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肿瘤细胞的培养方法

时间:2017/5/25阅读:326
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肿瘤细胞是血液、淋巴和所有哺乳动物组织类型中所见的吞噬细胞。肿瘤细胞是造血系统中可塑性zui强的一种细胞,所有组织中都有这种细胞,并且其也具有*的功能多样性。它们在正常发育、体内平衡、组织修复和对病原体的免疫反应中起很多不同作用。它们的多样性意味着,几乎每一种人类疾病都涉及它们,它们也是主要治疗目标,因为它们的功能可以被加强或抑制,以改变疾病的结果。
这个细胞生长快,条件好时24h内能分裂两次至少。而且喜欢扎堆,所以2天就要传代,不是真的空间不够,而是细胞都挤在一起。所以,如果瓶子里细胞密度小,培养基2天还是很好,可是细胞却扎堆,需要传了,这样培养基就浪费了,我觉得应该保持瓶中的细胞密度在20~40%左右,分裂2~3次就传代,这时刚好培养基发黄。细胞太少就浪费培养基了。
这个细胞是肿瘤细胞,就是M0,未分化的肿瘤细胞,外观是圆形高折光,贴壁非常快,10min内能贴80%,也容易脱落,无*拍打200下或者*室温30s轻轻拍打都能下来60~80%,不过无*吹打是吹不下来的。
如果培养条件不好,它会分化,变成多边形,从高折光的小圆亮点变成灰色的一小片,变得粘附非常紧,所以我觉得应该控制消化时间和拍打力度,不要过分追求把所有细胞都弄下来,这样一来影响状态好的未分化圆形细胞活力,另一方面会把状态不好的分化细胞弄下来,不如缩短*时间到1min内,把分化过的高粘附细胞留在瓶里,正好起到对细胞分化状态的选择作用。
传代时首先无*拍打,能弄下来约50%的细胞,然后加*拍打30s,镜下观察,一般30s刚刚好,剩下未脱落的都是分化的形态不好的细胞,这种肿瘤细胞继续培养,如果要回到圆形,可以用*消化后传代。

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