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ATCC细胞的复苏操作步骤

时间:2017/4/11阅读:229
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1. 当ATCC细胞传代次数过多(超过50代),细胞状态变差时或细胞出现污染事故时,需要丢弃并对开始冻存的细胞进行复苏。
 
2. 打开水浴锅,设置温度为40℃。
 
3. 查看细胞库记录,根据记录从液氮灌中取出冻存的ATCC细胞(需戴上棉手套,防止被冻伤),迅速丢入水浴锅中并快速晃动,在1~2 min内使细胞溶液*溶解。
 
4. 将1ml细胞溶液加入9 ml*培养基中并混匀后转入10cm培养皿。
 
5. 放回37℃、3%CO2和95%相对湿度的培养箱中培养。
 
6. 第二天观察ATCC细胞存活率。倒掉旧的培养基,加入10ml新鲜培养基。

 

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