马蛔虫PCR检测试剂盒说明书 返回列表页

组成及试剂配制:
1、马蛔虫PCR检测试剂盒说明书酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。

样本采集、存放及运输：
1、样本采集：各类型样本按照常规方法采集；
2、存放：样本在2~8℃条件下保存应不超过72h，-70℃以下可长期保存，但应避免反复冻融（多冻融3次）；
3、运输：采用泡沫箱加冰密封进行运输。
【标本要求】
人体鼻腔或咽部分泌物:用无菌捻拭子拭取鼻腔或咽部分泌物，将分泌物或咽拭子置入无菌玻璃管（含0.4ml灭菌生理盐水），用无菌棉球将试管塞紧后，密闭送检。标本可立即用于检测，也可保存于-20℃待测。
【检验方法】
1.标本、对照品的核酸裂解处理
用商品化（取得医疗器械许可证）的RNA提取试剂盒处理标本，具体操作参见该试剂盒说明书。
或用Trizol法提取，方法如下：取100?l样品置于1.5ml 离心管中，加入300?l裂解液（Trizol），再加入100， 混匀器上振荡混匀5sec或颠倒混匀15次； 13000rpm离心15min， 吸取上层液体，加入等体积异丙醇，颠倒混匀室温静置10min， 13000rpm离心10min，轻轻倒去上清；加入700?l 75%乙醇，颠倒洗涤，13000rpm离心5min，轻轻倒去上清，倒置于吸水纸上，弃尽液体或4000rpm离心5sec，将管壁上的残余液体甩到管底部，用微量加样器尽量吸干液体，加入20?l DEPC-H2O溶解RNA。
2.试剂配制
取n×19?l H7N9核酸荧光PCR检测混合液与n×1?l RT-PCR酶（n为反应管数）,振荡混匀数秒, 3000rpm离心数秒。
3.加样取上述混合液20?l置于PCR管中，然后将样品核酸提取液、DEPC-H2O、阳性对照品各5?l分别加入PCR管中，盖好管盖，立即进行PCR扩增反应。
4. PCR扩增反应管置于定量荧光PCR仪上，推荐循环参数设置：
45℃×10min; 95℃×15min;循环一次，再按95℃×15sec→60℃×60sec，循环45次;单点荧光检测在60℃，反应体系为25?l。
荧光通道检测选择：选用FAM通道。

剂盒
pMHC ELISA Kit载脂蛋白M抗体肽-主要组织相容性复合体复合物(pMHC)ELISA试剂盒
PPIL1 ELISA Kit载脂蛋白O抗体肽酰脯氨酰异构酶(亲环蛋白)样1(PPIL1)ELISA试剂盒
PGRP-L ELISA Kitβ淀粉样蛋白前体蛋白结合蛋白1抗体肽聚糖识别蛋白L(PGRP-L)ELISA试剂盒
PG ELISA Kit共济失调性眼球运动功能丧失相关蛋白AOA1抗体肽聚糖(PG)ELISA试剂盒
PPI ELISA Kit三号染色体开放阅读框抗体肽基脯氨酰顺反异构酶(PPI)ELISA试剂盒
Fetuin A ELISA Kit腺嘌呤磷酸核糖转移酶抗体胎球蛋白A(Fetuin A)ELISA试剂盒
FETU-A ELISA Kit磷酸化水通道蛋白2抗体胎球蛋白A(FETU-A)ELISA试剂盒
PLGF ELISA KitADP核糖基化因子1抗体胎盘生长因子(PLGF)ELISA试剂盒
PL ELISA Kit乙型肝炎病毒X相关蛋白2抗体胎盘泌乳素(PL)ELISA试剂盒
PLAP ELISA KitADP核糖基化因子5抗体胎盘碱性磷酸酶(PLAP)ELISA试剂盒
HPRI ELISA KitADP核糖基化因子结合蛋白抗体胎盘核糖核酸抑止剂(HPRI)ELISA试剂盒
PP14 ELISA KitADP核糖基化因子GTP酶激活蛋白1抗体胎盘蛋白14(PP14)ELISA试剂盒
PP13 ELISA KitADP核糖基化因子相关蛋白1胎盘蛋白13(PP13)ELISA试剂盒
PP ELISA Kit琥珀酸裂解酶抗体胎盘蛋白(PP)ELISA试剂盒
HPL ELISA Kit精氨酰tRNA合成酶抗体胎盘催乳素(HPL)ELISA试剂盒
HBF ELISA Kit真核翻译起始因子2C3抗体胎儿血红蛋白(HBF)ELISA试剂盒
fFN ELISA Kit真核翻译起始因子2C4抗体胎儿纤连蛋白(fFN)ELISA试剂盒
FK506 ELISA KitRho GTP酶激活蛋白15抗体他克莫司(FK506)ELISA试剂盒
DES ELISA Kit抑癌基因结合蛋白ARID1B抗体锁链素(DES)ELISA试剂盒
CML ELISA KitE3连接酶蛋白ARIH2抗体羧甲基赖氨酸(CML)ELISA试剂盒
ucMGP ELISA KitADP核糖基化样因子1抗体羧化基质谷氨酸蛋白(ucMGP)ELISA试剂盒
ucOC ELISA KitADP核糖基化因子样蛋白4抗体羧化不全骨钙素(ucOC)ELISA试剂盒
MYD88 ELISA Kit肌动蛋白相关蛋白2/3抗体髓样分化因子初次应答基因88(MYD88)ELISA试剂盒
MyD88 ELISA Kit肌动蛋白相关蛋白2/3亚型2抗体髓样分化因子88(MyD88)ELISA试剂盒
MD-2 ELISA Kit肌动蛋白相关蛋白2/3亚型4抗体髓样分化蛋白2(MD-2)ELISA试剂盒
MNDA ELISA Kit芳香基硫酸酯酶家族蛋白1抗体髓性细胞核分化抗原(MNDA)ELISA试剂盒
TREM-1 ELISA Kit肿瘤抑制相关蛋白PHEMX抗体髓系细胞触发受体-1(TREM-1)ELISA试剂盒
MAG Ab ELISA Kit精神分裂症与犰狳重复基因抗体髓鞘相关糖蛋白抗体(MAG Ab)ELISA试剂盒
MAG ELISA Kit乙醛脱氢酶1型抗体髓鞘相关糖蛋白(MAG)ELISA试剂盒
MBP ELISA Kit磷酸化乙酰辅酶A羧化酶抗体髓鞘碱性蛋白抗体(MBP)ELISA试剂盒
MBP antibody ELISA Kit磷酸化乙酰辅酶A羧化酶抗体髓鞘碱性蛋白抗体(MBP antibody)ELISA试剂盒
MPZ ELISA Kit磷酸化腺苷三磷酸结合盒转运体A1抗体髓鞘蛋白P0(MPZ)ELISA试剂盒
MBP ELISA Kit磷酸化铁调节蛋白1抗体髓磷脂碱性蛋白(MBP)ELISA试剂盒
PMP2 ELISA Kit磷酸化铁调节蛋白1抗体髓磷脂P2蛋白(PMP2)ELISA试剂盒
MPO-ANCA IgG ELISA Kit磷酸化乙酰辅酶A羧化酶抗体髓过氧化物酶特异性抗中性粒细胞胞质抗体IgG(MPO-ANCA IgG)ELISA试剂盒
MPO ELISA Kit膜粘连蛋白6抗体髓过氧化物酶(MPO)ELISA试剂盒
AIF ELISA Kit锚蛋白重复结构域蛋白42抗体酸性铁蛋白(AIF)ELISA试剂盒
ASM ELISA Kit胞环蛋白肌动蛋白结合蛋白抗体酸性神经鞘磷脂酶(ASM)ELISA试剂盒
ACP ELISA Kit腺病毒5结合蛋白BS69抗体酸性磷酸酶(ACP)ELISA试剂盒
ANP32E ELISA Kit载脂蛋白A1抗体酸性富亮氨酸核磷蛋白32家族成员E(ANP32E)ELISA试剂盒
aFGF-1 ELISA Kit自噬相关蛋白16A抗体酸性成纤维细胞生长因子1(aFGF-1)ELISA试剂盒
aFGF/FGF-1 ELISA Kit磷酸化自噬相关蛋白4D抗体酸性成纤维细胞生长因子(aFGF/FGF-1)ELISA试剂盒
aFGF ELISA Kit磷酸化自噬相关蛋白4C抗体酸性成纤维细胞生长因子(aFGF)ELISA试剂盒
RLN ELISA Kit磷酸化自噬相关蛋白7抗体松弛肽/松弛素(RLN)ELISA试剂盒
RLN ELISA Kit磷酸化自噬相关蛋白16A抗体松弛素(RLN)ELISA试剂盒
BH4 ELISA Kit磷酸化自噬相关蛋白9A抗体四氢生物蝶呤(BH4)ELISA试剂盒
CLEC3B ELISA Kit磷酸化自噬相关蛋白4D抗体四连接素(CLEC3B)ELISA试剂盒
DAP/DAP1 ELISA Kit磷酸化自噬相关蛋白4D抗体死亡相关蛋白1(DAP/DAP1)ELISA试剂盒
FHA ELISA Kit磷酸化肿瘤血管内皮标志物8抗体丝状血球凝集素(FHA)ELISA试剂盒
MAPK ELISA Kit磷酸化自噬相关蛋白4A抗体丝裂原激活的蛋白激酶/MAP激酶(MAPK)ELISA试剂盒
MKK6 ELISA Kit磷酸化自噬相关蛋白4C抗体丝裂

反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是末及倒数第二个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以低引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。