人前列腺癌细胞；LNCaP操作步骤

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细胞名称 人前列腺癌细胞；LNCaP操作步骤
形态特性  上皮样；梭形
生长特性 贴壁生长
特征特性  该细胞由Horoszewicz JS于1977年从一名50岁的明确诊断为转移性前列腺癌的白人男性患者的左锁骨上淋巴结细针穿刺的活体组织中分离建立的。5-α-双氢睾酮可影响该细胞的生长和酸性磷酸酶的产生。该细胞不形成均一的单层而是成簇生长，所以传代的时候要反复吹打形成单个细胞；该细胞贴壁不牢，达不到汇合状态，而且会使培养基迅速变酸；传代后48h内一定要保持培养瓶静止.如果此时挪动培养瓶，会使大部分细胞从瓶底脱落。如果出现此种情况，需要重新孵育24~48h使细胞重新贴壁，细胞贴壁后可更换培养基。 
培养条件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS
传代方法  1:3~1:6传代；5~7天1次。
传代情况 P50
冻存条件  基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法（-）
STR  Amelogenin：X，Y；CSF1PO：10，11；D13S317：10，12；D16S539：11；D18S51：9，11，12；D19S433：13.2，15；D21S11：29，32.2；D2S1338：16，17；D3S1358：16；D5S818：11，12；D7S820：8.1，9.1，10.3；D8S1179：12，14；FGA：19，20；TH01：9；TPOX：8，9；vWA：16，18；
同工酶 
染色体  72~88，XY
使用权限 A类
人前列腺癌细胞；LNCaP操作步骤操作步骤：
1）贴壁细胞传代：提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热，用75%酒精擦拭后再放入超净台内，吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液，加少量PBS润洗细胞，加入适量胰酶，使胰酶的量能盖住细胞，37℃孵育，每隔2~3min显微镜下观察，待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶，加入新鲜培养基，晃动细胞瓶，终止胰酶作用，用吸管小心吹打贴壁的细胞，制成细胞悬液。控制吹打的力度，避免产生大量的气泡，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养，隔天观察贴壁生长情况。
2）悬浮细胞传代：将细胞悬液转移到无菌离心管内，1000rpm离心5min，弃去上清，加入新鲜的培养基，用吸管小心吹散沉淀，制成细胞悬液，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养。
人前列腺癌细胞；LNCaP操作步骤温馨提示:
1）公司努力实现为科学研究提供实验细胞技术服务。所提供的实验细胞及其子代，不能用于人体实验和临床诊断、治疗。
2）公司细胞资源中心承诺尽大努力对实验细胞资源相关信息进行及时更新。但限于我们的技术条件，中心不保证其准确性。
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25g    琥珀酸，六水    
5g    5'- 单磷酸苷二    
1mg    重组蛋白 G    
β- 甘油磷酸二盐    13408-09-8    10g
放线酮溶液 ,100mg/mL    120688-1    1mL
100mL    胰酶消化液 ( 含 EDTA)    
5mL    角膜上皮细胞生长因子    
5g    6- 羟基多巴胺    
10mL    DNA 溶解液    
硝苯吡啶    21829-25-4    500mg
小鼠抗 VSV-G 标签单抗    130583-100    100μL
15 次    植物叶绿体纯化试剂盒    
5g    L- 鸟氨酸    
100mg    胃粘膜素    
100mL    酚 - 混合液 (DNA 提取 )    
L- 丝氨酸    56-45-1    10g
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