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手动进样的注意问题

阅读:945发布时间:2019-4-30

1、注射速度慢时,会使样品的汽化过程变长,导致样品进入色谱柱的初始谱带变宽。正确的注射方法应当是:取样后,一手持注射器(防止汽化室的高气压将针芯吹出),加一只手保护针尖(防止插入隔垫时弯曲),先小心地将注射针头穿过隔垫,随即以快的速度将注射器插到底,与此同时迅速将样品注射入汽化室(注意不要使针芯弯曲),然后快速拔出注射器。注射样品所用时间及注射器在汽化室停留的时间越短越好,且每次注射的过程越重现越好。
2、取样准确而重现 即取样量要准确,抽取样品的速度要重现,以保证进样的重现性。特别是黏度大的样品,要避免在注射器中形成气泡。防止产生气泡的办法是将注射器插入样品溶液,多次推拉针芯,推下时要快,拉起时要慢。后可能会有很小的气泡在针管中,不易除去。这时可以取多于实际进样量的样品(比如,进样量为1μl,可取2-3μl样品),然后将针尖朝上,用手指轻轻弹击针管气泡就会跑到液体的上方。再将多余的样品推出针管,气泡也就排出去了。这跟护士打针时避免将空气注射进体内的道理是一样的。要使取样量准确,也是这样倒置注射器,使视线与针管中的液面处于同一水平上。然后,推压针芯到所需刻度。至于针尖外面粘附的一部分样品,可用一片滤纸快速擦拭而除去(注意不能让滤纸吸去针管内的样品),也可不管它,因为它会被进样隔垫擦去(但这会加速隔垫的老化),而隔垫的问题则由隔垫吹扫来解决。
3、避免样品之间相互干扰 如果进样时注射器内有上一个样品的残留组分,就会干扰下一个样品的分析,带来定量误差。在色谱中这叫做记忆效应,是必须消除的。具体办法是洗针。取样前先用样品溶剂洗针到少3次(抽满针管的三分之二,再排出)。再用要分析的样品洗针至少3次,然后取样(多次上下抽动),这样基本上可消除记忆效应。如果同时几个样品进行分析,且要交替进样(如用外标法分析时,可能对标样和实际样品交替进样),则是每个样品各使用一个注射器,既能避免样品之间的相互干扰,又不至于消耗太多的样品(可用的样品量小时,这是要考虑的问题)。
4、选择合适的注射器 GC分析常用的是10μl微量注射器,其进样量一般不要小于1μl。如果进样量要控制在此1μl以下,就应采用5μl或者1μl的注射器.此时要注意,5μl或1μl的注射器往往是将样品抽在针尖内,因此观察不到针管中的液面,故很可能抽入气泡.取样时反复推拉针芯,以确保针尖内没有气泡.
5、减少注射歧视 所谓注射歧视是指注射针插入GC进样口时,针尖内的溶剂和样品中的易挥发组分首先开始汽化;无论注射速度多快,不同沸点的组分总是有汽化速度的差异。当注射完毕抽出针尖时,注射器中残留样品的组成就与实际样品的组成有所不同。显然,高沸点组分残留的要多一引起。换句话说,进入色谱柱的样品中的高沸点组分含量可能低于实际样品,从而造成定量分析的误差。如果能保证每次进样的速度严格一致辞(如用自动进样器),经标样校正后,可忽略这一歧视作用。但用手动进样时,这是难以达到的。所以必要时应使用热针进样或溶剂冲洗进样技术。前者是指取样前先将注射针插入汽化室预热一定时间,然后再按正常方法进样;后者则是取样前先在注射器中抽入一定量的溶剂,再抽取样。这样在注射样品时,溶剂有可能将样品全部冲洗进入汽化室。相比之下,溶剂冲洗进样的操作较为简单有效,但应注意所用溶剂量太大会造成色谱柱超载。


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