大鼠载脂蛋白2B（ApoB）elisa试剂盒操作程序和准备工作

大鼠载脂蛋白2B（ApoB）elisa试剂盒操作程序

① 加抗体包被 → 4℃**，洗涤三次、抛干

② 加待检抗原 → 37℃ 30分钟，洗涤三次、抛干

③ 加酶标抗体 → 37℃ 30分钟，洗涤三次、抛干

④ 加底物液　→ 37℃ 15分钟，加终止液

⑤ 用ELISA检测仪测定OD值

试剂准备

a.使用前所有试剂应置于室温平衡至少30分钟。

b.本试剂盒可以直接加样，如浓度过高，可以进行适当比例的稀释（推荐2-5倍稀释），计算时应将结果乘以稀释的倍数。

c.洗涤液为25倍浓缩液，使用前将所有洗涤液倒入500ml或1L的烧杯中，用双蒸水定容到500ml即为工作液。

d.标准品的稀释：先用标准品/样品稀释液将标准品冻干粉定容到150μl，然后漩涡混匀30秒即为标准品原液（24小时内用完）。APOB试剂盒；大鼠载脂蛋白B(APOB)ELISA试剂盒取5支干净的Eppendorf管，每管加150μl的标准品稀释液，分别标记上160ng/L,80ng/L,40ng/L,20ng/L ,10ng/L .取150μl标准品原液加入标记160ng/L 的管中，混匀后同样取出150μl，加入下一管，以此类推直至后一管。零孔：直接加标准品/样品稀释液。

e.*抗原的稀释：抽取*抗原稀释液1ml到浓缩型*抗原中，漩涡混匀15秒至冻干粉*溶解，然后将所有液体移入稀释液瓶中,再次漩涡混匀30秒即为*抗原工作液。

f.亲和素-HRP的稀释：低速离心（使浓缩液全部沉到管底），将浓缩亲和素-HRP全部移入相应稀释液中然后漩涡混匀30秒即为亲和素-HRP工作液