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适用领域 | 科研 |
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Cas9稳定表达的人胃癌细胞;MKN-45-Cas9-526培养冻存过程:
将贴壁细胞消化后离心收集,悬浮细胞直接离心收集,以*培养基或胎牛血清重悬细胞至终浓度约106/ml,加入10%的DMSO。以每管1~2ml分装至冻存管中,用绝热材料包裹置-70摄氏度冰箱冷冻过夜,次日保存到液氮中。
公司出售细胞培养、人细胞培养、小鼠细胞培养、大鼠细胞培养等动物细胞,几乎能满足多数客户的实验要求。公司是广大顾客细胞购买理想的单位之一。细胞详细参数如下:
1) 用途:提供用于科研的稳定细胞系
2) 包装规格:25cm*cm(>1000000个细胞)
3) 保存条件:4℃保存一年;-20℃长期保存
4) 细胞生长:贴壁生长
细胞名称 Cas9稳定表达的人胃癌细胞;MKN-45-Cas9-526培养
形态特性 圆形
生长特性 贴壁生长
特征特性 该细胞是采用慢病毒感染的方式使MKN45细胞稳定表达Cas9-Flag-Neo,经400ug/mlG418筛选得到的单克隆,经Western Blotting验证该克隆可以表达Cas9蛋白,可直接用Crispr技术编辑基因组DNA。
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 20%FBS;400ug/ml G418
传代方法 建议初始浓度2.0×105 cells/ml,1:3传代;4~5天1次。
传代情况 C3
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法(-)
STR Amelogenin:x,x;CSF1PO:12,12;D12S391:26,26;D13S317:8,11;D16S539:10,10;D18S51:16,16;D19S433:14,16.2;D21S11:31,31;D2S1338:18,18;D3S1358:15,16;D5S818:10,11;D6S1043:14,14;D7S820:10,11;D8S1179:13,17;FGA:19,24;Penta E:10,10;TH01:7,7;TPOX:8,8;vWA:19,19;
同工酶
染色体
使用权限 A类
Cas9稳定表达的人胃癌细胞;MKN-45-Cas9-526培养细胞株培养的具体无菌技术要点:
1. 实验开始前,无菌室和无菌操作台需要紫外光照射30到60分钟*灭菌,用70%擦拭无菌操作台面,并且打开无菌操作台风扇运行10分钟之后,才可以进行实验操作。每次操作只能处理一株细胞株,即使培养基*相同也不可共用培养基,以避免细胞间污染或失误混淆。实验完成后,请将实验物品拿出工作台,用70%再次擦拭无菌操作台面。操作间隔应该让无菌操作台运转10分钟到15分钟后,才能进行下一个细胞株的操作。
2. 无菌操作工作的区域应保持清洁和宽敞,必要物品(试管架、吸管、吸取器或吸管盒等)可以暂时放置,其它实验用品使用完毕后应移出,有利于空气流通。实验用品需70%擦拭后方可带入无菌操作台内。实验操作过程应在台面的中央无菌区域内完成,请勿在边缘非无菌区域进行操作。
3. 小心取用无菌实验物品,避免细菌污染。请勿触碰吸管尖头部和容器瓶口处,也不要在打开的容器正上方进行操作。容器打开后,请用手夹住瓶盖并轻握瓶身,倾斜大约45°角取用,尽量不要将瓶盖口朝上放置于桌面。
4. 工作人员应当首先注意自身安全,必须穿戴齐实验衣和实验手套后才能进行实验。对于病毒感染或是来自人类的细胞株应当特别小心操作,并选择适当等级的无菌操作台进行(至少是Class II)。操作过程中,应避免引起aerosol的产生,小心有毒性药品,例如DMSO和TPA等,并避免针头的伤害等等。
5. 定期检测下列项目:
5.1. CO2钢瓶的CO2压力
5.2. CO2培养箱的CO2浓度、温度、和水盘是否有污染(水盘的水需用无菌水,每周定时更换)。
5.3. 无菌操作台内的airflow压力,定期更换紫外线灯管和HEPA过滤膜,预滤网(300小时/预滤网,3000小时/HEPA)。
6. 水槽内可添加消毒剂(Zephrin 1:750),需定期更换水槽中的水。
pET-24a(+)(pET24a)(60908-2789)y 原钙粘蛋白γA8抗体
pET-24b(+)(pET24b)(60908-2788) 原钙粘蛋白γA9抗体
pET-24c(+)(pET24c)(60908-2827) 原钙粘蛋白γA11抗体
pET-24d(+)(pET24d) 原钙粘蛋白γA12抗体
pET-25b(+)(pET25b)(60908-2790) 原钙粘蛋白β12抗体
Cas9稳定表达的人胃癌细胞;MKN-45-Cas9-526培养pET-26b(+)(pET26b)(60908-2791) 原钙粘蛋白β3抗体
pET-27b(+)(pET27b)(60908-2792) 原钙粘蛋白γB1抗体
pET-28a(+)(pET28a) 原钙粘蛋白γB2抗体
pET-28b(+)(pET28b)(60908-2819)y 原钙粘蛋白γB4抗体
pET-28c(+)(pET28c) 原钙粘蛋白γB6抗体
pET-29a(+)(pET29a)(60908-2794)y 原钙粘蛋白γC3抗体
pET-29b(+)(pET29b) 原钙粘蛋白γC4抗体
pET-29c(+)(pET29c) 磷酸蛋白聚糖PTPRZ抗体
pET-2a(pET2a) 神经特异蛋白酪氨酸磷酸酶N5抗体
pET-30a(+)(pET30a)(60908-2797)y 足细胞表达蛋白/转录因子21抗体
pET-30b(+)(pET30b) 孕激素受体抗体
pET-30c(+)(pET30c)(60908-2832) 神经细胞突触蛋白PCLO抗体
pET-30Ek/LIC(pET30Ek/LIC)(60908-2795) 早老素γ分泌酶2抗体
pET-30Xa/LIC(pET30Xa/LIC)(60908-2796) 泛酸激酶1抗体
phospho-Fos B 蚕微粒子病PCR检测试剂盒
phospho-FOXL2 仓鼠核因子kB受体活化因子配基(RANKL)ELISA Kit
Phospho-FoxO1 仓鼠基质金属蛋白酶9/明胶酶B(MMP-9/Gelatinase B) ELISA Kit
Phospho-FoxO1 仓鼠甲状腺结合球蛋白(TBG)ELISA Kit
Phospho-FoxO1 仓鼠组织蛋白酶K(cath-K)ELISA Kit
Phospho-FOXO1 + FOXO3 + FOXO4 产肠毒素性大肠杆菌PCR检测试剂盒
phospho-FOXO1A 产毒副溶血弧菌PCR试剂盒
Phospho-FoxO3a 产气荚膜梭菌C类磷脂酶基因(283bp)常规PCR检测试剂盒
Phospho-FoxO3a 产气荚膜梭菌PCR检测试剂盒
Phospho-FoxO3a 肠产毒性E.coli核酸检测试剂盒
phospho-FOXO4 肠道病毒EV70 PCR检测试剂盒
phospho-FOXO4 肠道病毒EV71 PCR检测试剂盒
phospho-FOXO4 肠道病毒EV71/柯萨奇病毒A16型2联PCR检测试剂盒
Phospho-FoxO4 肠道病毒PCR检测试剂盒
Phospho-FRA1 肠道病毒通用型/EV71/柯萨奇病毒A16型3联PCR检测试剂盒
Phospho-FRAP1 肠道腺病毒40型PCR检测试剂盒
phospho-FRS2 肠道腺病毒41型PCR检测试剂盒
phospho-FSCN1 肠侵袭性E.coli核酸检测试剂盒
phospho-FXYD1 肠致病性E.coli核酸检测试剂盒
phospho-FXYD1 常见微生物培养基
phospho-G3BP1 常用PCR引物1 染色剂
Cas9稳定表达的人胃癌细胞;MKN-45-Cas9-526培养售后:收到细胞后7天,如发现细胞有质量问题(如污染,死亡,快递运输等原因)时,应出具书面质量问题报告并及时传真或致销售人员,我们将尽快为您解决。
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