EB病毒转化的人B淋巴细胞；KMY0908实验方法 返回列表页

EB病毒转化的人B淋巴细胞；KMY0908实验方法操作步骤：
1）贴壁细胞传代：提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热，用75%酒精擦拭后再放入超净台内，吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液，加少量PBS润洗细胞，加入适量*，使*的量能盖住细胞，37℃孵育，每隔2~3min显微镜下观察，待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去*，加入新鲜培养基，晃动细胞瓶，终止*作用，用吸管小心吹打贴壁的细胞，制成细胞悬液。控制吹打的力度，避免产生大量的气泡，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养，隔天观察贴壁生长情况。
2）悬浮细胞传代：将细胞悬液转移到无菌离心管内，1000rpm离心5min，弃去上清，加入新鲜的培养基，用吸管小心吹散沉淀，制成细胞悬液，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养。

细胞名称   EB病毒转化的人B淋巴细胞；KMY0908实验方法
形态特性 淋巴母细胞样

生长特性 悬浮生长

特征特性 该细胞系来源于一无精症男性患者的外周血。2009年由中科院昆明细胞库通过EB病毒转化的方法建立。

培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 15%NBS

传代方法 1:2传代；5-6天一次

传代情况 P2

冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS

支原体检测 荧光法（-）

STR -

同工酶

染色体

使用权限 A类

EB病毒转化的人B淋巴细胞；KMY0908实验方法细胞培养
1、冷冻管应如何解冻？
取出冷冻管后， 须立即放入37 ℃水槽中快速解冻， 轻摇冷冻管使其在1 分钟内全部融化， 并注意水面不可超过冷冻管盖沿， 否则易发生污染情形。另冷冻管由液氮桶中取出解冻时， 必须注意安全， 预防冷冻管之爆裂。
2、细胞冷冻管解冻培养时， 是否应马上去除DMSO？
除少数特别注明对DMSO 敏感之细胞外， 绝大部分细胞株（包括悬浮性细胞）， 在解冻之后， 应直接放入含有10-15ml新鲜培养基之培养角瓶中， 待隔天再置换新鲜培养基以去除DMSO 即可， 如此可避免大部分解冻后细胞无法生长或贴附之问题。
3、可否使用与原先培养条件不同之培养基？
不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基， 若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基， 细胞大都无法立即适应， 造成细胞无法存活。
4、可否使用与原先培养条件不同之血清种类？
不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源， 所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生*的影响。来自不同物种的血清， 在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同，血清使用错误常会造成细胞无法存活。
293来源病毒包装细胞;ΦA

大鼠周神经成纤维细胞(RPNF)(5×105)

非洲绿猴肾细胞系/HCV-NS3;Vero-HCV-NS3

615小鼠前胃癌瘤株;Fc 小鼠肾小管上皮细胞*培养基 100mL

MEF, 小鼠胚胎成纤维细胞 Mouse

CDH16 Others Human 人 CDH16 / Cadherin-16 人细胞裂解液 (阳性对照)
CANT1 Others Human 人 CANT1 人细胞裂解液 (阳性对照)

CL-0191RBE(人胆管癌细胞)5×106cells/瓶×2

小鼠肠平滑肌细胞*培养基 100mL

MS1小鼠胰岛内皮细胞 MS1 mouse islet endothelial cells DMEM培养基+5%FBS

CLCF1 Protein Human 重组人 NNT1 / CLCF1 / CLC 蛋白 (Fc 标签)

RAG(小鼠肾腺癌细胞) 5×106cells/瓶×2 H08910(卵巢癌细胞)
CL-0191RBE(人胆管癌细胞)5×106cells/瓶×2

CANT1 Others Human 人 CANT1 人细胞裂解液 (阳性对照)

小鼠肠平滑肌细胞*培养基 100mL

MS1小鼠胰岛内皮细胞 MS1 mouse islet endothelial cells DMEM培养基+5%FBS

CLCF1 Protein Human 重组人 NNT1 / CLCF1 / CLC 蛋白 (Fc 标签)

RAG(小鼠肾腺癌细胞) 5×106cells/瓶×2 H08910(卵巢癌细胞)
人肌细胞生成素(MYOG)ELISAKit  进口分装  α-去环己基-α-苯基奥昔布宁  α-Descyclohexyl-α-phenyl Oxybutynin  号：  14943-53-4  质量规格：  美国进口

人β细胞素(BTC)ELISAKit  进口分装  西他列汀基甲酰β-D-葡萄糖苷酸  Sitagliptin Carbamoyl β-D-Glucuronide  号：  940002-59-5  质量规格：  美国进口

人细胞纤维连接蛋白(cFn)ELISAkit  进口
溶壁微球菌产抗生菌素支/瓶  进口分装  溴酸钠(> 98%,BC)  Sodium bromated  号：  7789-38-0  质量规格：  > 98%,BC

溶藻细菌产*支/瓶  进口分装  次酸钠溶液  Sodium hypochlorite solution  号：  7681-52-9  质量规格：  Tech Grade

肉葡萄球菌支/瓶  进口分装  *十二水(>98%,BR)  Sodium phosphate, dibasic, dodecahydrate  号：  10039-32-4  质量规格：  >98%,BR

乳链球菌产杀蚜素，毒杀蚜虫、红蜘蛛及某些鳞翅目幼虫。支/瓶  进口分装  磷钨酸钠(>98%,BC)  Sodium phosphotungstate, hydrate  号：  51312-42-6  质量规格：  >98%,BC
EB病毒转化的人B淋巴细胞；KMY0908实验方法大肠杆菌O157显色琼脂平板  进口分装  虫草素  标准品别名：  冬虫夏草素、冬虫夏草菌素、蛹虫草菌素、虫草菌素  英文名称：  Cordycepin  编号：  73-03-0

*麦康凯琼脂平板  进口分装  *  标准品别名：  土当归酸、齐墩果醇酸、丁香油素  英文名称：  Oleanic acid  编号：  508-02-1

改良EC肉汤（mEC+n）  进口分装  柴胡皂苷B2  标准品别名：    英文名称：  Saikosaponin B2  编号：  58316-41-9

MUG培养基  进口分装  盐酸  标准品别名：  消旋盐酸  英文名称：   hydrochloride  编号：

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