马动脉炎病毒染料法荧光定量PCR试剂盒 返回列表页

服务流程：

公司产品仅用于科研接受订单及样品——RNA提取——RNA质量检测——样品cDNA合成——定量试验——数据分析——结果交付——售后服务。

PCR反应鉴定——PCR反应条件:

组成及试剂配制:

1、酶标板：一块（96孔）

2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。

3、 样品稀释液：1×20ml。

4、 检测稀释液A：1×10ml。

5、 检测稀释液B：1×10ml。

PCR反应的特异性决定因素为：

①引物与模板DNA特异正确的结合；

②碱基配对原则；

③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性；

④靶基因的特异性与保守性。

其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性，使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行，结合的特异性大大增加，被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区，其特异性程度就更高。

(2) 灵敏度高

PCR产物的生成量是以指数方式增加的，能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞；在病毒的检测中，PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位)；在细菌学中zui小检出率为3个细菌。

(3) 简便、快速

PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶，一次性地将反应液加好后，即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应，一般在2～4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析，不一定要用同位素，无放射性污染、易推广。

(4) 对标本的纯度要求低

不需要分离病毒或细菌及培养细胞，DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。

猴肌浆球蛋白(MYO)5ˊ-二磷酸腺苷钡盐白三烯B4受体2抗体

猴葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)二磷酸腺苷单盐白相关免疫球蛋白样受体2抗体

猴巨噬来源的趋化因子(MDC/CCL22)肌苷-5'-二磷酸二钠盐相似肿瘤抑制因HUGL抗体

猴胰腺再生蛋白3α(REG3α)腺苷-5’-二磷酸一钠白介素1β抗体

猴转化生长因子β诱导蛋白(TGFβI)D-纤维二糖β-乳球蛋白抗体

猴脑环指蛋白(BFP)胞苷-5'-二磷酸二钠盐(CDP.Na2)脂质磷酸磷酸酶相关蛋白1/可塑性相关因3抗体

猴不对称二精氨酸(ADMA) 胞苷-5'-单磷酸二钠盐(CMP.Na2)神经突触粘附样分子1抗体

猴白介素9(IL-9)TFA-aa-U富含亮氨酸重复家庭蛋白1抗体

猴多巴色素异构酶(DT) TFA-aa-dU富含亮氨酸重复家庭蛋白4抗体

猴蕈碱型酰胆碱受体亚型M1(M-AChRM1)5-尿苷瘦素受体抗体（长）

猴αL艾杜糖酸酶(IDUα) 5--2'-脱氧尿苷(苷)白血病抑制因子抗体

猴外质金属蛋白酶诱导因子(EMMPRIN/CD147)5--2'-脱氧胞苷Nogo受体反应蛋白抗体

猴β内啡肽受体(β-EPR)2'-氧尿苷凋亡抑制蛋白抗体

猴谷胱甘肽S转移酶μ2(GSTμ2/GSTm2)2'-氧胞苷层粘连蛋白抗体

猴神经调节蛋白2(NRG-2)N2-异丁酰鸟苷一水合物Lpin1 抗体

猴单氧化酶A(MAOA) N4-酰胞苷Lpin1 抗体
马动脉炎病毒染料法荧光定量PCR试剂盒Cav-1/FITC  荧光素标记抗小凹蛋白抗体IgGDL-叔亮氨酸 98%

Caveolin-3/FITC  荧光素标记质膜微囊蛋白-3抗体IgGL-亮氨酸酯盐酸盐 98%

CACH2/CaV1.2/FITC   荧光素标记L型钙通道蛋白抗体IgGDL-赖氨酸 99%

CACNA1G/Cav3.1 /FITC   荧光素标记电压依赖性钙通道Cav3.1抗体IgGD-亮氨酸 99%

CBFA1/RUNX2/FITC  荧光素标记成骨特异性转录因子抗体IgGD-亮氨酸酯盐酸盐 98%

CBL2 /FITC  荧光素标记兔抗人、大、小鼠原癌蛋白CBL2抗体IgGD-叔亮氨酸盐酸盐 BR

phospho-CBL2(Tyr731) /FITC  荧光素标记磷酸化原癌蛋白CBL2抗体IgGDL-赖氨酸盐酸盐 BR

phospho-CBL2(Tyr774) /FITC  荧光素标记兔抗人、大、小鼠磷酸化原癌蛋白CBL2抗体IgGN--L-脯氨酸,一水 98%
反应五要素：

参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：

①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。

②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。

③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC最好随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。

⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数第二个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。

⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列最好有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。

⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。

引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。