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液相色谱基础知识和常见问题

来源:赛默飞色谱及痕量元素分析   2020年06月15日 09:32  

问1:你知道液相色谱的基本原理吗?
答1:液相色谱基本原理是分离度(也叫分辨率)正比于
四分之理论塔板数n的平方根乘以
选择因子a比上a-1再乘以
分离因子k+1比上k
我认为分离度和这些变量是正比关系而不是准确的等于,如果非要说是等于的关系,再加上一个常数可能会更合理。
n和柱长(正比)、粒径(反比)、固定项填料(全多孔硅胶型,表面多孔/核壳型)有关
a和流动相种类(反向色谱:甲醇和乙腈)、pH(2到9)、柱温有关
分离因子/保留因子(平衡状态下,固定相中含量与流动相中的比值)和流动相种类、流动相比例、柱温、固定相填料有关

问2:液相色谱的主要部件有哪些?
答2:液相色谱的部件,我以我使用过的安捷伦为例吧!按流动相流路的顺序:流动相→真空脱气机(在线脱气装置)→泵(二元泵和四元泵:区分,有几种流动相按一定比例混合)
→进样器(手动和自动)→柱温箱→检测器(紫外:朗伯-比尔定律,质谱:荷质比,荧光:跃迁,elsd:蒸发光)

问3:在日常工作中,遇见液相色谱仪哪些异常情况?又是如何解决的?
答3:峰的问题:峰前沿,峰重叠,峰拖尾,鬼峰,基线漂移。
压力问题:超压,低压,压力波动。
硬件问题:日常损耗,零件损坏。

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