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操作步骤:
1.编号:将样品对应微孔按序编号,每板应设阴性对照 2 孔、阳性对照 2 孔、空白对照 1孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)
2.加样:分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照 50μl。然后在待测样品孔先 加样品稀释液 40μl,然后再加待测样品 10μl。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,
3.温育:用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。
4.配液:将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用。
5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后弃去,如此 重复 5 次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂 50μl,空白孔除外。
7.温育:操作同 3。
8.洗涤:操作同 5。
9.显色:每孔先加入显色剂 A50μl,再加入显色剂 B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色10 分钟.
10.终止:每孔加终止液 50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11.测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。 测定应在加终止 液后 15 分钟以内进行。
服务:
我们可以根据您的应用需要,比如在检测范围、种属以及灵敏度等方面有特殊要求,而量身定制检测试剂盒,有效控制检测试剂成本。并可提供免费代测。
产品名称 | 人酸性神经鞘磷脂酶(ASM)ELISA检测试剂盒 |
英文名称 | Human acid sphingomyelinase (ASM) ELISA Kit |
货号 | YS-H12155 |
试剂配制
1、酶联板(Assay plate ):一块(96孔或者48孔)。
2、标准品(Standard):2瓶(冻干品)。
3、样品稀释液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素标记抗体稀释液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素标记抗体(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根过氧化物酶标记亲和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、浓洗涤液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10、终止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
样本实验前准备:
ELISA试剂盒液体样本:包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。
(1)血清
室温血液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(2)血浆:
应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(3)尿液:
用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。
(4)细胞培养上清:
检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。
(5)培养细胞
检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(6)组织标本
切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
酸敏感钾离子通道蛋白3抗体 规格: 0.1ml 英文名称:KCNK3
磷酸化淋巴细胞特异性蛋白酪氨酸激酶抗体 规格: 0.1ml 英文名称:Phospho-Lck (Tyr505)
神经突触粘附样分子1抗体 规格: 0.2ml 英文名称:LRFN1
皮屑样蛋白2抗体 规格: 0.2ml 英文名称:LEPREL2
乳铁蛋白抗体 规格: 0.1ml 英文名称:Lactoferrin
甲硝唑单克隆抗体 规格: 0.1ml 英文名称:Metronidazole(1C2)
促黑细胞激素α抗体 规格: 0.1ml 英文名称:alpha MSH
同源结构蛋白1抗体 规格: 0.2ml 英文名称:MIXL1
胃动素受体抗体 规格: 0.1ml 英文名称:MTLR
乳珠蛋白2抗体 规格: 0.1ml 英文名称:Mammaglobin B
原癌基因M-ras抗体 规格: 0.1ml 英文名称:MRas
磷酸化丝裂原活化蛋白激酶激酶8抗体 规格: 0.1ml 英文名称:Phospho-MAP3K8 (Thr290)
减数分裂核分裂蛋白1抗体 规格: 0.2ml 英文名称:MND1
胃粘液素抗体 规格: 0.1ml 英文名称:Mucin 5AC
人酸性神经鞘磷脂酶(ASM)ELISA检测试剂盒大鼠N-乙酰β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAGase)ELISA试剂盒 英文名: NAGase ELISA Kit
大鼠N--D-天氡氨酸离子能谷氨酸受体1(GRIN1)ELISA试剂盒 英文名: GRIN1 ELISA Kit
大鼠N-myc下游调节基因2(NDRG2)ELISA试剂盒 英文名: NDRG2 ELISA Kit
大鼠Mg2+/Mn2+依赖性蛋白磷酸酶1A(PPM1A)ELISA试剂盒 英文名: PPM1A ELISA Kit
大鼠M2-型酸激酶(PKM2)ELISA试剂盒 英文名: PKM2 ELISA Kit
大鼠L1-细胞粘附分子(L1CAM)ELISA试剂盒 英文名: L1CAM ELISA Kit
大鼠Kruppel样因子4(KLF4)ELISA试剂盒 英文名: KLF4 ELISA Kit
大鼠Kruppel样因子2(KLF2)ELISA试剂盒 英文名: KLF2 ELISA Kit
大鼠Klotho蛋白(KL)ELISA试剂盒 英文名: KL ELISA Kit
大鼠Ki-67蛋白(Ki67P)ELISA试剂盒 英文名: Ki67P ELISA Kit
大鼠Janus激酶3(JAK3)ELISA试剂盒 英文名: JAK3 ELISA Kit
大鼠Janus激酶2(JAK2)ELISA试剂盒 英文名: JAK2 ELISA Kit
大鼠GATA结合蛋白2(GATA2)ELISA试剂盒 英文名: GATA2 ELISA Kit
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