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ELISA试剂盒小技巧改变实验误差大问题：
A、由于滴瓶的精密性肯定不如加样器，不排除不同滴头滴量的误差，另外滴加过程中是否产生气泡、速度是否均匀，是否颤动等影响液量的因素均可导致以上情况，高标准要求时应使用加样器。
B、肉眼观察稍显色，酶标仪打印为阴性的标本在实际工作中是难以避免的，肉眼目测结果不可靠，应以酶标仪判读为准。
C、不同的ELISA试剂盒厂家产品其生产工艺和操作方法会略有不同，务必按照所用试剂盒严格操作，否则容易产生检测结果的不确定性。
D、加样时样品量误差，对于阴或很阳的标本影响不大，但对阈值附近的标本影响极大，建议校对加样器。
E、反应时间的误差，做大量标本时，*孔和zui后一孔以及一些特殊标本可能影响较大。
F、由阴性变为强阳性原因多为操作过程中漏加试剂等有关。
G、若不同批号试剂的不同组分(A液或酶工作液)，或不同试剂的不同组分进行交叉使用，有可能出现显色浅或本底高，花板等情形。
 

ELISA试剂盒进行各项实验条件的选择是很重要的，其中包括:
（1）固相载体的选择：许多物质可作为固相载体，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等，其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等，在同一实验条件下进行反应，观察其显色反应是否均一性，据此判明其吸附性能是否良好。
（2）包被抗体（或抗原）的选择：将抗体（或抗原）吸附在固相载体表面时，要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0～9.6之间，吸附温度，时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃18～24小时，进行包被后，在其它试验条件相同时，观察阳性标本的OD值，选择OD值zui大而蛋白量zui少的浓度，对于多数蛋白质来说通常为1～10μg／ml。

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