EB病毒转化的人B淋巴细胞；KMY1008实验方法 返回列表页

EB病毒转化的人B淋巴细胞；KMY1008实验方法操作步骤：
1）贴壁细胞传代：提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热，用75%酒精擦拭后再放入超净台内，吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液，加少量PBS润洗细胞，加入适量*，使*的量能盖住细胞，37℃孵育，每隔2~3min显微镜下观察，待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去*，加入新鲜培养基，晃动细胞瓶，终止*作用，用吸管小心吹打贴壁的细胞，制成细胞悬液。控制吹打的力度，避免产生大量的气泡，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养，隔天观察贴壁生长情况。
2）悬浮细胞传代：将细胞悬液转移到无菌离心管内，1000rpm离心5min，弃去上清，加入新鲜的培养基，用吸管小心吹散沉淀，制成细胞悬液，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养。

细胞名称   EB病毒转化的人B淋巴细胞；KMY1008实验方法
形态特性 淋巴母细胞样

生长特性 悬浮生长

特征特性 该细胞系来源于一成年男性的外周血。2010年由中科院昆明细胞库通过EB病毒转化的方法建立。

培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 15%NBS

传代方法 1:2传代；5-6天一次

传代情况 P2

冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS

支原体检测 荧光法（-）

STR -

同工酶

染色体

使用权限 A类

EB病毒转化的人B淋巴细胞；KMY1008实验方法细胞培养
1、冷冻管应如何解冻？
取出冷冻管后， 须立即放入37 ℃水槽中快速解冻， 轻摇冷冻管使其在1 分钟内全部融化， 并注意水面不可超过冷冻管盖沿， 否则易发生污染情形。另冷冻管由液氮桶中取出解冻时， 必须注意安全， 预防冷冻管之爆裂。
2、细胞冷冻管解冻培养时， 是否应马上去除DMSO？
除少数特别注明对DMSO 敏感之细胞外， 绝大部分细胞株（包括悬浮性细胞）， 在解冻之后， 应直接放入含有10-15ml新鲜培养基之培养角瓶中， 待隔天再置换新鲜培养基以去除DMSO 即可， 如此可避免大部分解冻后细胞无法生长或贴附之问题。
3、可否使用与原先培养条件不同之培养基？
不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基， 若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基， 细胞大都无法立即适应， 造成细胞无法存活。
4、可否使用与原先培养条件不同之血清种类？
不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源， 所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生*的影响。来自不同物种的血清， 在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同，血清使用错误常会造成细胞无法存活。
小鼠垂体瘤细胞;GT1-1

人表皮微血管内皮细胞(HDMEC)( 5×105 )

Raji，人Burkitt's淋巴瘤细胞

人结直肠腺癌细胞;COLO 320DM [COLO320DM] 大鼠肾小管上皮细胞*培养基 100mL

MLTC-1 小鼠间质细胞瘤细胞

EDA2R Others Human 人 EDA2R / XEDAR / TNFRSF27 人细胞裂解液 (阳性对照)
CD8B Others Human 人 CD8B / P37 / LEU2 人细胞裂解液 (阳性对照)

CL-0167NCI-H292(人肺癌细胞)5×106cells/瓶×2

小鼠肠静脉内皮细胞*培养基 100mL

marc-145猴胚胎肾上皮细胞 Marc-145 monkey embryonic kidney epithelial cells DMEM+10% FBS

LIF Protein Human 重组人 LIF 蛋白 (Fc 标签)

RK1(大鼠肾细胞) 5×106cells/瓶×2 786-0(肾透明细胞腺癌)
CL-0167NCI-H292(人肺癌细胞)5×106cells/瓶×2

CD8B Others Human 人 CD8B / P37 / LEU2 人细胞裂解液 (阳性对照)

小鼠肠静脉内皮细胞*培养基 100mL

marc-145猴胚胎肾上皮细胞 Marc-145 monkey embryonic kidney epithelial cells DMEM+10% FBS

LIF Protein Human 重组人 LIF 蛋白 (Fc 标签)

RK1(大鼠肾细胞) 5×106cells/瓶×2 786-0(肾透明细胞腺癌)
人11去氢血栓烷B2elisa试剂盒  进口分装  4,4''-二溴对三联苯(>95.0%(GC))  4,4''-Dibromo-p-terphenyl  号：  17788-94-2  质量规格：  >95.0%(GC)

人维生素D2elisa试剂盒  进口分装  酞菁铜(II)(α-型)(>90.0%(T))  Copper(II) Phthalo (α-form)  号：  147-14-8  质量规格：  >90.0%(T)

人戊型肝炎病毒IgGelisa试剂盒  进口分装  喹吖啶
缓冲动力-盐培养基  进口分装  乙酸钠三水(分子生物学级)  Sodium acetate, trihydrate  号：  6131-90-4  质量规格：  >99%,分子生物学级

动力—盐培养基(A法)  进口分装  脱叶灵,噻苯隆  Thidiazuron  号：  51707-55-2  质量规格：  >98%,分子生物学级

明胶培养基(营养明胶)100g供测定细菌液化明胶使用  进口分装  (AR)    号：    质量规格：  >99.5%,AR

克氏双糖铁琼脂  进口分装  乙醇脱氢酶  ADA, Alcohol dehydrogenase   号：  9031-72-5  质量规格：  >300U/mg,BR
EB病毒转化的人B淋巴细胞；KMY1008实验方法溴化十六烷基*铵琼脂培养基  进口分装  Desmethoxy Ranol-d5  中文名称：  去甲氧基ranol-d5  编号：    分子结构式：  C23H26D5N3O3

十六烷*基*培养基  进口分装  Manidipine-d4  中文名称：  manidipine-d4  编号：    分子结构式：  C35H34D4N4O6

SCDLP液体培养基  进口分装  2’,3’-O-Isopropylidene-1-α-D-ribofuranosyl-1,2,4-triazole-3-carboxylic Acid Methyl Ester 5’-O-Acetate  中文名称：  2’，3’- o-isopropylidene-1 -α- d-ribofuranosyl-1,2,4-triazole-3-carboxylic酸甲酯5 - o-acetat  编号：    分子结构式：  C14H19N3O7

TSA胰蛋白胨大豆琼脂培养基(大豆消化酪素琼脂培养基)  进口分装  4-Hydrazinobenzoic Acid-d4 Hydrochloride  中文名称：  4-hydrazinobenzoic acid-d4盐酸盐  编号：  1246816-67-0  分子结构式：  C7H5D4ClN2O2

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