12绵羊疱疹病毒1型PCR检测试剂盒说明书 返回列表页

组成及试剂配制:
1、12绵羊疱疹病毒1型PCR检测试剂盒说明书酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。

样本采集、存放及运输：
1、样本采集：各类型样本按照常规方法采集；
2、存放：样本在2~8℃条件下保存应不超过72h，-70℃以下可长期保存，但应避免反复冻融（多冻融3次）；
3、运输：采用泡沫箱加冰密封进行运输。
【标本要求】
人体鼻腔或咽部分泌物:用无菌捻拭子拭取鼻腔或咽部分泌物，将分泌物或咽拭子置入无菌玻璃管（含0.4ml灭菌生理盐水），用无菌棉球将试管塞紧后，密闭送检。标本可立即用于检测，也可保存于-20℃待测。
【检验方法】
1.标本、对照品的核酸裂解处理
用商品化（取得医疗器械许可证）的RNA提取试剂盒处理标本，具体操作参见该试剂盒说明书。
或用Trizol法提取，方法如下：取100?l样品置于1.5ml 离心管中，加入300?l裂解液（Trizol），再加入100， 混匀器上振荡混匀5sec或颠倒混匀15次； 13000rpm离心15min， 吸取上层液体，加入等体积异丙醇，颠倒混匀室温静置10min， 13000rpm离心10min，轻轻倒去上清；加入700?l 75%乙醇，颠倒洗涤，13000rpm离心5min，轻轻倒去上清，倒置于吸水纸上，弃尽液体或4000rpm离心5sec，将管壁上的残余液体甩到管底部，用微量加样器尽量吸干液体，加入20?l DEPC-H2O溶解RNA。
2.试剂配制
取n×19?l H7N9核酸荧光PCR检测混合液与n×1?l RT-PCR酶（n为反应管数）,振荡混匀数秒, 3000rpm离心数秒。
3.加样取上述混合液20?l置于PCR管中，然后将样品核酸提取液、DEPC-H2O、阳性对照品各5?l分别加入PCR管中，盖好管盖，立即进行PCR扩增反应。
4. PCR扩增反应管置于定量荧光PCR仪上，推荐循环参数设置：
45℃×10min; 95℃×15min;循环一次，再按95℃×15sec→60℃×60sec，循环45次;单点荧光检测在60℃，反应体系为25?l。
荧光通道检测选择：选用FAM通道。

ATM ELISA Kit磷酸化FMS样酪氨酸激酶3毛细血管扩张性共济失调突变因子(ATM)ELISA试剂盒
TCHH ELISA Kit磷酸化FMS样酪氨酸激酶3毛透明蛋白(TCHH)ELISA试剂盒
CECR1 ELISA Kit磷酸化FMS样酪氨酸激酶3猫眼综合征染色体区候选基因1(CECR1)ELISA试剂盒
PPHLN1 ELISA Kit磷酸化c-fos抗体脉周蛋白1(PPHLN1)ELISA试剂盒
MGA ELISA Kit磷酸化c-fos抗体麦芽糖酶糖化酶(MGA)ELISA试剂盒
CLCA1 ELISA Kit磷酸化c-fos抗体氯离子通道辅助蛋白1(CLCA1)ELISA试剂盒
CLIC1 ELISA Kit缺氧诱导因子1α抑制蛋白抗体氯化物细胞内通道蛋白1(CLIC1)ELISA试剂盒
RL ELISA Kit肺鼠疫耶尔森氏菌F1荚膜蛋白抗体络丝蛋白(RL)ELISA试剂盒
OVCH2 ELISA Kit补体因子H抗体卵质酶2(OVCH2)ELISA试剂盒
OVCH1 ELISA Kit促卵泡刺激素抗体卵质酶1(OVCH1)ELISA试剂盒
FSTL1 ELISA Kit神经元核抗原抗体抗体卵泡抑素样蛋白1(FSTL1)ELISA试剂盒
FSHR ELISA KitFAM135B蛋白抗体卵泡刺激素受体(FSHR)ELISA试剂盒
LCAT ELISA Kit“衰老关键蛋白”抗体卵磷脂胆固醇脂酰转移酶(LCAT)ELISA试剂盒
FLCN ELISA Kit促卵泡刺激素受体抗体卵巢滤泡激素(FLCN)ELISA试剂盒
ASTL ELISA Kit成纤维细胞生长因子12抗体龙虾肽酶样金属内肽酶(ASTL)ELISA试剂盒
ST14 ELISA Kit成纤维细胞生长因子14抗体瘤变抑制因子14(ST14)ELISA试剂盒
TBP2 ELISA Kit脑型脂肪酸结合蛋白抗体硫氧还蛋白结合蛋白2(TBP2)ELISA试剂盒
TrxR3 ELISA KitFAM96B蛋白抗体硫氧还蛋白还原酶3(TrxR3)ELISA试剂盒
TrxR2 ELISA Kit脑胚胎锌指样蛋白1抗体硫氧还蛋白还原酶2(TrxR2)ELISA试剂盒
TrxR1 ELISA KitFAM29蛋白抗体硫氧还蛋白还原酶1(TrxR1)ELISA试剂盒
SRXN1 ELISA KitMaFF相关蛋白抗体硫氧还蛋白1(SRXN1)ELISA试剂盒
SULF2 ELISA Kit凝血因子7抗体硫酸酯酶2(SULF2)ELISA试剂盒
SULF1 ELISA KitFEM1B抗体硫酸酯酶1(SULF1)ELISA试剂盒
DSE ELISA Kit纤维母细胞生长因子3抗体硫酸皮肤素差向异构酶(DSE)ELISA试剂盒
HSPG2 ELISA Kit纤维母细胞生长因子4抗体硫酸肝素蛋白聚糖2(HSPG2)ELISA试剂盒
HSPG ELISA KitFRA-1蛋白抗体硫酸肝素蛋白聚糖(HSPG)ELISA试剂盒
HS ELISA Kit精神发育迟滞相关蛋白抗体硫酸肝素(HS)ELISA试剂盒
TPMT ELISA Kit延伸突触蛋白3抗体硫嘌呤甲基转移酶(TPMT)ELISA试剂盒
TST ELISA Kit原纤维蛋白2抗体硫代硫酸盐转硫酶(TST)ELISA试剂盒
THTPA ELISA Kit尤文肉瘤FLI1蛋白抗体硫胺素三磷酸酶(THTPA)ELISA试剂盒
TPK1 ELISA Kit岩藻糖转移酶1抗体硫胺焦磷酸激酶1(TPK1)ELISA试剂盒
SCCA2 ELISA Kit凋亡调节蛋白δ+γ抗体鳞状细胞癌抗原2(SCCA2)ELISA试剂盒
SCCA1 ELISA Kit叉头蛋白O1/O3/O4抗体鳞状细胞癌抗原1(SCCA1)ELISA试剂盒
ICHYN ELISA Kit微管相关蛋白FAM82B抗体鳞蛋白(ICHYN)ELISA试剂盒
PLCγ1 ELISA Kit纤维蛋白原A链抗体磷酯酶Cγ1(PLCγ1)ELISA试剂盒
PEBP1 ELISA KitFAS凋亡抑制分子1抗体磷脂酰乙醇胺结合蛋白1(PEBP1)ELISA试剂盒
PEMT ELISA KitFAS凋亡抑制分子2磷脂酰乙醇胺-N-甲基转移酶(PEMT)ELISA试剂盒
PISD ELISA Kit表皮细胞表面抗原抗体1抗体磷脂酰丝氨酸脱羧酶(PISD)ELISA试剂盒
PSR ELISA Kit凝血因子9抗体磷脂酰丝氨酸受体(PSR)ELISA试剂盒
PTDSS2 ELISA Kit凝血因子10抗体磷脂酰丝氨酸合酶2(PTDSS2)ELISA试剂盒
PTDSS1 ELISA Kit凝血因子11轻链抗体磷脂酰丝氨酸合酶1(PTDSS1)ELISA试剂盒
PLCγ2 ELISA Kit凝血因子12重链抗体磷脂酰肌醇特异性磷酯酶Cγ2(PLCγ2)ELISA试剂盒
PLCβ3 ELISA KitFIGNL1蛋白抗体磷脂酰肌醇特异性磷酯酶Cβ3(PLCβ3)ELISA试剂盒
PLCβ1 ELISA KitFAM70A蛋白抗体磷脂酰肌醇特异性磷酯酶Cβ1(PLCβ1)ELISA试剂盒
PICALM ELISA Kit含纤维蛋白原C结构域蛋白1抗体磷脂酰肌醇结合网格蛋白装配蛋白(PICALM)ELISA试剂盒
GPC6 ELISA KitF-box蛋白相关蛋白6抗体磷脂酰肌醇蛋白聚糖6(GPC6)ELISA试剂盒
GPC5 ELISA Kit磷酸化成纤维细胞生长因子受体底物2抗体磷脂酰肌醇蛋白聚糖5(GPC5)ELISA试剂盒
GPC4 ELISA Kit椎骨蛋白2抗体磷脂酰肌醇蛋白聚糖4(GPC4)ELISA试剂盒
GPC3 ELISA Kit凝血因子VII磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC3)ELISA试剂盒
GPC2 ELISA Kit凝血因子10抗体磷脂酰肌醇蛋白聚糖2(GPC2)ELISA试剂盒
GPC1 ELISA Kit脆性X综合征相关蛋白AFF2抗体磷脂酰肌醇蛋白聚糖1(GPC1)ELISA试剂盒
PGS1 ELISA Kit肌侧索硬化症相关蛋白FGGY抗体磷脂酰甘油磷酸合酶1(PGS1)ELISA试剂盒
PA ELISA Kit肌侧索硬化症相关蛋白FIG4抗体磷脂酸(PA)ELISA试剂盒
PLSCR5 ELISA Kit黄素腺嘌呤二核苷酸抗体磷脂爬行酶5(PLSCR5)ELISA试剂盒
PLSCR4 ELISA Kit甲酰肽受体3抗体磷脂爬行酶4(PLSCR4)ELISA试剂盒
PLSCR3 ELISA Kit兜甲蛋白抗体磷脂爬行酶3(PLSCR3)ELISA试剂盒
PLSCR2 ELISA Kit脂肪堆积和肥胖相关蛋白抗体磷脂爬行酶2(PLSCR2)ELISA试剂盒
PLD6 ELISA Kit鸟嘌呤核苷酸交换因子FARP2抗体磷脂酶D6(PLD6)ELISA试剂盒
PLD5 ELISA KitFK506结合蛋白相关蛋白抗体磷脂酶D5(PLD5)ELISA试剂盒
PLD4 ELISA Kit成纤维细胞生长因子受体1原癌基因伴侣蛋白抗体磷脂酶D4(PLD4)ELISA试剂盒
PLD3 ELISA Kit钙粘蛋白家族成员7抗体磷脂酶D3(PLD3)ELISA试剂盒
PLD ELISA KitⅢ型纤维连接蛋白域蛋白2/5抗体磷脂酶D(PLD)ELISA试剂盒
PLB ELISA Kit细丝蛋白A抗体磷脂酶B(PLB)ELISA试剂盒
PLA2R1 ELISA Kit磷酸化细丝蛋白A抗体磷脂酶A2受体1(PLA2R1)ELISA试剂盒
PLAA ELISA Kit磷酸化细丝蛋白A抗体磷脂酶A2激活蛋白(PLAA)ELISA试剂盒
PLA1 ELISA KitDNA损伤修复基因XRCC9抗体磷脂酶A1(PLA1)ELISA试剂盒
PHPT1 ELISA Kit磷酸化细丝蛋白A抗体磷酸组氨酸性磷酸酶1(PHPT1)ELISA试剂盒
Php ELISA Kit磷酸化磷酸神经膜抗体磷酸组氨酸(Php)ELISA试剂盒
PCK1 ELISA Kit磷酸化碱性成纤维细胞生长因子受体1抗体磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶1(PCK1)ELISA试剂盒
PSAT1 ELISA Kit磷酸化磷酸神经膜抗体磷酸丝氨酸转氨酶1(PSAT1)ELISA试剂盒
PSPH ELISA Kit叉头蛋白N1抗体磷酸丝氨酸性磷酸酶(PSPH)ELISA试剂盒
PLM ELISA Kit磷酸化DNA损伤修复基因XRCC9抗体磷酸神经膜蛋白(PLM)ELISA试剂盒
PGD ELISA KitⅢ型纤维连接蛋白域蛋白1抗体磷酸葡萄糖脱氢酶(PGD)ELISA试剂盒
PTEN ELISA KitⅢ型纤维连接蛋白域蛋白8抗体磷酸酶张力蛋白同源物(PTEN)ELISA试剂盒
PMVK ELISA KitⅢ型纤维连接蛋白域蛋白3B抗体磷酸甲羟戊酸激酶(PMVK)ELISA试剂盒
PIK3Cδ ELISA Kit粘液样脂肪肉瘤蛋白FUS1抗体磷酸肌醇-3-激酶催化亚基δ肽(PIK3Cδ)ELISA试剂盒
PIK3Cβ ELISA Kit细胞生长抑制蛋白26/前列腺特异性膜抗原抗体样蛋白抗体磷酸肌醇-3-激酶催化亚基β肽(PIK3Cβ)ELISA试剂盒
PI3K2α ELISA Kit肾母细胞瘤基因X染色体蛋白抗体磷酸肌醇-3-激酶2α肽(PI3K2α)ELISA试剂盒
PFAS ELISA Kit磷酸化Fas死亡结构域相关蛋白抗体磷酸核糖甲酰甘氨酸脒合酶(PFAS)ELISA试剂盒
GART ELISA Kit肾母细胞瘤X蛋白抗体磷酸核糖甘氨酰胺转甲酰基酶(GART)ELISA试剂盒
PAICS ELISA Kitα-L岩藻糖苷酶抗体磷酸核糖胺咪唑羧化酶(PAICS)ELISA试剂盒
PGK2 ELISA KitFbxW2蛋白抗体磷酸甘油酸酯激酶2(PGK2)ELISA试剂盒
PGK1 ELISA KitFbxw7蛋白抗体磷酸甘油酸酯激酶1(PGK1)ELISA试剂盒
PHGDH ELISA KitFBXW8蛋白抗体磷酸甘油酸脱氢酶(PHGDH)ELISA试剂盒
PGAM5 ELISA Kit人纤维蛋白原单克隆抗体磷酸甘油酸变位酶5(PGAM5)ELISA试剂盒
PGAM4 ELISA KitFANCD2抗体磷酸甘油酸变位酶4(PGAM4)ELISA试剂盒
PGAM1 ELISA Kit磷酸化FANCD2抗体磷酸甘油酸变位酶1(PGAM1)ELISA试剂盒
PMM2 ELISA Kit细胞外基质蛋白FREM2抗体磷酸甘露糖酶1(PMM2)ELISA试剂盒
PMM1 ELISA Kit面肩肱型肌营养不良症相关蛋白FRG1抗体磷酸甘露糖酶1(PMM1)ELISA试剂盒
PPCDC ELISA KitCD350抗体磷酸泛酰半胱氨酸脱羧酶(PPCDC)ELISA试剂盒
PPCS ELISA KitCD344抗体磷酸泛酰半胱氨酸合成酶(PPCS)ELISA试剂盒
PDE9A ELISA Kit卷曲蛋白6抗体磷酸二酯酶9A(PDE9A)ELISA试剂盒
PDE8B ELISA Kit卷曲蛋白8抗体磷酸二酯酶8B(PDE8B)ELISA试剂盒
PDE8A ELISA KitFSD1蛋白抗体磷酸二酯酶8A(PDE8A)ELISA试剂盒
PDE7B ELISA Kit卷曲螺旋结构域蛋白10抗体磷酸二酯酶7B(PDE7B)ELISA试剂盒
PDE7A ELISA KitPrader-Willi综合征相关蛋白抗体磷酸二酯酶7A(PDE7A)ELISA试剂盒
PDE4D ELISA KitAKT相互作用蛋白蛋白抗体磷酸二酯酶4D(PDE4D)ELISA试剂盒
PDE12 ELISA KitDNA解旋酶V抗体磷酸二酯酶12(PDE12)ELISA试剂盒
PDE11A ELISA Kit远端上游元件结合蛋白3抗体磷酸二酯酶11A(PDE11A)ELISA试剂盒
PDE10A ELISA Kit岩藻糖变旋酶抗体磷酸二酯酶10A(PDE10A)ELISA试剂盒
Lptn ELISA KitX三体综合征相关蛋白FUNDC1抗体淋巴细胞趋化因子(Lptn)ELISA试剂盒
LY96 ELISA Kit弗林蛋白酶抗体淋巴细胞抗原96(LY96)ELISA试剂盒
LY9 ELISA Kit富含丝氨酸/精氨酸重复结构蛋白抗体淋巴细胞抗原9(LY9)ELISA试剂盒
LY86 ELISA Kit岩藻糖基转移酶6抗体淋巴细胞抗原86(LY86)ELISA试剂盒
LY75 ELISA Kit岩藻糖基转移酶7抗体淋巴细胞抗原75(LY75)ELISA试剂盒
LFA3 ELISA Kit眼睛和头发颜色相关蛋白FUZ抗体淋巴细胞功能关联抗原3(LFA3)ELISA试剂盒
LFA2 ELISA Kit滤泡型转运蛋白1/II型慢性淋巴性白血病抗体淋巴细胞功能关联抗原2(LFA2)ELISA试剂盒
LFA1α ELISA Kit磷酸化碱性成纤维细胞生长因子受体1抗体淋巴细胞功能关联抗原1α(LFA1α)ELISA试剂盒
LCP2 ELISA KitFAM65B蛋白抗体淋巴细胞胞浆蛋白2(LCP2)ELISA试剂盒
LCP1 ELISA Kit胞外分泌型丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶FAM20C抗体淋巴细胞胞浆蛋白1(LCP1)ELISA试剂盒
LTβR ELISA Kit凝血因子8/第八凝血因子/第八因子相关抗原抗体抗体淋巴毒素β受体(LTβR)ELISA试剂盒
LTβ ELISA Kit纤维母细胞生长因子受体底物3抗体淋巴毒素β(LTβ)ELISA试剂盒
LNPEP ELISA Kit纤维连接蛋白抗体亮氨酰/半胱氨酰氨肽酶(LNPEP)ELISA试剂盒
LRRK2 ELISA KitFCHO1蛋白抗体亮氨酸丰富重复激酶2(LRRK2)ELISA试剂盒
LGI3 ELISA Kit磷酸化脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白亮氨酸丰富重复LGI家族成员3(LGI3)ELISA试剂盒
LRRFIP1 ELISA Kit脂肪酸结合蛋白12抗体亮氨酸丰富重复FLII相互作用蛋白1(LRRFIP1)ELISA试剂盒
LRG1 ELISA Kit四连接同源蛋白FJX1抗体亮氨酸丰富α2-糖蛋白1(LRG1)ELISA试剂盒

反应五要素:

参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是末及倒数第二个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以低引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。