上海谷研实业有限公司

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鲍球状病毒PCR检测试剂盒规格
鲍球状病毒PCR检测试剂盒规格
产品型号:
产品参考价:
面议
厂商性质:
经销商
所 在 地:
上海市
更新时间:
2019-03-17 14:28:04
浏览次数:
42
【简单介绍】
品牌 适用领域 科研
产地 进口 加工定制
鲍球状病毒PCR检测试剂盒规格保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
【详细说明】

反应五要素:
鲍球状病毒PCR检测试剂盒规格参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是最末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以最低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。

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鲍球状病毒PCR检测试剂盒规格

Abalone Spherical VirusPCR

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样本采集、存放及运输:
1、鲍球状病毒PCR检测试剂盒规格样本采集:各类型样本按照常规方法采集;
2、存放:样本在2~8℃条件下保存应不超过72h,-70℃以下可长期保存,但应避免反复冻融(zui多冻融3次);
3、运输:采用泡沫箱加冰密封进行运输。
【标本要求】
鲍球状病毒PCR检测试剂盒规格人体鼻腔或咽部分泌物:用无菌捻拭子拭取鼻腔或咽部分泌物,将分泌物或咽拭子置入无菌玻璃管(含0.4ml灭菌生理盐水),用无菌棉球将试管塞紧后,密闭送检。标本可立即用于检测,也可保存于-20℃待测。
组成及试剂配制:
1、鲍球状病毒PCR检测试剂盒规格酶标板:一块(96孔)
2、 标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 U/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液:1×20ml。
4、 检测稀释液A:1×10ml。
5、 检测稀释液B:1×10ml。
【检验方法】
1.标本、对照品的核酸裂解处理
用商品化(取得医疗器械许可证)的RNA提取试剂盒处理标本,具体操作参见该试剂盒说明书。
或用Trizol法提取,方法如下:取100?l样品置于1.5ml 离心管中,加入300?l裂解液(Trizol),再加入100, 混匀器上振荡混匀5sec或颠倒混匀15次; 13000rpm离心15min, 吸取上层液体,加入等体积异丙醇,颠倒混匀室温静置10min, 13000rpm离心10min,轻轻倒去上清;加入700?l 75%乙醇,颠倒洗涤,13000rpm离心5min,轻轻倒去上清,倒置于吸水纸上,弃尽液体或4000rpm离心5sec,将管壁上的残余液体甩到管底部,用微量加样器尽量吸干液体,加入20?l DEPC-H2O溶解RNA。
2.试剂配制
取n×19?l H7N9核酸荧光PCR检测混合液与n×1?l RT-PCR酶(n为反应管数),振荡混匀数秒, 3000rpm离心数秒。
3.加样取上述混合液20?l置于PCR管中,然后将样品核酸提取液、DEPC-H2O、阳性对照品各5?l分别加入PCR管中,盖好管盖,立即进行PCR扩增反应。
4. PCR扩增反应管置于定量荧光PCR仪上,推荐循环参数设置:
45℃×10min; 95℃×15min;循环一次,再按95℃×15sec→60℃×60sec,循环45次;单点荧光检测在60℃,反应体系为25?l。
荧光通道检测选择:选用FAM通道。
磷酸化失调症蛋白1抗体473-98-3HPLC≥96%20mg/支白桦脂醇

脊髓小脑失调症蛋白1抗体13159-28-9HPLC≥98%20mg/支白桦脂醛

磷酸化APP淀粉样肽前体蛋白抗体472-15-1HPLC≥98%20mg/支白桦脂酸

磷酸化细胞凋亡信号调节激酶1抗体6035-49-0HPLC≥98%20mg/支白蜡树素

磷酸化细胞凋亡信号调节激酶1抗体501-36-0HPLC≥98%20mg/支白藜芦醇

磷酸化活化复制因子2抗体3570-40-9HPLC≥98%20mg/支白绵马素AA

磷酸化钠钾ATP酶蛋白a1抗体59092-91-0HPLC≥98%20mg/支白绵马素AP

磷酸化钠钾ATP酶蛋白a1抗体34316-15-9HPLC≥98%20mg/支白屈菜红碱

酰辅酶A羧化酶抗体73069-13-3HPLC≥98%20mg/支白术内酯Ⅰ

磷酸化酰辅酶A羧化酶抗体 HPLC≥98%20mg/支白术内酯Ⅱ
鲍球状病毒PCR检测试剂盒规格1 l10X TBE Buffer (Tris-borate-EDTA)1 l

4x1.25 ml10X Taq Buffer without Detergent4x1.25 ml

5x1 ml10X Buffer BamHI, Lsp1109I5x1 ml

1 ml10X Buffer BfuI1 ml

5x1 ml10X Reaction Buffer for phi29 DNA Polymerase5x1 ml

4x1.25 ml10X DreamTaq™ Buffer4x1.25 ml

1.5 ml10X T4 DNA Ligase Buffer1.5 ml

4x1.25 ml10X DreamTaq™ Green Buffer4x1.25 ml

5x1 ml10X Buffer B5x1 ml

5x1 ml10X Buffer G5x1 ml

5x1 ml10X Buffer O5x1 ml

 

 

 

 



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