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ELISA试剂盒价格测定中影响因素较多

时间:2018/12/11阅读:159
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      ELISA试剂盒价格方法被广泛应用于各种抗原和抗体测定.在Elisa测定中影响因素较多,在检测过程中除正常反应外,有时常见到一些错误的结果.引起ELISA测定错误结果的原因主要有:标本因素;试剂因素;操作因素.
1.样品稀释 
一般产品的样品稀释倍数均通过大量试验确定,以保证试验的灵敏度和特异性.酶联免疫反应是一种敏感性很高的反应,如果血清不稀释,不可避免会产生很强的非特异性反应,出现假阳性.
2.试剂盒平衡 
Elisa中所有试剂和板条均应在试验前平衡至室温(约25℃),一般需在室温放置20~30分钟以上.平衡时间太短会造成试剂混匀不够,样品孵育时间相对缩短,ELISA反应不够充分.冬季室温低,可将试剂盒置37℃温箱20分钟.
3.样品和试剂的混匀 
在稀释前、后的样品必须充分混匀,所有试剂在加样前也须摇匀,以保证试验的均一性.
4.加样 
加样是一项很重要的步骤.加样不可太快,要避免加在孔壁上部,不可溅出和产生气泡.加样太快,无法保证微量加样的准确性和均一性.加在孔壁上部的非包被区,易导致非特异吸附.
5.温育 
温育是ELISA测定中影响测定成败*为关键的一个因素.ELISA作为一种固相免疫测定,抗原抗体的结合反应在固相上进行,要使液相中的抗原或抗体与固相上的特异抗体或抗原*结合,必须在一定的温度条件下反应一定的时间.

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