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如何培养人正常组织来源细胞,养的更漂亮

时间:2018/4/10阅读:194
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1.不同的人正常组织来源细胞,喜欢的环境是不一样的。 这个不仅仅是说培养基的不同,还有就是细胞生长的空间密度问题。 有一些细胞是数量多一点比较好生长,生长状态也比较好。这种一般是属于生长速度慢的细胞。譬如内皮细胞。而有一些是细胞是数量少一点细胞状态会生长的比较好,譬如巨噬细胞和某些肿瘤细胞。尤其是巨噬细胞,生长速度非常得快,贴壁速度很快,所以传代时就应该留很少量的细胞,这样细胞状态会比较好。并且巨噬细胞比较喜欢扎堆生长,而堆与堆之间是有空间的。如果长成相连在一起的一满片的时候,细胞形态基本上就会差了,老化的会比较多,对后期实验结果是不好的。所以在养细胞的时候应该摸索该细胞喜欢的生长空间密度问题。
2.对于有些人总是会遇到养的细胞形态怎么都不好的问题。这个其实是有一个方法可以改善的。对于贴壁细胞,如果细胞形态不好,(或者细胞形态不清晰,表面似有异物等)可以在传代的时候进行如下操作: 首先,倒掉旧的培养基,加入3ml新的培养基(有无血清的都可)洗涤一次,用滴管吸走,然后再加入3ml的培养基,进行预吹打,控制吹打力度,轻轻地大概沿着瓶底过一遍,然后吸走。这时侯再开始正式的消化、吹打。(巨噬细胞我们只吹打,不消化的) 其次,把吹打下来的细胞悬液加入到新的培养瓶内,培养瓶事先加入培养基,放入培养箱内培养,按时间点观察细胞贴壁情况。10分钟观察一次,20分钟,30分钟观察一次。选择一个时间点,已经有部分细胞贴壁的情况下,重新置于洁净台,底面朝上迅速倒出其中的培养基,加入3ml新培养基再轻轻洗一次。然后加入*培养基培养。后续观察细胞生长情况以及形态。我称之为“二传”。呵呵。 如果一次效果还不理想,可重复多次。直到找到细胞形态。其中要注意,结合细胞喜欢的生长情况。喜欢多一点数量长得好的细胞你就等贴壁细胞比较多点的时候再传。
3.关于培养瓶内加入培养基的量的问题。 这个是要靠自己去摸索你所养的细胞的。并不是小的玻璃方瓶12ml,大方瓶14ml的。有些人正常组织来源细胞反而是培养基少一点相反细胞形态会长得比较好。(可能也是竞争很大,有优胜劣汰吧。呵呵。)对于生长速度快的细胞,易生长的细胞加少一点培养基细胞形态会更好。但是要注意换液掌握。
10605-02-4    Palmatine hydrochloride    20mg/支    盐酸巴马汀
520-26-3    Hesperidin    20mg/支    橙皮苷
13241-33-3    Neohesperidin    20mg/支    新橙皮苷
此产品为柴胡皂苷B1和B2的混合体    Saikosaponin B    20mg/支    柴胡皂苷B
520-33-2    Hesperitin    20mg/支    橙皮素
1405-86-3    Glycyrrhizic acid    20mg/支    甘草酸
1449-05-4;471-53-4‏    Glycyrrhetinic acid    20mg/支    甘草次酸
53956-04-0    Glycyrrhizic acid ammonium salt    20mg/支    甘草酸单铵盐
551-15-5    Liquiritin    20mg/支    甘草苷
5041-81-6    Isoliquiritin    10mg/支    异甘草苷
人正常组织来源细胞

 

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