透明质酸（HA）elisa定量检测试剂盒的操作步骤

透明质酸(HA)ELISA检测试剂盒等抚生生物ELISA试剂盒间接法简单操作步骤：

（1）、将特异性抗原与固相载体联结，形成固相抗原；

（2）、加稀释的受检血清，保温反应。血清中的特异抗体与固相抗原结合，形成固相抗原抗-体复合物；

（3）、加酶标抗抗体；

（4）、加入酶促反应底物，发生显色反应，显色的深浅与待测抗体的量成正比。

透明质酸(HA)ELISA检测试剂盒操作步骤：

1、加样：分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50µl，待测样品孔中先加样品稀释液40µl，然后再加待测样品10µl（样品终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

2、温育：用封板膜封板后置 37℃温育30分钟。

3、配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用

4、洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此

重复5次，拍干。

5、加酶：每孔加入酶标试剂50µl，空白孔除外。

6、显色：每孔先加入显色剂A50µl，再加入显色剂B50µl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色

10 分钟.

7、终止：每孔加终止液50µl，终止反应(此时蓝色立转黄色)。

8、测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。