当前位置:上海莼试生物技术有限公司>>技术文章>>elisa免疫检测试剂盒实验操作注意事项
1. elisa免疫检测试剂盒正式试验时,应分别以阳性对照与阴性对照控制试验条件,待检样品应作一式二份,以保证实验结果的准确性。有时本底较高,说明有非特异性反应,可采用羊血清、兔血清或BSA等封闭。
2. 在ELISA中,进行各项实验条件的选择是很重要的,其中包括:
(1) 固相载体的选择:许多物质可作为固相载体,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体,在使用前均可进行筛选:用等量抗原包被,在同一实验条件下进行反应,观察其显色反应是否均一性,据此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗体(或抗原)的选择:将抗体(或抗原)吸附在固相载体表面时,要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0~9.6之间。吸附温度,时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃18~24小时。蛋白质包被的Z适浓度需进行滴定:即用不同的蛋白质浓度(0.1、1.0和10μg/ml等)进行包被后,在其它试验条件相同时,观察阳性标本的OD值。选择OD值Z大而蛋白量Z少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1~10μg/ml。
(3) 酶标记抗体工作浓度的选择:首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定(见酶标记抗体部份)。然后再固定其它条件或采取“方阵法"(包被物、待检样品的参考品及酶标记抗体分别为不同的稀释度)在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。
(4) 酶的底物及供氢体的选择:对供氢体的选择要求是价廉、安全、有明显地显色反应,而本身无色。有些供氢体(如OPD等)有潜在的致癌作用,应注意防护。有条件者应使用不致癌、灵敏度高的供氢体,如TMB和ABTS是目前较为满意的供氢体。底物作用一段时间后,应加入强酸或强碱以终止反应。通常底物作用时间,以10-30分钟为宜。elisa免疫检测试剂盒底物使用液必须新鲜配制,尤其是H2O2在临用前加入。
人基质金属蛋白酶7(MMP-7) 规格: 96T/48T Human Matrix metalloproteinase-7—MMP-7 ELISA kit 原装、分装
人基质金属蛋白酶3(MMP-3)ELISA kit 规格: 96T/48T Human Matrix metalloproteinase-3—MMP-3 ELISA kit 原装、分装
人基质金属蛋白酶2(MMP-2) 规格: 96T/48T Human Matrix metalloproteinase-2—MMP-2 ELISA kit 原装、分装
人基质金属蛋白酶13(MMP-13) 规格: 96T/48T Human Matrix metalloproteinase-13—MMP-13 ELISA kit 原装、分装
人基质金属蛋白酶10(MMP-10) 规格: 96T/48T Human Matrix metalloproteinase-10—MMP-10 ELISA kit 原装、分装
人基质金属蛋白酶1(MMP-1) 规格: 96T/48T Human MMP-1——Matrix metalloproteinase-1 ELISA kit 原装、分装
人巨噬细胞炎性蛋白-3β( MIP-3β) 规格: 96T/48T Human Macrophage Inflammatory Protein-3β,MIP-3β ELISA kit 原装、分装
人巨噬细胞炎性蛋白-3α(MIP-3α) 规格: 96T/48T Human Macrophage Inflammatory Protein-3α,MIP-3α ELISA kit 原装、分装
人巨噬细胞炎性蛋白-1β (MIP-1β) 规格: 96T/48T Human Macrophage Inflammatory Protein-1β,MIP-1β ELISA kit 原装、分装
人巨噬细胞炎性蛋白-1α ( MIP-1α) 规格: 96T/48T Human Macrophage Inflammatory Protein-1α,MIP-1α ELISA kit 原装、分装
人巨噬细胞来源的趋化因子(MDC) 规格: 96T/48T Human Macrophage-Derived Chemokine,MDC ELISA KIT 原装、分装
人巨噬细胞克隆刺激因子(M-CSF) 规格: 96T/48T Human Macrophage Colony-Stimulating Factor,M-CSF ELISA kit 原装、分装
人单核细胞趋化蛋白-3(MCP-3) 规格: 96T/48T Human Monocyte chemotactic protein-3,MCP-3 ELISA kit 原装、分装
人单核细胞趋化蛋白-2(MCP-2) 规格: 96T/48T Human Monocyte chemotactic protein-2,MCP-2 ELISA kit elisa免疫检测试剂盒原装、分装
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