孔加入PBS 50μl,样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。
(5)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。
(8)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB显色液 100μl,轻轻混匀10s,置37℃暗处反应15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。
(12)分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,终测得的OD值为两者之差(W1-W2),以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
(13)数据处理:在得出标本(S)和阴性对照(N)的 OD值后,计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。
注意事项:
1加样:
①实验样本过多时,可分批次操作,以减少实验时间延长造成的误差;
②加酶试剂后,用吸水纸吸干孔外试剂;
③作定量试验时,使用加样器加注试剂,并经常校正其准确性,此外,要做到一份样本一个移液头,防止交叉污染。
2.温育:
①如有两种温度,尽量使用较低的温育温度、较长反应时间的条件;
②用1个小温度计放置在板孔反应液中测量观察;
③96孔板周围孔与中心孔在温育中的热力学梯度会造成“边缘效应”,因此尽量采用水浴;
3.洗板:
①手工洗板时,拍板时要垂直,避免交叉污染,用力不能过猛,防止抗原抗体复合物脱离;
②洗板机洗板时应经常检查冲洗头是否通畅,若被杂物堵塞时可用注射器针头挑出;
③为了洗涤效果好,实验室可采用机器与人工洗涤相结合的方法,在机器洗涤后再进行人工洗板1-2次,或适当增加洗板的次数;
4.显色:
ELISA试剂盒中,如以四甲基联苯胺(TMB)为底物,则提供的底物为A和B两瓶应用液;如以邻苯二胺(OPD)为底物,则试剂盒提供邻苯二胺片剂或粉剂。显色反应条件为37℃或室温反应15-30 min。以邻苯二胺(OPD)为底物的试剂,要临用前30 min配制且必须避光。以四甲基联苯胺(TMB)为底物的试剂则不需避光,但A、B液应尽量避免接触金属器械。
5.判定:
读取结果要在15-30 min内完成,定性测定用肉眼判读试验结果时,反应板应水平距离白色背景10-15 cm;定量测定时用酶标仪读取结果,酶标仪不应置于阳光或强光照射下,需先预热15-30 min再进行测试。
试剂配制:
1、酶联板(Assay plate ):一块(96孔或者48孔)。
2、标准品(Standard):2瓶(冻干品)。
3、样品稀释液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素标记抗体稀释液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素标记抗体(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根过氧化物酶标记亲和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、浓洗涤液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10、终止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
肾足蛋白(NPHN)(酶联免疫吸附试验法) 99% 变异盐单胞菌 10g
肌钙蛋白T((酶联免疫吸附试验法) 99% 尖孢镰孢 250g
α-胞衬蛋白(SPTAN1)(酶联免疫吸附试验法) 99% 黑木耳 50g
谷氨酸脱氢酶(GDH)(酶联免疫吸附试验法) 98% 禾生壳二胞 100g
谷氨酸脱氢酶(GDH)(酶联免疫吸附试验法) 98% 葡枝根霉 25g
谷氨酸脱氢酶(GDH)(酶联免疫吸附试验法) ≥98% 托姆青霉 1g
谷胱甘肽过氧化酶1(GPX1)(酶联免疫吸附试验法) ≥98% 灵芝(赤芝,红灵芝) 25g
谷胱甘肽过氧化酶1(GPX1)(酶联免疫吸附试验法) ≥98% 茶茎点霉 5g
谷胱甘肽过氧化酶1(GPX1)(酶联免疫吸附试验法) 98% 孟氏假单胞菌 25g
乳过氧化物酶(LPO)(酶联免疫吸附试验法) 98% 泡盛曲霉 5g
乳过氧化物酶(LPO)(酶联免疫吸附试验法) 97% 葡萄园有孢汉逊酵母 1g
弹性蛋白(ELN)(酶联免疫吸附试验法) 96% 蓝微褐链霉菌 1g
血管生成素1(ANGPT1)(酶联免疫吸附试验法) 96% 硬结节杆菌 5g
血管生成素1(ANGPT1)(酶联免疫吸附试验法) 97% 泽普林假丝酵母 1g
胃泌素(GT)(酶联免疫吸附试验法) 97% 施氏假单胞菌 25g
脑源性神经营养因子(BDNF)(酶联免疫吸附试验法) 97% 溶杆菌 5g
脑源性神经营养因子(BDNF)(酶联免疫吸附试验法) ≥97% 贝莱斯芽胞杆菌 100g
脑源性神经营养因子(BDNF)(酶联免疫吸附试验法) ≥97% 鞘氨醇盒菌属 25g
大鼠二肽基肽酶Ⅳ(DPPⅣ)elisa试剂盒高效CHIP DNA分子克隆 TXB2(Thromboxane B2) 100 ul
高效CHIP DNA分子库构建 KYN(Kynurenine) 100 ul
10倍PCR*缓冲液 FPGS(Folylpolyglutamate synthase) 100 ul
一步法PCR反应液 TXB2(Thromboxane B2) 100 ul
超白金TAG DNA聚合酶 OT(Oxytocin) 20 ul
三磷酸脱氧核糖核苷酸(dNTPs)混合液 KYN(Kynurenine) 100 ul
一步法平端PCR反应液 RFC1(Reduced Folate Carrier 1) 100 ul
一步法荧光定量PCR反应液 Acetylated p53(Acetylated p53) 100 ul
基因甲基化特异性PCR扩增(MSP) Cleaved P9(Cleaved Caspase-9) 100 ul
大量总RNA氯化铯纯化 Cleaved P8(Cleaved Caspase-8) 100 ul
全血总RNA纯化 Rbx2(RNF7) 100 ul
组织总RNA纯化 FBLN3(Fibulin-3) 100 ul
细胞总RNA纯化 Anti-tissue transglutaminase IgG(Anti-tissue transglutaminase IgG) 20 ul
植物总RNA纯化(低多糖/酚) Ig(Immunoglobulin) 100 ul
植物总RNA纯化(高多糖/酚) Cleaved BID/TBID(Cleaved BH3-interacting domain death agonist) 100 ul
植物mRNA直接纯化 GABPA(GA-binding protein alpha chain) 100 ul
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