成都摩尔科学仪器有限公司
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阅读：115发布时间：2022-8-26
高效液相色谱柱的使用与维护
色谱柱是高效液相色谱的心脏，在高效液相色谱仪的使用中，保持色谱柱的柱效、容量和渗透粉性，延长柱子的使用寿命非常重要。因此对高效液相色谱柱的维护是关键。
1 色谱柱的构造
色谱柱由柱管、压帽、卡套(密封环)、筛板(滤片)、接头、螺丝等组成。柱管多用不锈钢制成，压力不高于70㎏/㎝2时，也可采用厚壁玻璃或石英管，管内壁要求有很高的光洁度。为******柱效，减小管壁效应，不锈钢柱内壁多经过抛光。还有使用熔融硅或玻璃衬里的，用于细管柱。色谱柱两真个柱接头内装有筛板，是烧结不锈钢或钦合金，孔径0.2-20 μm(5-10μm)，取决于填料粒度，目的是防止填料漏出。
色谱柱按用途可分为分析型和制备型两类，尺寸规格也不同:
(I)常规分析柱(常量柱)，内径2-5mm(常用4.6mm，赛分能够提供4mm和5mm )，柱长10-30cm更有其他可以定做的规格。 ;
(2)窄径柱，又称细管径柱、半微柱，内径1 -2mm ,柱长10-20cm;
(3)KB毛细管柱(又称微柱)，内径0.2-0.5mm;
(4)半制备色谱柱，内径>5mm;
(5)实验室制备柱，内径20-40rnm，柱长10-30cm;
(6)生产制备柱内径可达几十厘米。柱内径一般是根据柱长、填料粒径和折合流速来确定，目的是为了避免管壁效应。
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2色谱柱的使用和维护
在日常分离分析工作中，色谱柱的正确使用和维护十分重要，色谱柱使用是否得当，直接影响色谱柱的寿命，稍有不慎***会降低柱效、缩短使用寿命甚至损坏。在色谱操纵过程中，需要留意下列题目，以维护色谱柱。
(1)柱子在装卸、更换时，动作要轻，接头拧紧要适度。必须防止较强的机械振动，以免柱床产生空隙。
(2)假如仪器用来做常规分析，样品种类有限，但分析次数多，则不妨为每一类常规分析配置一根专用柱，这样有助于延长柱子的寿命。
(3)避免压力和温度的急剧变化及任何机械震动。温度的忽然变化或者使色谱柱从高处掉下都会影响柱内的填充状况;柱压的忽然升高或降低也会冲动柱内填料，因此在调节流速时应该缓慢进行，在阀进样时阀的转动不能过缓。
(4)应逐渐改变溶剂的组成，特别是反相色谱中，不应直接从有机溶剂改变为全部是水，反之亦然。
(5)如使用柱温控制装置时，应留意在通人活动相后才能升温。
(6)一般说来色谱柱不能反冲，只有生产者指明该柱可以反冲时，才可以反冲除往留在柱头的杂质。否则反冲会迅速降低柱效。
(7)选择使用适宜的活动相，以避免固定相被破坏。有时可以在进样器前面连接一个预柱，分析柱是键合硅胶时，预柱为硅胶，可使活动相在进进分析柱之前预先被硅胶“饱和"，避免分析柱中的硅胶基质被溶解。
8)避免将基质复杂的样品尤其是生物样品直接注人柱内，需要对样品进行预处理或者在进样器和色谱柱之间连接一个保护柱。保护柱一般是填有相似固定相的短柱。保护柱可以而且应该经常更换。
(9)经常用强溶剂冲洗色谱柱，清除保存在柱内的杂质。在进行清洗时，对流路系统中活动相的置换应以相混溶的溶剂逐渐过渡，每种活动相的体积应是柱体积的20倍左右，即常规分析需要50-75mL。
(10)保存色谱柱时应将柱内布满乙腈或甲醇，柱接头要拧紧，防止溶剂挥发干燥。尽对禁止将缓冲溶液留在柱内静置过夜或更长时间。
(11)色谱柱使用过程中，假如压力升高，一种可能是烧结滤片被堵塞，这时应更换滤片或将其取出进行清洗;另一种可能是大分子进人柱内，使柱头被污染;假如柱效降低或色谱峰变形，则可能柱头出现塌陷，死体积增大。
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