顺乌头酸酶(ACO)紫外分光光度法检测试剂盒 返回列表页

操作步骤:

实验开始前，各试剂均应平衡至室温（试剂不能直接在37℃溶解）；试剂或样品稀释时，均需混匀，混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量，如样品浓度过高时，应对样品进行稀释，以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围，计算时再乘以相应的稀释倍数。

1.        加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl，余孔分别加标准品或待测样品100μl，注意不要有气泡，加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，酶标板加上盖或覆膜，37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。

2.        弃去液体，甩干，不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl（在使用前一小时内配制），酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。

3.        温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分钟，大约400μl/每孔，甩干（也可轻拍将孔内液体拍干）。

4.        每孔加检测溶液B工作液（同检测A工作液） 100μl，酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。

5.        温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干（也可轻拍将孔内液体拍干）。

6.        依序每孔加底物溶液90μl，酶标板加上覆膜37℃避光显色（30分钟内，此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色，后3-4孔梯度不明显，即可终止）。

7.       依序每孔加终止溶液50μl，终止反应，此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性，底物反应时间到后应尽快加入终止液。

8.       用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度（OD值）。

商品属性：

商品介绍：

测定意义

顺乌头酸酶（aconitase），三羧酸循环中的酶，催化柠檬酸转变为异柠檬酸。柠檬酸本身不易氧化，在顺乌头酸酶作用下，通过脱水与加水反应，使羟基由β碳原子转移到α碳原子上，生成易于脱氢氧化的异柠檬酸，为进一步的氧化脱羧反应作准备。

测定原理

ACO催化柠檬酸转化成异柠檬酸，异柠檬酸氧化脱羧将NAD+ 还原生成NADH，导致340nm处光吸收上升。

需自备的仪器和用品

紫外分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1mL石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

实验方法学：

选择抗凝的注意点：

①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致，同时所取的全血的量也要尽量一致;

②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒，充分抗凝，防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;

③、抗凝全血收集的血浆相对较多（1ml抗凝全血能分离出0.4～0.5ml血浆）;

④、抗凝收集的血浆冷冻保存后，解冻时可能会出现絮状浑浊，如有则需要离心去掉浑浊后

用于测定。

氢氧化钴 98%2,6-二氯苄基氯 分析标准品SP-R(Human substance P receptor) ELISA Kit  人P物质受体

硝酸钴,六水 AR，99%4-氟氯苄 98%cGMP(Human Cyclic guanosine monophosphate) ELISA Kit  人环鸟苷

硝酸钴,六水 99.99% metals basis4-甲氧基苯甲酰氯 97%Lp-PL-A2(Human lipoprotein-associated phospholipase A2) ELISA Kit  人脂蛋白磷脂A2

钴，七水 CP，98.5%环戊 Standard for GC，>99.5%（GC)EL(Human Endothelial lipase) ELISA Kit  人内皮脂肪

氯化钴 CP环戊 99%sm Actinin- Alpha(Human skeletal muscle Actinin- Alpha) ELISA Kit  人横纹肌辅肌动蛋白α

三氧化钼 99.95%2--5-氟吡 97%BMP-7(Human Bone morphogenetic protein 7) ELISA Kit  人骨成型蛋白7

三氧化钼 99.9% metals basis一氯酮 96%(剧品)25(OH)D3/25 HVD3(Human 25-Dihydroxy vitamin D3)ELISA Kit  人25羟基3

三氧化钼 AR,99.5%(RS)-1H--2-羧酸 97%LTB4(Human Leukotriene B4) ELISA Kit  人白三烯B4

顺乌头酸酶(ACO)紫外分光光度法检测试剂盒 氧化铝  99.998% metals basis ,5～6μm,粉末角蛋白7

氧化铝 99．99%，镀膜异硫荧光素(FITC)标记糖尿病相关肽1-37

氧化铝G TLC凋亡蛋白活性因子-1（抗原）

三氧化二锑 SP凋亡蛋白活性因子-1（抗原）

三氧化二锑 99.99% metals basis雄激素受体（多肽抗原）

三氧化二锑 AR，99.5%5-羟色受体2A抗原

三氧化二锑 99.9%，平均粒径：0.7 µmⅡ(II)抗原

三氧化二锑 99.999% metals basis5-羟色受体3抗原

三氧化二锑 CP，99%5-羟色受体4抗原

活性氧化铝 40-60目 GC粘蛋白-2/上皮膜抗原2抗原

活性氧化铝 60-80目 GC整合素样金属蛋白与1型-7抗原

活性氧化铝 80-100目 GC血管紧张素原（抗原）

氟化铝 99.9% metals basis5-脂氧合抗原

氟化铝 99.99% metals basis辣根过氧化物标记整合素样金属蛋白与1型-7抗原

铝片 0.1mm,99.99% metals basis载脂蛋白E（抗原）